乳腺癌组织中P-gp、GST-π与TopoⅡ耐药基因的表达及临床意义

目的探讨多药耐药基因蛋白P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法用免疫组化法检测52例未经抗肿瘤治疗的原发乳腺癌中P-gp、GST-π及TopoⅡ的表达水平。结果52例乳腺癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ表达率分别为57.7%、53.8%和76.9%,P-gp、GST-π和TopoⅡ的表达与组织学类型、年龄无关(P>0.05),与临床分期、淋巴结转移有显著性差异(P<0.05),P-gp和GST-π的表达呈显著正相关(P<0.05),P-gp和TopoⅡ的表达呈明显负相关(P<0.05),GST-π和TopoⅡ呈明显负相关(P<0.05)。结论乳腺癌化疗前检测P-gp、GST-π及TOPOⅡ耐药基因蛋白,对肿瘤的化疗药物选择及判断预后有一定的价值。     

乳腺癌组织中多药耐药相关基因产物表达的研究

目的探讨多药耐药(MDR)基因产物P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在乳腺癌组织中的表达,分析其与临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学方法,检测184例术前未经抗肿瘤治疗的原发性乳腺癌组织中P-gp、GST-π及TopoⅡ基因产物的表达。结果乳腺癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ阳性表达率分别为49.5%、45.6%和73.9%;2种MDR基因产物共表达率为31.0%,3种MDR基因产物阳性表达率共为67.4%,明显高于单独阳性表达率12.4%(P<0.01)。P-gp、GST-π和TopoⅡ的阳性表达在不同年龄、组织学类型间的表达率差异无统计学意义(P>0.05);在腋淋巴结有无转移者间的表达率差异有统计学意义(P<0.05);P-gp阳性表达率在不同临床分期的差异无统计学意义(P<0.05),GST-π和TopoⅡ的阳性表达率在不同临床分期间有统计学意义(P>0.05)。但三种耐药基因产物阳性表达率在根治术后局部复发和远处转移者明显高于无复发转移者。结论乳腺癌组织中存在着P-gp、GST-π及TopoⅡ表达水平的变化;单基因和多基因协同作用,以多基因共表达为主;阳性表达者根治术后局部复发和远处转移率较高。化疗前联合检测P-gp、GST-π及TopoⅡ对乳腺癌化疗药物的选择具有指导作用,对预后的判断有参考价值。     

乳腺癌3种耐药基因、p53蛋白、雌和孕激素受体的表达及相关性研究

目的研究多药耐药基因P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽-S-转移酶π（GST-π）和DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）、p53蛋白、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）在乳腺癌的表达及其相关性。方法采用免疫组织化学SABC法,检测119例乳腺癌标本P-gp、GST-π、TopoⅡ、p53、ER和PR的表达。结果P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达率分别为52.1%、66.4%和66.4%,p53、ER、PR的表达率分别为56.3%、42.0%和41.2%;乳腺癌中有淋巴结转移组的p53表达率高于无淋巴结转移组（P〈0.05）,淋巴结转移组的GST-π、ER表达率低于无淋巴结转移组（P〈0.05）;GST-π、TopoⅡ与p53间表达呈正相关（P〈0.05）;P-gp、GST-π与ER间表达呈负相关（P〈0.05）。结论p53基因与GST-π、TopoⅡ存在协同表达的关系,GST-π、ER阴性是某些乳腺癌对化疗药物不敏感,导致内分泌治疗失败及影响预后的因素。     

消化道肿瘤多药耐药基因的表达与临床相关性的研究

目的 探讨消化道肿瘤多药耐药基因的表达与临床相关性.方法 对本院手术切除的106例消化道腺癌的标本进行糖蛋白(P-gp)、谷 胱甘肽S转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)免疫组化染色并判定结果.结果 106例消化道腺癌组织中P-gp、GST-π、TopoⅡ表达率分别为 63.2%、61.3%、51.9%;三种基因蛋白的表达与性别、部位、临床分期差异无统计学意义(P＞0.05),GST-π和TopoⅡ表达与淋巴结转移有关(P﹤0.05);三种基因蛋白的表达在不同分化程度的消化道腺癌组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.05);而在不同的消化道癌组织类型中差异无统计学意义 (P＞0.05).结论 P-gp、GST-π及TopoⅡ在消化道肿瘤MDR发生中起重要作用.     

乳腺癌组织中耐药相关基因表达的研究

【目的】探讨乳腺癌组织中胎盘型谷胱甘肽转移酶(GST-π)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)及P-糖蛋白(P-gp)4种耐药相关基因的表达情况，分析它们之间及它们与雌激素(ER)、孕激素(PR)、原癌基因C-erbB2、P53蛋白、肿瘤转移之间的相关性。【方法】收集了103例临床病理确诊为乳腺癌的癌组织标本，患者术前均未经过化疗。采用免疫组织化学方法检测GST-π、MRP、LRP及P-gP的表达情况，与同时检测的ER、PR、c-erhB2、P53等与乳腺癌预后有关的因素进行相关性分析，并将病例按有无淋巴结转移分成2组，分别对2组的GST-π、MRP、LRP、P-gP的表达进行卡方检验。【结果】4种耐药相关基因在乳腺癌组织中均有表达，其阳性率分别为GST-π56．3％、MRP16．7％、LRP72．8％、P-gp57．1％，均以低量表达为主(阳性细胞数小于25％)，有、无淋巴结转移2组之间4种耐药相关基因的表达差异均无显著性。仅GST-π表达与C-erbB2、LRP之间及LRP表达与C-erbB2之间存在正相关关系，相关系数分别为r=0．323，r=0．244，r=0．231，其他指标相互间无相关性。【结论】乳腺癌组织的原发多药耐药主要与GST-π、LRP及P-gp的表达有关，化疗前这几种耐药相关基因表达的检测可为化疗药物的选择及预后判断提供参考依据。     

乳腺癌P-gp、GST-π和Topo Ⅱ的表达及其意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp),谷胱甘肽S转移酶π(GST-π),DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在乳腺癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法对78例术前未行化疗患者的乳腺癌组织切片中P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达进行分析。结果P-gp、GST-π、TopoⅡ的阳性表达率分别为38.5%、46.2%、73.1%,与年龄、肿瘤大小、ER/PR和HER2状况无关。腋淋巴结阳性组P-gp和GST-π的阳性表达率与阴性组比较,差异有统计学意义(2χ=5.175,2χ=4.614,P<0.05);肿瘤不同分期的P-gp的阳性表达率差异有统计学意义(2χ=5.848,P<0.05)而且随分期增高而增高。结论乳腺癌组织的原发多药耐药与P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达有关,化疗前对它们进行检测可为化疗药物的选择及预后判断提供参考依据。     

化疗耐药相关基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ耐药相关基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中的表达及其临床意义.方法 用免疫组织化学S-P法对34例DLBCL患者p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白表达进行检测,分析其表达与DLBCL治疗效果及生存期的关系.结果 p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白在DL-BCL中表达阳性率分别为32.4%、47.0%、25.2%、52.9%、64.7%,p53、bcl-2、P-gp、GST-π蛋白表达阳性患者化疗有效率、3年生存率低于阴性患者,TopoⅡ蛋白表达阳性患者化疗有效率高于阴性表达患者,但3年生存率却较低.结论 p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白可作为DLBCL患者化疗效果和预后的预测指标,指导DLBCL患者的个体化治疗.     

人乳腺癌中3种耐药基因产物的表达及其与预后的相关性

目的研究多药耐药基因产物Pα糖蛋白(P-gP)、谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopⅡα)在乳腺癌组织中的表达及其与预后指标的关系。方法采用免疫组织化学技术,检测105例乳腺癌中P-gP、GST-π和TopⅡα耐药基因蛋白。结果(1)105例乳腺癌中P-gP、GST-π和TopⅡα的阳性表达率分别为77．1％、76．2％和36．2％;(2)P-gP及GST-π高表达和TopⅡα的低表达与肿瘤的浸润性和腋窝淋巴结转移相关;(3)P-gp、GST-π和TopⅡα与C-erbB-2的表达显著正相关;(4)GST-π与ER、PR的表达呈负相关。结论P-gp、GST-π和TopⅡα在乳腺癌的表达与其预后指标存在一定的联系,对乳腺癌患者在化疗前进行耐药基因检测,有助于判断预后及选择合理的化疗方案,从而提高疗效。     

非小细胞肺癌组织中Ki67、多药耐药基因GST-π/TopoⅡ/P-gp的表达及其与临床病理学相关性研究

目的探讨Ki67在非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)组织中的表达及其与多药耐药基因谷胱甘肽-S转移酶π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、P-糖蛋白(P-gp)表达的相关性及其意义。方法采用免疫组化法检测108例NSCLC患者癌组织中Ki67、GST-π、TopoⅡ、P-gp的表达水平。结果 Ki67、GST-π、TopoⅡ、P-gp在108例NSCLC患者癌组织中的阳性表达率分别为95.37%、81.48%、82.40%、38.89%;GST-π表达与NSCLC分化程度有关(χ~2=6.318,P=0.042);Ki67表达与TopoⅡ表达有关(χ~2=6.503,P=0.011),共表达率为80.56%,但关系不密切(r=0.245,P=0.010);Ki67表达与GST-π表达有关(χ~2=4.686,P=0.03),共表达率为76.85%,但是相关性低(r=0.028,P=0.031);Ki67表达与P-gp表达无关(P>0.05)。GST-π与TopoⅡ表达呈正相关(r=0.028,P=0.023),共表达率为70.37%,但是关系不密切;P-gp与GST-π、TopoⅡ无相关(P>0.05)。结论 Ki67可能不参与NSCLC细胞的多药耐药机制;三种多药耐药基因可能是通过不同的途径介导NSCLC多药耐药。     

耐药相关基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达与其个体化药物治疗方法的探讨

目的 探讨p53、P-gp、GST-π、TopoⅡ基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达与其个体化药物治疗的方法.方法 用免疫组织化学S-P法检测68例DLBCL初治患者、21例难治/复发患者p53、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白表达,体外进行MTT试验筛选针对DLBCL患者敏感化疗药物,分析其表达与DLBCL难治/复发、化疗药物选择的合理性及其预后相关因素之间的关系.结果 难治/复发组患者其p53、P-gp、GST-π表达明显高于初治组患者,二者差异有统计学意义(P＜0.01),而TopoⅡ表达差异无统计学意义(P＞0.05);初治患者中具有P-gp、GST-π、p53、TopoⅡ呈阳性表达者化疗后发生难治/复发的比例分别为72%、53%、41%、35%;5例p53、P-gp、GST-π均呈阳性表达者化疗后全部出现难治/复发.通过分析相关耐药基因的联合表达及参照MTT药物敏感试验选择相应的化疗药物,发现初治DLBCL患者化疗方案中非适配选择的药物占的比例越多,疗效越差,难治复发病例越多;p53蛋白表达与P-gp、 TopoⅡ表达相关外,还与患者结外侵犯部位、临床分期相关.结论 p53、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白表达的联合检测可作为DLBCL患者难治/复发的预测指标,同时,结合体外MTT药物敏感试验选择相应的化疗药物,有利于减少化疗耐药和克服经验性选择化疗方案,从而指导DLBCL患者的个体化治疗.     

大鼠脑损伤时神经细胞c-fos 、c-jun和c-myc基因表达变化

目的观察大鼠脑损伤后不同时间皮质神经细胞早期快反应基因c-fos 、c-jun和c-myc表达变化.方法应用Northern杂交、原位杂交和免疫组织化学方法检测皮质神经细胞中c-fos、c-jun和c-myc的表达.结果脑损伤后15 min,伤侧皮质神经细胞出现上述3种基因mRNA的表达,随时间的延长,表达逐渐增加,于伤后3 h达高峰并持续至伤后24 h,伤后72 h恢复至对照水平.c-fos和c-jun蛋白表达亦于伤后15 min出现,c-myc蛋白表达于伤后30 min出现,并均于伤后3 h达高峰,持续至伤后6 h,伤后24 h表达消失.结论脑损伤后上述3种基因表达特点与其它脑损害不同,可能与损伤机制和继发性神经细胞损害有关.     

改进的PCR模板制备及DNA回收方法

直接用煮沸的细菌裂解液中的ＤＮＡ作ＰＣＲ模板，扩增效果与用酚／氯仿抽提纯化的质粒ＤＮＡ作模板的结果一致，缩短了实验时间。利用简单材料回收酶切片段，省去了有机溶剂反复抽提和沉淀的步骤，回收率达到９０％，效果很好。     

德宏州不同民族人群地中海贫血基因调查及分析

目的了解德宏州傣族、景颇族、阿昌族、德昂族、傈僳族、汉族人群携带地中海贫血基因现状,为防治提供科学依据。方法采用PCR和反向点杂交技术鉴定β-地贫基因;以跨跃断裂点PCR(GAP-PCR)技术和凝胶电泳鉴定α-地贫基因,并进行统计分析。结果检测血样本3 018份,检出地中海贫血基因939份,阳性率31.11%,其中α地中海贫血基因阳性率18.36%,β地中海贫血基因阳性率12.76%。不同民族的阳性率比较差异均有统计学意义。结论德宏州属地中海贫血高发区,临床工作中要做好鉴别诊断和治疗。     

结肠癌脾虚证p53, Bcl-2和Bax的表达

目的: 探讨结肠癌脾虚证与p53, Bcl-2, Bax蛋白表达的相关性,揭示病与证之间的内在联系及证的物质基础.方法: 选择进展期低分化结肠腺癌61例,辨证分为脾虚组与非脾虚组,对其主要症状进行半定量积分,并设正常对照组20例.采用免疫组化S-P法检测病理组织中p53, Bcl-2, Bax蛋的表达.结果: 脾虚组患者p53, Bcl-2蛋白的阳性表达率及表达水平显著高于非脾虚组(P<0.05),Bax蛋白阳性表达脾虚组低于非脾虚组,但组间比较差异无显著性(P>0.05),脾虚患者症状积分与p53, Bcl-2蛋白表达水平呈正相关(P<0.01),与Bax蛋白表达水平无相关性(P>0.05);非脾虚患者症状积分与p53, Bcl-2, Bax蛋白表达水平均无显著相关性(P>0.05).结论: 结肠癌中医证型与p53, Bcl-2蛋白的差异表达有关,p53, Bcl-2蛋白是结肠癌脾虚证的相关基因.     

C-erbB-2、Nm23和MDR1基因在原发性乳腺癌中的表达及与转移和预后的相关性

目的：探讨C-erbB-2、Nm23和MDR1在原发性乳腺癌中的表达及其与转移和预后的关系。方法：采用免疫组化法（S-P法）检测49例乳腺癌患者手术切除组织中C-erbB-2、Nm23和MDR1的表达,并分析3种基因之间的相关性及其与转移的关系。结果：49例乳腺癌患者中C-erbB-2、MDR1高表达和Nm23低表达的患者转移发生率高（P<0.05）。MDR1的表达与C-erbB-2的表达有相关性（r_s＝1.00,P<0.05）,Nm23与C-erbB-2的表达无相关性(r_s＝0.80,P>0.05),MDR1的表达与Nm23的表达无相关性_s＝0.80,P＞0.05）。C-erbB-2、MDR1同时阳性的患者及C-erbB-2阳性、Nm23阴性的患者转移发生的几率较高,预后较差。结论：C-erbB-2、Nm23和MDR1与乳腺癌转移有关,多个指标联合检测用来估计患者预后指导意义更佳。     

Expression of c-fos and c-jun proteins in the marginal division of the rat striatum during learning and memory training

Background A new brain region, the marginal division (MrD) , was discovered at the caudal margin of the neostriatum. The MrD was shown to be involved in learning and memory in the rat. The aim of this study was to investigate the expression of the immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD of the striatum during learning and memory processes in the rat, immunocytochemical and Western blot methods were used to examine Y-maze trained rats.Methods The rats were divided into three groups, namely the training, pseudotraining, and control groups. After Y-maze training, the expression of the immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD of the rats was investigated using immunocytochemical and Western blot methods.Results After one hour of Y-maze training, the expression of c-jun and c-fos proteins was significantly enhanced in the MrD; the c-jun protein, in particular, was more intensely expressed in this region than in other parts of the striatum. The expression of these two proteins in the training group was significantly higher than in the pseudotraining and control groups. In addition, positive expression was also found in the hippocampus,cingulum cortex, thalamus, and in other areas. Western blot disclosed two immunoreactive bands for the anti-c-fos antibody (47kD and 54kD) and two immunoreactive bands for the anti-c-jun antibody (39kD and 54kD). Conclusions These results indicate that the immediate-early genes c-fos and c-jun participate in signal transduction during the learning and memory processes associated with Y-maze training in rats.     

p53和C-Ha-ras基因在胃癌发生中的作用

目的　探讨 p5 3和C Ha ras基因突变在胃癌发生中的作用。 方法　用PCR SSCP和直接测序检测胃癌组织中C Ha ras(12、13密码子 )和 p5 3(外显子 7)基因的突变。 结果　胃癌组织中C Ha ras和 p5 3基因突变发生率显著高于浅表性胃炎和正常胃黏膜组织 ,基因的联合突变在部分胃癌组织中表达。结论　基因联合突变可能是胃癌发生的机制之一。     

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2表达下调

目的 探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG－44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响，阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法PTEN基因体外转染SHG－44细胞，筛选阳性细胞克隆，以原位杂、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况；采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况；以免疫荧光法检测bcl-2基因的表达。结果 PTEN基因转染的SHG－44细胞有PTEN蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞质浓缩、核破裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现；流式细胞仪显示细胞周期从G1期到S期发生抑制，并且在G1期峰前出现一明显的凋亡峰（15．9％）；细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带；bcl-2的表达也显著下调。结论 PTEN基因可诱导SHG－44细胞凋亡，并下调bcl-2蛋白的表达，这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的分子机制之一。     

星形细胞瘤PTEN、p27的表达及相关性研究

目的检测PTEN和p27在星形细胞瘤中的表达,探讨二者表达的意义。方法采用免疫组化S-P法检测星形细胞瘤PTEN和p27的表达,应用SPSS10.0统计软件进行数据处理。结果PTEN、p27在星形细胞瘤表达阳性率均随病理分级升高而降低(P<0.05);PTEN表达水平与p27表达水平正相关(P<0.05)。结论PTEN及p27表达下调与星形细胞瘤的发生发展有关。PTEN可能通过正调节p27的表达发挥其抑癌作用。     

胃癌组织ras和P53基因突变的检测

（１）目的 研究胃癌组织中Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变情况,（２）方法 采用ＰＣＲ ＲＦＬＰ技术,分析４１例胃癌标本中Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变。（３）结果 本组４１例中,１２例（２９．３％）发生Ｐ５３基因突变,１６例（３９．１％）发生ｒａｓ基因突变,１全负时发生Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变。（４）结论 Ｐ５３和ｒａｓ基因突变与胃癌的发生密切相关,在胃癌的发生中可能起重要作用。