谷胱甘肽与辅酶Q10在光气损伤中抗氧化作用的比较

目的 光气，这种常用的化工原料，曾屡次被用于战争，属窒息性毒剂，故被联合国成为“双用途毒剂”。损伤后主要的病理改变为中毒性肺水肿，目前一旦发生人员中毒，仍缺乏行之有效的救治方法。我们观察谷胱甘肽或／和辅酶Q10对光气损伤小鼠的抗氧化作用，为临床救治光气中毒提供实验资料。     

光气诱发小鼠肺水肿的凋亡与氧化损伤机制

目的 光气属于窒息性毒剂,是一种在第一次世界大战就被使用的军用战剂,也是一种广泛用于医药、染料、农药等重要的化工原料。在我国,有许多生产光气或以光气为原料的企业,职业性接触人员众多,中毒事故时有发生。光气吸入中毒最显著的临床表现是肺水肿的形成,也是中毒人员致死的主要原因,但肺水肿形成机制还不清楚,目前认为可能与下面多种病理生理因素有关：（1）酰化作用;（2）自由基损伤;（3）肺泡Ⅱ型上皮细胞中毒损伤;（4）酸碱平衡失调;（5）Ca²⁺内流损伤等。针对以上机制,许多学者进行了光气肺水肿的治疗,但效果不佳。因此,进一步研究光气肺水肿机制,是光气肺水肿治疗的迫切要求。我们的前期工作和国外的最新报告都提示,光气中毒性肺水肿,存在肺内细胞凋亡和组织中氧化应激损伤现象。本课题在成功制作光气染毒小鼠肺水肿模型的基础上,比较系统的从细胞水平和分子水平上,探讨肺水肿发生中凋亡及氧化应激损伤、相关细胞因子的调控作用。方法 本研究在建立光气染毒BALB/C小鼠肺水肿模型及其原代肺AT-Ⅱ分离、培养方法的基础上,通过激光共聚焦、电镜、流式细胞术、单细胞凝胶电泳（彗星DNA实验）、DNA凝胶电泳、TUNEL染色等技术方法,测定和观察肺水肿相关的细胞凋亡征象,包括DNA损伤和AT-Ⅱ内Ca²⁺的浓度变化,从不同侧面和角度研究光气对小鼠肺脏细胞的凋亡诱导作用;采用小鼠血清、肺脏和肝脏的MDA, T-SOD和GSH作为氧化损伤指标,研究了不同剂量的光气染毒后的不同时间氧化应激损伤作用。 结果 （1）小鼠肺脏的湿干比增加和肺泡腔充满水肿液, 提示我们建立的光气肺水肿小鼠模型是成功的;通过鞣酸染色和电镜超微结构观察作为AT-Ⅱ鉴定方法,建立了本实验室小鼠AT-Ⅱ的分离、培养方法。（2）不同剂量的光气染毒后,随着时间的延长,小鼠血清和肺脏的MDA水平增高,血清和肺脏T-SOD活性显著升高,肺脏和肝脏的GSH明显降低。（3）光气染毒后小鼠AT-Ⅱ内质网扩张,板层小体呈囊泡样改变且减少;分离的AT-Ⅱ胞膜破裂,胞核崩解,有凋亡小体形成;AT-Ⅱ内Ca²⁺的浓度显著高于对照组;AT-Ⅱ DNA呈现由圆形、致密红色核心(彗头)和朝向阳极的尾端DNA碎片(彗尾)构成的彗星形状。（4）肺Ⅰ型细胞染色质边集成团块,呈月牙形;内皮细胞染色质固缩,边集;巨噬细胞染色质边集成团块,核膜完整;纤毛细胞染色质边集成团块,线粒体轻度肿胀;嗜酸性粒细胞染色质边集,细胞膜向外膨起形成小泡,细胞器部分溶解。结论 研究结果表明,肺内外氧化应激损伤加重、诱导肺内多种细胞凋亡,可能是造成光气肺水肿发生的主要原因之一。在细胞凋亡的基础上进一步引起血管功能改变、最终使肺泡组织特别是AT-Ⅱ失代偿,分泌功能和维持肺泡张力能力降低,导致肺水渗出、肺水肿发生,呼吸换气功能下降,构成了肺水肿发生的重要机制之一。本研究结果初步证实了光气等窒息性毒剂中毒是否存在凋亡、凋亡与氧化应激损伤是否有关,弥补了此方面文献的不足。从分子水平探讨了肺水肿中凋亡发生机制,对于研究光气中毒采取有效防治措施等,具有重要理论和实际的意义。     

急性光气中毒机制与防护研究进展

光气(COCl2),化学名为二氯碳酰,于1812年采用一氧化碳与氯气在强光照射下合成,因而得名“光气”,是四大军用致死性化学武器中唯一缺乏有效救治措施的战剂。2005年11月美国环保署发表了长达100多页的光气毒理学研究进展的综述(TOXICOLOGICALREVIEW OF PHOSGENE(CAS No.75-44-5;December2005U.S.Environmental Protection Agency)。自光气问世并作为军用战剂的近百年来,光气中毒机制一直以“酰化理论”占主导地位,按照光气中毒酰化理论为线索,探索了各种治疗方法,但始终未能取得突破,因而出现了“酸碱平衡失调”、“肺泡Ⅱ型…     

光气致急性肺损伤下调差异基因的初步筛选

光气作为重要的化工原料，在生产和使用中由于防护不当经常发生急性中毒。光气的主要毒性作用是引起肺水肿，出现气道功能和结构的改变。迄今对光气中毒肺水肿的中毒机制见解不一，临床诊治亦无特效措施。本研究从对维持正常肺功能发挥重要作用的肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ细胞)入手，利用基因芯片技术，从分子水平探讨光气中毒损伤的基因改变，为进一步研究光气中毒机制提供新线索，同时为临床诊治探讨新思路。     

蜂胶提取物CAPE对光气肺损伤的治疗作用及机制研究

光气是一种经典的窒息性化学战剂,同时也是应用广泛的重要化工原料。各种意外泄露造成人员伤亡时有发生。光气中毒主要引起难治性的肺水肿,目前国际上尚未有效的临床救治措施。光气肺水肿的有效防治一直是该领域的重大国际难题。我们教研室从50年代起从事窒息性毒剂肺损伤防治研究,特别是对光气肺损伤机制及防治进行了大量的研究工作。研究发现,氧化损伤和炎症呼吸爆发在光气肺损伤中发挥着重要作用。咖啡酸苯乙酯（CAPE）是一种天然的黄酮类化合物,是蜂胶中的主要成分。CAPE结构中含有儿茶酚结构,是一种强抗氧化剂。已有研究表明,CAPE具有抗氧化、抗炎、抗癌、抗病毒和免疫调节的多重作用,提示CAPE是一种潜在的光气肺水肿救治候选药物。本研究初步探讨CAPE对光气染毒SD大鼠肺损伤的治疗作用及机制。研究中,将雄性SD大鼠随机分组,设相应对照组,光气染毒后,CAPE治疗组立即给予CAPE腹腔注射,对照组给予相应剂量的生理盐水。光气染毒后6 h,取肺泡灌洗液和肺组织检测氧化损伤指标丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）活性、还原型谷胱甘肽（GSH）含量以及重要炎症转录因子NF-κB及下游TNF-α的表达水平。结果发现,与阴性对照组相比较,光气染毒组肺泡盥洗液和肺组织匀浆中MDA含量显著增加,SOD活性也因氧化损伤应激而显著升高,GSH含量显著下降。NF-κB和TNF-α的表达水平显著升高。给予CAPE治疗可以显著抑制上述肺泡灌洗液和肺组织中各项指标变化。这些结果表明,CAPE作为一种高效抗氧化剂,能够显著改善光气中毒引起的各项损伤相关指标变化,具有很好的救治作用,其中抑制氧化损伤和炎症反应是其发挥救治作用的重要机制之一。这些结果也进一步提示,CAPE是一个极具潜力的抗光气肺水肿的候选救治药物,有待进一步深入研究开发。     

光气中毒的解救护理技术

窒息性毒剂又称为肺刺激性毒剂 ,是现代军用化学毒剂的一类 ,目前主要是指光气、双光气。光气属速杀性毒剂 ,在战斗中使用时 ,可对无防护部队造成严重的伤亡。光气也是民用化学工业的重要中间产品 ,归类为刺激性气体 ,在生产、储存和使用过程中也时有中毒事故的发生。光气中毒后很快出现流泪、头晕、咽干、咳嗽、胸闷、呼吸增快等刺激症状 ,经过一段无症状的潜伏期后 ,严重者可出现肺水肿导致窒息死亡。我院曾收治多例光气中毒患者并多次参加光气群体中毒的救治工作。现将 15 6例的治疗护理体会报告如下。1　对象与资料1 1　对象　本组中毒…     

肝细胞生长因子对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

采用大鼠离体肝细胞原代培养24 h，并利用CCl₄造成急性肝细胞损伤模型，检定肝细胞生长因子(HGF)对肝细胞损伤的影响. 结果表明：HGF可显著降低中毒肝细胞及细胞膜脂质过氧化物水平, 抑制肝细胞脂质过氧化, 并降低谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平, 稳定质膜；显著促进中毒肝细胞RNA和DNA的合成；超微病理证实HGF能减轻CCl₄对肝细胞质膜，染色质, 线粒体, 内质网及核蛋白体的损害.     

基于炎性反应的应对多种威胁医学救治措施的研究进展

应对多种威胁医学救治措施（multi threat medical countermeasures,MTMC）是指寻求一组单一药物,使其能够预防、缓解或治疗多种因素引发的人体损伤。近来发现尽管不同化学毒剂作用部位、中毒机制及中毒后的症状表现各异,但是它们都涉及到了共同的信号通道、分子介质及一些细胞过程,这些共同的信号通路可为MTMC研究提供较为明确作用靶点,其中炎症反应及所参与的炎症介质与受体已成为MTMC研究热点。本文主要就炎性反应与化学中毒救治进行综述。     

小鼠全氟异丁烯急性中毒后的耐受性及病理学改变

全氟异丁烯 (perfluoroisobutylene ,PFIB)是聚四氟乙烯裂解产物中毒性最大的物质 ,毒性约为光气的 10倍 ,急性吸入中毒后可引起类似光气的特征性通透性肺水肿[1] 。反复低剂量光气中毒后的存活动物 ,对致死量光气中毒具有耐受现象。对中毒耐受现象及其机制的探讨有助于中毒机制的阐明和预防措施的筛选。因此 ,我们研究了全氟异丁烯中毒小鼠耐受现象及耐受的病理学改变。1　材料与方法1 1　PFIB　从聚四氟乙烯裂解残液中分离纯化 ,色谱纯度为 99 0 5 % ,质谱图与标准质谱图基本相同。1 2　动物分组及处理　昆明种小鼠购自南京医科大学动…     

有机磷农药中毒致神经损伤机制的研究进展

有机磷农药（organophosphorus pesticides, OPs）是我国生产和使用最多的农药,也是引起急性中毒和致死的主要农药。急性有机磷中毒（acute organophosphoms pesticides poisoning,AOPP）是临床常见急症,是我国农村常见的中毒性疾病。OPs对神经损伤是有机磷农药中毒患者致残和致死的主要原因。对中毒患者神经系统损伤的抢救和治疗也是决定有机磷中毒患者抢救成功及预后的关键。     

丙酮酸乙酯对光气致急性肺损伤的保护作用

目的 光气中毒可以引起急性肺损伤,常伴有肺水肿发生,其重要特征是在临床上具有一定的潜伏期。有研究表明炎症和氧化应激参与了光气诱导的急性肺损伤的发生。丙酮酸乙酯（EP）是丙酮酸的稳定代谢产物,具有重要的抗炎和抗氧化特性。它可以抑制晚期炎症因子以及活性氧（ROS）的产生。本研究试图证明EP可以在肺水肿潜伏期的不同阶段分别通过抑制炎症和氧化应激缓解光气诱导的急性肺损伤的发生。方法 本文主要研究了EP对光气导致的机型肺损伤的作用及其机制。急性肺损伤指标包括分析生存率、血氧指数、肺水产生以及血管伊文兰（Evans Blue）渗透。肺炎症指标包括中性粒细胞计数、髓过氧化物酶（MPO）活性以及炎症因子的表达。肺组织的氧化还原状态指标包括ROS产生、抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胺酸半胱氨酸连接酶（GCLC）的表达和活性以及肺组织脂质过氧化TBARs。结果 EP改善了光气诱导的肺水肿和肺功能失调,从而提高了大鼠生存率。在光气诱导的肺水肿潜伏期早期,EP抑制了肺组织中性粒细胞呼吸爆发,阻断了核转录因子κB （NF-κB）p65亚基的核转位,从而降低了肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α （TNF-α）,白介素1β（IL-1β）和IL-8的水平。然而,在潜伏期晚期,EP抑制了肺泡灌洗液以及肺组织中晚期炎症因子HMGB1表达以及sPLA2-ⅡA活性。相应的,在RAW264.7细胞中,EP剂量依赖的抑制了这两种炎症因子,这主要是通过抑制JNK/SAPK和p38 MAPK磷酸化。更重要的是,EP降低了光气染毒大鼠肺组织中ROS的产生以及脂质过氧化水平。这主要是通过阻断了光气对氧化还原转录因子Nrf2的核转位的抑制,从而增加了下游抗氧化酶CAT, SOD以及GCLC的表达。结论 EP缓解了光气诱导的肺水肿,提高了动物存活率。这表明EP对于光气诱导的急性肺损伤具有潜在的治疗价值。其潜在机制是EP不但通过抑制中性粒细胞呼吸爆发以及下游早期炎症因子的表达缓解了肺组织炎症反应,而且,更重要的是EP通过增加肺组织抗氧化力,从而抑制了晚期炎症因子以及氧化应激。     

低剂量双光气中毒兔下呼吸道和肺损伤的形态观察

用扫描电镜和透射电镜观察低剂量双光气吸入中毒所致家兔呼吸系统损伤的超微结构改变。发现双光气吸入可以引起下呼吸道纤毛-粘液排送系统的损伤,同时提示,中毒后早期,多种因素造成的支气管狭窄和闭塞导致的缺氧状态,可能是引起和加重双光气中毒性肺水肿的重要因素之一。根据观察结果,作者认为双光气中毒可以造成典型的成人呼吸窘迫综合征(ARDS)的形态改变。     

小儿经消化道急性中毒洗胃的急诊护理体会

目的研究小儿经消化道急性中毒洗胃的急诊护理方法,并探讨临床护理效果。方法本研究选择我院2009年1月至2010年1月收治经消化道急性中毒的患儿56例,经询问及临床症状检测结果:27例因误食安定中毒、10例因误服亚硝酸钠中毒、15例因误服有机磷中毒、2例因误服毒鼠强中毒、2例因其他中毒,其中男36例,女20例,年龄在1～7岁,平均年龄4岁;均行及时准确的洗胃救治与护理,对临床资料,并依据不同年龄段患儿的临床特点进行分析归纳。结果对56例患儿经及时准确的洗胃救治与护理,无1死亡,均经康复护理后出院,治愈率为100%。结论我院对经消化道急性中毒的患儿行及时有效的洗胃救治,通过实施护理干预,可使患儿得到较好的救治,降低了小儿急性中毒后意外损伤的病死率,有利于患者早日恢复健康。另外对儿童及监护人员行健康教育,为小儿提供卫生、舒适的生活环境从而保证其健康成长,避免小儿因误服毒药造成中毒事件。     

奥美拉唑对大鼠中毒性急性胃黏膜损伤的保护作用及机制

目的：研究不同剂量奥美拉唑对大鼠中毒性急性胃黏膜损伤的保护作用,探讨其保护机制。方法：40只SD大鼠随机分成空白对照组,急性中毒对照组,小剂量奥美拉唑治疗组（10mg/kg）和大剂量奥美拉唑治疗组（50mg/kg）。造模后计算溃疡指数,测定血浆内皮素（ET）、血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）及胆碱酯酶活力,镜下观察胃黏膜病理改变。结果：成功建立急性胃黏膜损伤动物模型;在此基础上采用奥美拉唑治疗可改善中毒大鼠血液相关检测指标,显著改善胃黏膜溃疡指数（UI）及组织病理情况;且大剂量奥美拉唑组的疗效优于小剂量组（P〈0.05）。结论：奥美拉唑治疗能够改善大鼠口服有机磷农药中毒所致的急性胃黏膜损伤,大剂量奥美拉唑治疗的效果更明显;ET、TNF-α不但可作为急性中毒性胃黏膜损伤时早期血液检测指标,而且可作为治疗急性中毒性胃黏膜损伤效果的监测指标。     

双光气急性中毒家兔肺神经内分泌细胞的改变

首次观察到家兔急性双光气中毒性肺水肿时,肺神经内分泌细胞内的颗粒减少。应用银染技术和图象分析方法,在石蜡切片上检测出中毒动物肺神经内分泌细胞数量下降,吸光度降低,细胞内颗粒面积与所在细胞的面积比也减少。提示肺神经内分泌细胞可能在双光气中毒性肺水肿的发生和发展中起重要作用。     

206例小儿急性中毒的临床分析

目的了解小儿急性中毒的病因及临床特点。方法回顾性分析对本院206例急性中毒患儿的临床资料。结果在206例中毒患儿中,食物中毒90例（43．7％）,药物中毒45例（21．8％）,农药中毒30例（14．6％）,鼠药中毒18例（8．7％）,化学品中毒12例（5．8％）,CO中毒11例（5．3％）;其中治愈好转191例,死亡6例,转院5例,放弃治疗4例。结论小儿急性中毒涉及儿童各年龄段,农村多于城镇,且绝大多数经消化道中毒,以误食、误服为多;小儿急性中毒的防治应以预防为主,救治开始时间是急性中毒抢救治疗的关键。     

大鼠中毒性胃黏膜损伤的监测指标研究

目的：研究大鼠内皮素（ET）、血清TNF-α等指标对急性中毒性胃黏膜损伤的监测作用,同时检测胃黏膜局部组织中环氧化酶2（COX-2）的表达强度。方法：36只SD大鼠随机分成急性中毒对照组、常规剂量奥美拉唑治疗组和大剂量奥美拉唑治疗组。测定血清ET、TNF-α及胆碱酯酶活力,计算溃疡指数（UI）,进行胃黏膜HE染色及COX-2的免疫组织化学检查,观察胃黏膜病理改变以及COX-2的表达强度变化,并进行相关性分析。结果：大鼠血清中ET及TNF-α含量与中毒性胃黏膜损伤程度存在显著相关;大鼠胃黏膜COX-2表达强度与胃黏膜损伤相关不明显。结论：ET、TNF-α可以成为急性中毒性胃黏膜损伤时血液早期检测指标,而且可作为中毒性胃黏膜损伤临床治疗效果的监测指标。     

神经性毒剂中毒对动物心脏损伤的研究

神经性毒剂从结构上可分为Ｇ类毒剂 (主要包括沙林、梭曼、塔崩 )和Ｖ类毒剂 (ＶＸ)。它和有机磷农药杀虫剂一样 ,同属于有机磷酸酯类化合物 ,具有毒性大、作用迅速、防治困难等特点 ,是外军装备的主要化学战剂之一。作为有机磷化合物 ,神经性毒剂的主要中毒机制是抑制乙酰胆碱酯酶活力 ,使乙酰胆碱不能很快被酶水解 ,造成乙酰胆碱在中枢及外周神经系统的蓄积 ,进而诱发一系列胆碱能神经亢奋症状。中毒者出现流涎、肌颤、大汗、缩瞳、步态不稳、呼吸困难、心律不齐、惊厥及昏迷等 ,严重时危及患者生命。在神经性毒剂急性中毒的致死原因中 ,…     

急性中毒患者院前急救中的护理问题探讨

目的本文试对中毒患者院前急救中护理工作的要求进行分析,以便对院前急救工作提供借鉴。方法分析本院急诊科2004年1月～2010年12月接诊急性中毒的患者资料,并研究同期文献中所提及的对各种急性中毒的急救措施,来制定具体护理措施。结果院前急救过程中无患者死亡,大部分患者在急诊治疗,少数患者入院。结论各种中毒患者中毒原理不同,表现各异,潜伏期亦有不同,关键在于早期诊断,初期处理,而护理工作要采取有针对性的措施,可减少致死致残的可能,有效提高院前中毒救治的成功率。     

复方丹参滴丸对过氧化氢损伤PC12细胞的保护作用

目的 研究复方丹参滴丸对过氧化氢（H₂O₂）损伤PC12细胞的保护作用,探讨复方丹参滴丸治疗缺血性脑血管病的作用机制.方法 采用细胞培养和H₂O₂诱导细胞损伤的方法,观察复方丹参滴丸对PC12细胞的保护作用.结果 复方丹参滴丸 6.25,12.50,25.00 μg•mL^-1均可明显对抗100和500 μmol•L^-1 H2O2引起的PC12细胞凋亡（P＜0.01）.结论 复方丹参滴丸可以促进PC12细胞的营养和增殖作用,并有抗H2O2诱导细胞凋亡作用.