改良钳夹型脊髓损伤大鼠模型的建立及神经功能评价简

目的：建立一种稳定可靠、操作简单的不完全性脊髓损伤动物模型,并对其神经功能进行初步评价。方法将50只SD大鼠随机分为模型组、假手术组。采用改良钳夹法建立大鼠脊髓损伤模型,观察不同时间点大鼠行为学运动功能（BBB）评分、脊髓组织形态变化及损伤段脊髓的细胞凋亡因子半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）阳性细胞表达的情况。结果模型组大鼠各时间点BBB评分均明显低于假手术组（P＜0.05）,假手术组各时间点大鼠脊髓组织中Caspase-3阳性细胞表达明显低于模型组（P＜0.05）。结论成功制备了稳定可靠、操作简单的不完全性脊髓损伤动物模型。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肺组织凋亡及相关因子的影响及其机制

目的观察2型糖尿病大鼠肺组织细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9的表达变化及罗格列酮的干预作用。方法8周龄SD大鼠高热量饮食1月后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ30mg/kg）,成模后分别于12、24周将动物处死,采用光镜、原位末端标记法检测肺组织细胞凋亡及用免疫组织化学（immunohistochemistry）方法检测各组肺组织Caspase-3、Caspase-9表达水平。结果糖尿病大鼠肺组织凋亡细胞数明显增多,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著上调,但无统计学意义。罗格列酮干预组凋亡率降低（P〈0.01）,升高的Caspase-3、Caspase-9蛋白表达下调,但与糖尿病未治疗组均无统计学差异（P〉0.05）。结论肺组织细胞凋亡在糖尿病大鼠肺损害病程中起一定作用,罗格列酮可抑制肺组织细胞凋亡,可能对糖尿病肺有保护作用。     

TNF-α、Caspase-3在大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡中相关性研究

目的探讨大鼠脊髓损伤后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在神经细胞凋亡中的动态表达,验证TNF-α和Caspase-3之间的相关性。方法将70只成年健康SD大鼠按Nystrom法建立大鼠脊髓(T8、T9)急性压迫损伤模型,HE染色观察脊髓组织病理学变化;免疫组化染色测定各时间点TNF-α、Caspase-3的表达变化;原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸(d UTP)标记法(TUNEL法)检测神经细胞的凋亡水平;通过Western blot法检测大鼠脊髓中TNF-α、Caspase-3蛋白的表达水平。结果正常大鼠脊髓神经细胞TNF-α、Caspase-3的阳性细胞表达率较少;脊髓损伤后8 h,脊髓神经细胞中TNF-α、Caspase-3的阳性表达率明显增多,分别为(24.13%±3.02%)及(40.79%±3.43%),1 d达高峰,分别为(51.36%±4.26%)及(70.78%±5.97%),3 d表达减弱,分别为(20.24%±2.93%)及(37.71%±2.88%),与正常大鼠比较,差异有统计学意义(P<0.01)。TUNEL阳性细胞率在大鼠脊髓损伤后8 h明显增多(39.81%±2.27%),1 d达高峰(71.58%±3.87%),3 d表达减弱(40.55%±2.36%),与正常大鼠比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。大鼠脊髓损伤后1 d,与损伤组比较,抑制剂组TNF-α、Caspase-3、TUNEL阳性细胞率明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。造模后7 d,与空白对照组比较,损伤组TNF-α、Caspase-3蛋白的表达上升;与损伤组比较,抑制剂组TNF-α、Caspase-3蛋白的表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脊髓损伤后TNF-α、Caspase-3的表达增强,TNF-α抑制剂使Caspase-3表达减弱,且其参与了脊髓损伤细胞凋亡的调节。     

NF-kB抑制与X射线诱导的人非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡的研究

目的 探讨NF-kB p65对X射线诱导人非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma,NHL)细胞凋亡的作用及其调控机制.方法 以NF-kB p65抑制剂quinazoline (QNZ)处理人NHL细胞.将NHL细胞株Namalwa、Ramos和Raji细胞分为空白对照组、单纯照射组(IR)和X射线+QNZ实验组( IR+ QNZ),采用Annexin-V染色方法检测肿瘤细胞凋亡水平的变化,采用Western blot方法检测各细胞株中Survivin及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Cleaved Caspase-3的表达水平;应用实时定量PCR方法检测Survivin mRNA水平.结果 应用流式细胞仪检测凋亡细胞百分比,结果显示,QNZ处理后进行照射与单纯照射组相比凋亡细胞明显增加,且具有药物浓度依赖性(t=2.93～12.52,P＜0.05),Western blot法检测结果显示,电离辐射可显著增加人NHL细胞中Survivin蛋白的表达.而应用1、10和50 nmol/L QNZ处理人NHL细胞24 h后进行照射,可显著下调电离辐射所诱导的NHL细胞中的Survivin蛋白表达.随药物浓度增加其作用更为明显(t=3.29～ 16.72,P＜0.05).同时凋亡相关蛋白Bcl-2表达减低,而Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值明显降低,与单纯照射组相比,差异有统计学意义(t =6.20 ～9.91,P＜0.05).预处理QNZ后射线诱导的3种NHL细胞Survivin mRNA均不同程度下降.结论 抑制NF-kB能够增加X射线诱导的NHL细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin蛋白表达水平及对凋亡相关蛋白Bcl-2家族的调节有关.     

过度训练大鼠肾组织细胞凋亡的基因调控机制及山莨菪碱干预的影响

目的 研究过度训练大鼠肾组织细胞Box和Bel-2的表达以及Bax/Bcl-2比值与肾组织细胞凋亡的关系,观察山莨菪碱对上述蛋白表达的影响,探讨肾组织细胞凋亡的基因调控及山莨菪碱抗肾组织细胞凋亡的分子机制.方法 采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型,将大鼠随机分为3组:安静对照组(CN,n=8)、力竭运动组(分为ESI、ES 6h、ES 24h 3个时间点.每个时间点8只动物)、山莨菪碱防治组(分为AD 6h、AD 24h 2个时间点,每个时间点8只动物).采用免疫组织化学方法 检测大鼠肾组织Bax、Bcl-2蛋白的表达;采用CMIAS病理图像分析仪测量Bax、Bcl-2蛋白表达的平均光密度;对各组大鼠肾组织Bax/Bcl-2比值与肾组织细胞凋亡率进行相关性分析.结果 与CN组相比,ESI、ES 6h、E,S 24h组大鼠肾组织Bax的表达逐渐增强,Bcl-2的表达逐渐减弱,Bax/Bcl-2比值呈进行性增高(P<0.05).AD 6h、AD 24h组大鼠与同期力竭组比较,Bax的表达减弱,Bcl-2的表达增强,Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05).各组大鼠肾组织Bax/Bcl-2比值与肾组织细胞凋亡率呈明显的正相关(r=0.674,P<0.01).结论 Bax、Bcl-2及Bax/Bcl-2比值作为调控细胞凋亡的中心环节共同参与过度训练致肾组织细胞凋亡发生的调控,山莨菪碱可通过调节Bax、Bcl-2及Bax/Bcl-2比值起到抗肾组织细胞凋亡的作用.     

亚低温辅助治疗缺血性脑病分子机制研究

目的探讨亚低温辅助治疗缺血性脑病的分子机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为阴性对照组、假手术组、实验组和亚低温实验组,每组各6只。构建大鼠的缺血再灌注模型。检测各组大鼠脑组织内炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-8、IL-6]水平,人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)、人外周血单核细胞系(THP-1)细胞中炎症因子转录水平,hCMEC/D3细胞凋亡率,核因子κβ(NF-κβ)、天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、Fas蛋白的表达水平。结果实验组、亚低温实验组处理6、24、48 h的TNF-α、IL-8、IL-6均高于阴性对照组,且实验组高于亚低温实验组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组与亚低温实验组处理4、8 h的hCMEC/D3细胞中TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、IL-8 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组与亚低温实验组处理2、4、8 h的THP-1细胞中TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、IL-8 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。亚低温实验组处理1、4 h的hCMEC/D3细胞凋亡率分别为7.0%、17.0%,分别低于实验组的12.0%、28.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。亚低温实验组、实验组NF-κB、Caspase-3、Fas表达量均高于阴性对照组,且实验组高于亚低温实验组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温处理通过降低NF-κβ、Caspase-3和Fas的表达发挥对缺血性脑病的辅助治疗作用。     

石杉碱甲对急性低压低氧模型大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨石杉碱甲对急性低压、低氧模型大鼠空间学习与记忆能力的改善作用及其海马神经元细胞凋亡的缓解作用.方法 48只SD大鼠随机分为4组(n=12):平原组(对照组)、平原给药组、高海拔组(模拟6000m海拔)、高海拔给药组.各给药组在模拟低压、低氧实验前1d,按0.1mg/kg剂量给予石杉碱甲(配制成10mg/ml混悬液)灌胃给药.比较各组大鼠Morris水迷宫学习与记忆测试成绩.采用TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡情况,Western blotting检测海马神经元细胞凋亡因子Bax及抗凋亡因子Bcl-2的表达.结果 与高海拔组比较,高海拔给药组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),60s内穿越平台次数增多(P＜0.05),目标象限滞留时间延长(P＜0.05),海马CA1区神经元凋亡数量减少(P＜0.05),海马组织中促凋亡因子Bax表达降低(P＜0.05),抗凋亡因子Bcl-2表达增加(P＜0.05).高海拔给药组与平原对照组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 石杉碱甲对急性低压、低氧导致的大鼠大脑海马神经元凋亡具有缓解作用,可改善模型大鼠的空间学习与记忆能力.     

力竭运动对大鼠下丘脑室旁核内NF-κB、Bcl-2、Bax表达的影响

目的:探讨力竭运动对大鼠下丘脑室旁核内NF-κB、Bcl-2、Bax表达的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组和力竭运动组,对照组10只,不进行游泳运动。力竭运动组30只,每天大鼠尾部负重(2%体重的重物)游泳1次至力竭,连续7 d,分别于最后一次运动后即刻(0 h)、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h等不同时间点取材,采用Western blot技术检测大鼠下丘脑室旁核内NF-κB、Bcl-2、Bax蛋白含量,采用免疫组织化学染色分析NF-κB、Bcl-2、Bax免疫阳性神经元的定位和表达。结果:(1)Western blot结果:对照组与力竭运动0 h组NF-κB表达较低,力竭运动组运动后4 h NF-κB表达显著高于对照组(P<0.05),8 h达到峰值,而后下降,24 h时仍显著高于对照组(P<0.05)。力竭运动后即刻、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h,Bcl-2表达均显著高于对照组(P<0.05),运动后12 h达到峰值。Bax表达与Bcl-2相似,力竭运动后即刻、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h均显著高于对照组(P<0.05),运动后12 h达到峰值。(2)免疫组化染色结果:NF-κB与Bax阳性神经元数目表达与West-ern blot结果一致。对照组可见一定数量Bcl-2阳性神经元,力竭运动后Bcl-2阳性神经元数量有所增加,但各时间点之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:力竭游泳运动中下丘脑室旁核内NF-κB的活化可能参与中枢神经系统的细胞凋亡的诱发,表现为促凋亡蛋白Bax表达增高,而抑凋亡蛋白Bcl-2表达不明显。     

力竭运动对大鼠下丘脑室旁核内NF-κB、Bcl-2、Bax表达的影响北大核心CSCD

目的:探讨力竭运动对大鼠下丘脑室旁核内NF-κB、Bcl-2、Bax表达的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组和力竭运动组,对照组10只,不进行游泳运动。力竭运动组30只,每天大鼠尾部负重(2%体重的重物)游泳1次至力竭,连续7 d,分别于最后一次运动后即刻(0 h)、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h等不同时间点取材,采用Western blot技术检测大鼠下丘脑室旁核内NF-κB、Bcl-2、Bax蛋白含量,采用免疫组织化学染色分析NF-κB、Bcl-2、Bax免疫阳性神经元的定位和表达。结果:(1)Western blot结果:对照组与力竭运动0 h组NF-κB表达较低,力竭运动组运动后4 h NF-κB表达显著高于对照组(P<0.05),8 h达到峰值,而后下降,24 h时仍显著高于对照组(P<0.05)。力竭运动后即刻、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h,Bcl-2表达均显著高于对照组(P<0.05),运动后12 h达到峰值。Bax表达与Bcl-2相似,力竭运动后即刻、4 h、8 h、12 h、16 h、24 h均显著高于对照组(P<0.05),运动后12 h达到峰值。(2)免疫组化染色结果:NF-κB与Bax阳性神经元数目表达与West-ern blot结果一致。对照组可见一定数量Bcl-2阳性神经元,力竭运动后Bcl-2阳性神经元数量有所增加,但各时间点之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:力竭游泳运动中下丘脑室旁核内NF-κB的活化可能参与中枢神经系统的细胞凋亡的诱发,表现为促凋亡蛋白Bax表达增高,而抑凋亡蛋白Bcl-2表达不明显。     

促红细胞生成素对脑创伤后细胞凋亡和Caspase-3活性的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠创伤性脑损伤的治疗作用及对细胞凋亡和Caspase-3活性的影响之间的关系。方法制作SD大鼠自由落体脑挫裂伤模型，设立假手术组、rhEPO治疗组和对照组，分别应用透射电镜、流式细胞技术和荧光四肽底物法检测各组大鼠脑挫伤灶旁细胞凋亡情况及Caspase-3活性。结果脑外伤后存在细胞凋亡，细胞凋亡的发生在伤后24h达到高峰，rhEPO治疗组在伤后24h和48h细胞凋亡发生率低于相应的对照组（P〈0．05）；rhEPO治疗后12，24和48h大鼠脑挫伤灶旁细胞Caspase-3活性均低于各自时间点对照组（P〈0．05或0．01）。结论rhEPO治疗对创伤性脑损伤后细胞凋亡的发生及Caspase-3的活性有影响，抑制细胞凋亡及Caspase-3活性下降很可能是rhEPO对创伤性脑损伤治疗作用的重要机制。     

高原缺氧环境下重症急性胰腺炎合并肠损伤的实验研究

目的:观察高原缺氧环境下重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肠黏膜组织的变化,初步探讨高原SAP(H-SAP)时肠黏膜屏障损伤的机制。方法:48只Wistar大鼠,根据海拔不同随机分为2个大组,西安组(X组)和马衔山组(M组),每组24只,再将每个大组随机分为4个小组,假手术组(SO组),SAP-6 h组,SAP-12 h组和SAP-24 h组,每组6只。采用逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠制备SAP动物模型。分别测定小肠组织TNF-α、IL-10水平;取胰腺及肠组织行病理学检查,透射电镜观察肠黏膜超微结构的变化。结果:X-SAP组与M-SAP组相比,TNF-α、IL-10的表达具有显著性差异(P<0.05);光镜下可见M-SAP组各时间点胰腺及肠组织的损伤程度均较X-SAP组显著(P<0.05);SAP组胰腺组织与肠组织病理评分均呈正相关关系(r=0.902,P<0.01),透射电镜结果显示M-SAP组大鼠造模后肠组织超微结构损伤程度较X-SAP组明显。结论:高原缺氧可诱导、加重H-SAP时肠黏膜屏障损伤;TNF-α和IL-10表达失衡可能在H-SAP合并肠黏膜屏障损伤的发生、发展中起重要作用。     

AKT信号通路通过亚低温对大鼠局脑缺血再灌注损伤神经元的保护作用

目的通过检测AKT及Bcl-2蛋白的表达,探讨亚低温对局脑缺血再灌注后神经元存活的影响。方法用线拴法制作大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）局脑缺血再灌注模型,将36只SD大鼠随机分成假手术组、常温缺血再灌注组和亚低温缺血再灌注组,缺血组分别缺血6h再灌注4h、24h、72h、1w（n=4）后处死,亚低温组于缺血后13~14min实施病灶侧亚低温持续4h。免疫组织化学法检测AKT、Bcl-2蛋白的表达,电镜检测自噬小体。结果不同缺血时间再灌注4h,亚低温组比常温组缺血侧半暗带AKT表达水平显著增高（P〈0.05）,Bcl-2表达明显降低（P〈0.01）;亚低温组自噬小体明显减少。结论病灶侧亚低温通过促进缺血半暗带脑组织AKT表达,抑制Bcl-2表达,从而抑制神经元凋亡,抑制自噬的产生,从而对神经元起保护作用,促进脑缺血后神经功能恢复。     

紫檀芪对人食管癌EC9706细胞生长的影响及其机制

目的探讨紫檀芪（PrIT）对人食管癌EC9706细胞生长影响及其抗凋亡的机制。方法EC9706细胞分为对照组（正常DMEM培养液孵育）和肿组（DMEM培养液中含PTT,分别为15、30、45、60trM）,各组细胞分别处理24、48、72h。MTr法检测各组细胞存活率;黏附实验测定各组细胞黏附率;Westernblot方法检测各组细胞抗凋亡相关蛋白Bcl-2和凋亡相关蛋白Caspase．3表达。结果MTY结果显示,Prr对EC9706细胞生长有抑制作用,其中60trM处理72h组抑制效果最明显,呈药物浓度及时间依赖效应;黏附实验结果显示,PrITll处理72h可以显著减弱EC9706细胞黏附能力,并呈浓度依赖效应;Westernblot结果显示（72h）：P1Tr处理72h可以显著降低EC9706细胞Bcl-2的表达,同时显著升高其Caspase-3的表达。结论紫檀芪可抑制EC9706细胞生长,促进其凋亡,其机制与激活Caspase-3并抑制Bcl-2表达有关。紫檀芪可能是食管癌治疗领域具有开发前景的新药。     

亚低温对于心肺复苏后大鼠海马神经细胞ROS产生量和Caspase-3mRNA表达的影响

目的观察亚低温（Hypothermia,HT）对心肺复苏（Cardiopulmonaryresuscitation,CPR）后大鼠海马神经细胞活性氧（Reactiveoxygenspecies,ROS）产生量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）mRNA表达的影响。方法37只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组：空白对照组、常温CPR组、亚低温CPR组。CPR组再分2个亚组：即自主循环恢复（ReturnofSpontaneousCirculation,ROSC）后12h、24h组,除空白对照组为5只大鼠外,余各亚组大鼠均为8只。亚低温CPR组在ROSC后立即行亚低温干预。到达各观察时相点时立即取材,应用流式法检测大鼠海马单细胞悬液中活性氧水平,逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术测定海马神经细胞Caspase-3mRNA的表达水平。结果亚低温CPR组ROSC后12h、24h的ROS产生量和Caspase-3 mRNA表达与相同时相点常温CPR组比较均显著降低（P〈0．05）。结论HT能减少CPR后大鼠神经细胞ROS的产生,并能通过抑制Caspase-3mRNA表达而使神经细胞凋亡减少。     

CDT1基因过表达对辐射诱发基因组不稳定肝细胞HL-7702凋亡及细胞周期的影响

目的 研究CDT1基因过表达对辐射诱发基因组不稳定肝细胞凋亡及细胞周期的影响.方法 选择基因组不稳定肝细胞HL-7702,利用慢病毒介导的过表达技术,上调辐射诱发基因组不稳定肝细胞中CDT1基因的表达,通过流式细胞术研究CDT1基因过表达对细胞周期及细胞凋亡的影响;利用实时荧光定量PCR方法,检测CDT1基因上调后p53、ATM、ATR、Bcl-2、Caspase-3基因的表达变化.结果 慢病毒介导的过表达能有效上调HL-7702细胞中CDT1基因的表达(t=15.56, P<0.05),与阴性对照组相比,CDT1基因的上调能够导致基因组不稳定肝细胞HL-7702凋亡率升高(t=4.19, P<0.05);CDT1基因的过表达能诱发基因组不稳定肝细胞p53、Bcl-2基因的表达显著下调(t=-4.21、-2.06, P<0.05),同时,ATM基因上调,ATR和Caspase-3基因下调,但差异均无统计学意义.结论 CDT1基因的过表达通过参与非p53依赖的凋亡途径以及细胞周期检查点适应性对基因组不稳定性进行调控.     

电离辐射诱导EL-4细胞Caspase-3、P53蛋白表达及其生物学作用

目的研究电离辐射对EL-4细胞中Caspase-3和P53蛋白表达的影响，及其对辐射诱导细胞凋亡及多倍体细胞的作用。方法采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化，采用PI荧光标记及流式细胞术检测细胞凋亡及多倍体细胞的变化。结果实验表明，4．0GyX射线照射后8及12h，EL-4细胞中Caspase-3蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；照射后2、4、8、12及24h，P53蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。实验还表明，4．0Gy照射后2、4、8、12、24、48及72h，EL-4细胞凋亡与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05～P〈0．001）；而照射后2～48h，多倍体细胞数与对照组比较则未见明显变化。结论电离辐射可诱导EL-4细胞Caspase-3及P53蛋白表达增高，可能在辐射诱导细胞凋亡中起重要作用，而辐射诱导多倍体细胞的分子通路则可能是P53非依赖性的。     

烫伤对大鼠结肠平滑肌细胞骨架影响的半定量研究

目的:研究烫伤早期大鼠结肠平滑肌细胞骨架含量的动态改变,初步探讨烧伤后胃肠动力障碍的发生机制及其临床意义.方法:健康、成年大白鼠70只,随机分为正常对照组10只,烫伤组60只.烫伤组动物按烫伤后1、3、6、12、24、48小时等不同时相点又分为6组,每组10只;烫伤组动物制备烫伤模型,所有动物在相应时间点处死后取结肠平滑肌组织,经急性酶分离法获得结肠带平滑肌细胞悬液,加FITC标记的抗体,结合平滑肌细胞内actin蛋白,用流式细胞仪检测平滑肌细胞内荧光强度.结果:实验中发现,烫伤后大鼠肠道平滑肌细胞骨架含量先明显升高,约1小时后逐渐降低,3小时后已明显低于正常值,并继续下降,大约6小时～12小时开始渐回升,在12小时～24小时达正常水平,但仍呈上升趋势,该趋势可延伸至48小时.结论:1.烫伤早期即可出现明显的肠道平滑肌细胞骨架含量的改变,这一变化过程体现了机体的修复与损伤力量抗衡的动态变化;2.推测肠道平滑肌细胞骨架的变化是导致烫伤后肠道平滑肌细胞动力功能出现异常,进而肠道功能发生紊乱、肠壁结构受到破坏的重要机制之一.     

肼致心肌成纤维细胞凋亡作用机制的研究

目的观察肼作用于体外培养心肌成纤维细胞的凋亡情况并探讨其机制。方法将新生大鼠心肌成纤维细胞培养标本分为对照组和肼处理组。用2mmol／L浓度的肼处理细胞72h后Hoeehst33258染色，荧光显微镜下观察凋亡细胞核的变化；膜蛋白V／磺化丙啶双染流式细胞仪检测细胞凋亡率和坏死率；Rodamine123荧光染色流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位的变化；Western blot检测凋亡相关蛋白Bax／Bob2和Caspase-3表达的变化。结果肼处理后的细胞与对照组相比，出现明显的细胞凋亡的核浓缩、核聚集形态；细胞凋亡率和坏死率与对照组比较差异均有显著性；细胞内线粒体膜电位降低；Bax表达增高、Bcl-2表达降低、Caspase-3表达增高。结论肼可引起心肌成纤维细胞凋亡，并可能通过线粒体通路即肼损伤线粒体引起Bcl-2表达降低，Bax表达增加致使线粒体膜通透性转换孔开放，膜电位降低，细胞色素C释放入胞浆，激活Caspase-3，引起细胞凋亡。     

高压氧联合川芎嗪对重症急性胰腺炎模型大鼠的疗效及其作用机制

目的:探究高压氧(HBO)联合川芎嗪对重症急性胰腺炎(SAP)模型大鼠的治疗疗效及其作用机制。方法:75只SPF级健康大鼠造模完成后,按照数字表法随机分成3组:对照组、观察1组和观察2组,每组25只。对照组给予生理盐水腹腔注射,观察1组给予川芎嗪腹腔注射,观察2组在观察1组处理的基础上进行HBO治疗。每组各选取10只大鼠,记录24 h死亡率和平均生存时间;记录各时间点腹水量;采用酶联免疫吸附实验检测各组大鼠各时间点血清中炎性因子以及淀粉酶表达水平,硫代巴比妥酸法测定大鼠各时间点血浆中丙二醛(MDA)的含量。断头法处死大鼠后进行综合胰腺组织病理评分。结果:HBO处理后,观察1组(35.5%)和观察2组(20.0%)模型大鼠死亡率均明显低于对照组(55.0%),平均生存时间高于对照组;且观察2组大鼠死亡率低于观察1组,平均生存时间高于观察1组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01);观察1组和观察2组不同时间腹水量明显少于对照组,观察2组腹水量少于观察1组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01)。观察1组和观察2组模型大鼠血清淀粉酶IL-6、TNF-α、MDA水平明显低于对照组,IL-10高于对照组;且观察2组淀粉酶IL-6、TNF-α、MDA水平明显低于观察1组,IL-10高于观察组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01)。观察1组和观察2组不同时间模型大鼠胰腺组织病理评分明显低于对照组,观察2组评分低于观察1组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01)。 结论:HBO联合川芎嗪可通过改善SAP大鼠氧化损伤,调节炎性因子分泌,抑制其病情进展。