双酶法酶解大豆蛋白制备大豆低分子肽的研究

以水解度为考察指标,研究了枯草杆菌AS1．398中性蛋白酶、木瓜蛋白酶制备大豆肽的工艺参数。结果表明,利用AS1．398中性蛋白酶与木瓜蛋白酶协同水解大豆蛋白制取低分子肽的方法是可行的,木瓜蛋白酶与AS1．398蛋白酶酶活力之比为1：1情况下水解效果较佳。双酶水解的最佳条件是底物浓度100g/L,温度40℃,加酶量为12500U／g,pH为7．5。在此条件下,研究了水解时间与低分子肽得率的关系,表明水解4．5h即可。     

鲢肉脱脂及其酶解技术研究

采用蒸煮法、脂肪酶法、乙醚法对鲢肉进行脱脂,并比较了不同酶制剂对脱脂鲢肉的水解效果.试验结果表明,脂肪酶法的脱脂效果最好,其脱脂率为98.11%.木瓜蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶、枯草杆菌碱性蛋白酶、胰蛋白酶及复合蛋白酶分别对脱脂鱼肉进行水解,根据水解度及感官品尝指标,发现复合蛋白酶为最佳酶选,蒸煮法脱脂鱼肉为最佳底物.再通过正交实验优化,得到复合蛋白酶水解蒸煮脱脂鱼肉的最佳水解工艺条件是:pH6.5,温度55℃,酶量3000U/g.蛋白质,底物浓度(鱼肉:水)1:3.     

复合酶生产酪蛋白磷酸肽的工艺研究

实验以木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶As1．398、碱性蛋白酶As2709 4种酶复合水解酪蛋白，生产酪蛋白磷酸肽。设计了木瓜蛋白酶 中性蛋白酶As1．398、木瓜蛋白酶 碱性蛋白酶As2709，胰蛋白酶 中性蛋白酶As1．398、胰蛋白酶 碱性蛋白酶As2709、木瓜蛋白酶 胰蛋白酶 中性蛋白酶As1.398和木瓜蛋白酶 胰蛋白酶 碱性蛋白酶As2709六种试验方案。通过比较水解度、酶促水解速率(酶活力)、得率和N／P比等工艺参数，探索合适的实验工艺条件。我们发现胰蛋白酶 中性蛋白酶As1．398这组的产品综合结果最佳。     

双酶分步水解牛骨蛋白工艺的优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺。选用枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白,以水解度为特征性指标,采用L9(34)正交试验设计优化双酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明：牛骨粉蛋白质含量高达30.72%,约为鲜骨蛋白质含量的3倍;采用胰蛋白酶先水解,中性蛋白酶后水解的方式分步水解牛骨蛋白,其效果优于两种酶同时水解及中性蛋白酶先水解,胰蛋白酶后水解;中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白的最佳工艺条件：固液比1:2,起始pH8.0,胰蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃、150r/min振荡水解3h,然后用中性蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃以150r/min振荡水解3h,水解度达18.34%;粒径小的活性炭对酶解液脱苦、脱色及除腥效果优于粒径大的活性炭。     

酶法提取烤鳗下脚料中水解动物蛋白的研究

酶解提取烤鳗下脚料的水解动物蛋白是可行的，实现发现：在枯草杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶这三种水解中，枯草杆菌蛋白酶的水解效率最高。通过正交试验，确定用枯草杆菌蛋白酶在50℃、pH7．5、固液比5:8，添加酶量为下脚料中蛋白质含量为2．0％，反应时间为5h时，其水解度达82．6％。     

双酶协同水解乌贼内脏的工艺条件研究

以乌贼内脏为原料,利用5种蛋白酶对其进行水解,从中选出水解效果较好的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,并确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶复合酶解乌贼内脏的最佳工艺。结果表明:木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的最佳复合比例为3∶1,总加酶量为6000U/g;水解温度为50℃;固液比为1∶3;水解时间为7h;pH值为6.5,所得乌贼内脏水解液的水解度可达24.83%。所得酶解产物经Aglient 1200高效液相色谱分析,共检出17种氨基酸,氨基酸总量达57.44%,其中必需氨基酸含量占总氨基酸含量的41.90%,氨基酸比例均衡。     

酶法制取罗非鱼动物蛋白水解液的研究

利用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶对罗非鱼肉进行水解制备水解动物 蛋白,以水解度(DH)为指标对水解过程进行分析,选取中性蛋白酶作为适宜的单酶并研究其酶法水解最适宜的工 艺条件。为进一步提高水解度,进行了中性蛋白酶与酸性蛋白酶复合酶解的研究。     

酶解海参肠口服液的研究

以海参加工废弃物--海参肠为原料,研究了不同的酶及酶组合水解工艺.其中,先采用A.S1398中性蛋白酶和木瓜蛋白酶(木瓜蛋白酶:A.S1398中性蛋白酶=1:1,酶活力比)双酶水解,再用Flavourzyme进行分段水解海参肠蛋白质,水解效果最佳,正交试验结果表明.Flavourzyme二阶段酶水解的最适工艺条件为酶添加量150U/g原料,时间1.5h,温度55℃,pH7.0,蛋白质水解度达88.08%;水解液再经过浓缩、调配、包装可制成营养丰富的保健品口服液.     

双酶法制备麦溪鲤蛋白水解液的研究

研究了双酶法制备麦溪鲤蛋白水解液。采用枯草杆菌中性蛋白酶和木瓜蛋白酶同时加入的方式,得到麦溪鲤蛋白水解液的水解率为72.42%。最佳的工艺条件为温度50℃,酶量均为2%,底物:水均为1:2.5,水解时间5.5h。     

几种酶对鸭蛋蛋清水解效果的比较研究

为筛选利用鸭蛋蛋清酶解制备功能性多肽的条件,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味酶4种酶对新鲜鸭蛋蛋清进行了水解。对每种酶分别进行单因素试验及正交试验,以水解度为指标确定每种酶的最佳水解条件。结果表明,在各自的最佳水解条件下,木瓜蛋白酶的水解效果最好,其最佳水解条件为pH为9.5,水解温度为50℃,底物浓度为25%,酶底比为8.0%,在此条件下水解度为29.01%。     

响应面法优化紫贻贝蛋白酶解工艺条件

分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶7种蛋白酶对紫贻贝蛋白的酶解工艺条件进行研究。根据水解度和感官评定的结果,确定中性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶可以作为紫贻贝蛋白酶解的外加蛋白酶。将上述4种蛋白酶进行两两复配,通过试验确定复合蛋白酶与中性蛋白酶按1:1进行复配,可作为紫贻贝蛋白酶解的最适复配酶。采用响应面优化分析得出复配蛋白酶最佳酶解条件为酶解时间2h、pH7、酶解温度50℃、酶添加量0.4%,在此条件进行实验,测得水解度为70.25%,游离氨基酸总量增加了388.46%。     

白贝酶解调味液的研制

以白贝肉为原料,利用蛋白酶作为催化剂研制酶解调味液,通过单因素试验和正交试验得到酶解调味液的最佳工艺条件,并对酶解过程中部分生化特性进行研究。结果表明,同时加入枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）蛋白酶和木瓜蛋白酶,添加比例为1∶3,总加酶量为0.16 g/10 g原料,水解温度为55 ℃,水解时间为3 h,初始pH值为7.5。在此优化条件下,所得酶解液水解度为60.02%。酶解过程中pH值从初始7.5逐步降低,2 h后降至pH 6.9并趋于稳定;氨基酸态氮含量呈逐渐升高的趋势,2.5 h达到最高值1.26 g/100 mL,而后趋于稳定;挥发性盐基氮含量也呈先升高后稳定的趋势,2.5 h后达到最高值12.32 mg/100 mL。     

芝麻粕蛋白酶法提取工艺优化及组分分析

为了综合利用芝麻粕资源,以芝麻粕为原料,利用硬脂酸、吐温80、十二烷基硫酸钠三种表面活性剂对其进行脱脂处理,再采用水剂法去除表面活性剂,最后利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对芝麻粕蛋白进行水解,以芝麻粕蛋白溶出率为考察指标优选出最佳水解酶。在此基础上,通过单因素试验和正交试验对酶解工艺条件进行优化,并利用2,4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱法分析水解物成分。结果表明,吐温80脱脂效果最好,芝麻粕脱脂率达93.49%;碱性蛋白酶为最佳水解酶,其最佳酶解条件为料水比1∶10（g∶mL）、酶解温度50 ℃、加酶量0.04%、酶解时间3.0 h。在此最佳酶解条件下,芝麻粕蛋白溶出率为88.94%。水解物中含有20种氨基酸,其中8种人体必需氨基酸含量高于FAO/WHO的推荐值。     

采用二次回归法确定鸡肉蛋白酶法水解条件

以新鲜鸡肉作为蛋白质底物进行水解,考察了温度、时间、加酶量、pH值4个因素对鸡肉蛋白水解的影响。确定了水解鸡肉蛋白适宜的酶制剂为木瓜蛋白酶,通过单因素实验,讨论了各因素的较佳反应范围。最后对酶解条件进行优化,采用响应曲面(RSM)法,先建立数学模型,然后回归分析、模型评价,最终确定较佳酶解条件为:pH7.8、加酶量2.2%、温度48.7℃、时间9h,此时水解度为28.5%。     

酶解脱脂蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽

以实验室自制的脱脂蚕蛹蛋白为原料,利用酶工程技术,通过对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶等的筛选及单因素和响应面优化试验,对ACE抑制肽的制备工艺条件进行较系统的研究。结果表明：选择碱性蛋白酶作为脱脂蚕蛹蛋白制备ACE抑制肽的酶,制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为料液比11.88:100、温度50.22℃、pH 9.46、加酶量7.03%、酶解4h。在此条件下制备的ACE抑制肽的ACE抑制率达到41.98%。     

双酶水解提取牛蒡菊糖的研究

采用双酶水解法提取牛蒡菊糖。首先从8 种酶中选取3 种对牛蒡菊糖提取率最高的酶,分别为木瓜蛋白酶、植物蛋白酶和酸性蛋白酶,对牛蒡菊糖的提取率分别为8.83%、8.67% 和8.21%。然后对每一种酶采用单因素试验方法研究pH 值、固液比、加酶量、温度以及时间对牛蒡菊糖提取率的影响;再通过3 种酶之间的相互组合试验,选出一组最佳组合为：木瓜蛋白酶+ 植物蛋白酶,其提取率为11.43%。最后采用单因素和正交试验设计方法,研究加酶量、固液比、温度、时间以及pH 值对牛蒡菊糖提取率的影响,得到双酶水解提取牛蒡菊糖的最佳条件组合为：在木瓜蛋白酶加酶量10%、温度50℃、pH7、时间4h、固液比1:15(m/V)的条件下进行酶解,4h 后加入植物蛋白酶,加酶量20%、温度45℃、pH8,时间4h、固液比1:15(m/V),提取液经乙醇沉淀、真空浓缩,得到粗菊糖,菊糖提取率为13.41%,产品中菊糖含量为67.86%,蛋白质含量为1.32%。     

响应面法优化芝麻蛋白酶解工艺及其产物 抑菌活性的研究

目的为了得到芝麻蛋白双酶分步酶解的最佳工艺参数以及酶解产物的抑菌活性。方法采用响应面法优化双酶分步酶解芝麻蛋白的工艺参数,并以抑菌圈直径大小为指标,考察芝麻蛋白酶解产物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性以及最小抑菌浓度。结果响应面优化得到双酶分步酶解的最适酶解条件为:总酶量6200 U/g,碱性蛋白酶:木瓜蛋白酶=3:1,先加入碱性蛋白酶后反应1.6 h后加入木瓜蛋白酶,总反应时间为4 h。在此条件下,芝麻蛋白水解度实测值为29.673%,与预测值30.622%相近。芝麻蛋白酶解产物对大肠杆菌无抑制作用,但是具有抑制金黄色葡萄球菌的活性,得到其最小抑菌活性浓度为25.29mg/m L。结论响应面分析法优化芝麻蛋白双酶分步酶解工艺是可行的,芝麻蛋白酶解产物具有抑制金黄色葡萄球菌的活性。     

酶法水解麦胚蛋白及其产物的抗氧化活性研究

选择碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对麦胚蛋白进行水解,并考察其水解产物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶为制备麦胚抗氧化肽的最适蛋白酶,其最佳水解条件为:底物质量分数4%,酶添加量6 000U/g,酶解温度50℃,pH值7.5,水解至270min时抗氧化活性最大。     

多酶分步水解鸭骨的工艺研究及其产物成分分析

对鸭骨的单酶水解条件进行了优化,并在此基础上进行了多酶(双酶)分步复合水解工艺的研究,分析了最佳水解条件下的产物氨基酸组成及肽分子量分步范围。结果表明:多酶分步复合水解鸭骨的效果优于单酶水解,先用碱性蛋白酶后用木瓜蛋白酶分步复合水解的效果最好,水解度可达34.71%;鸭骨水解物中必需氨基酸含量占氨基酸总量的34.87%(色氨酸未检测),必需氨基酸的相对含量较鸭骨原料有所提高,特别是富含普通谷物中极易缺乏的赖氨酸、苏氨酸和缬氨酸等;鸭骨水解物肽的相对分子质量均在8000u以下,相对分子质量小于1000u的肽含量达31.35%。