黄芪多糖对脑死亡状态下肝脏的保护作用

目的探讨脑死亡状态下黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对肝脏损伤的保护作用及其机制。方法将24只健康成年雄性新西兰兔随机分为3组:空白对照组、脑死亡组和APS组,每组8只。3组均于处理后4 h和8 h时处死4只新西兰兔获取血液和肝组织标本。空白对照组:于颅顶钻孔、颅内置Foley球囊导管,但不加压,维持麻醉。脑死亡组:建立渐进性颅内加压脑死亡模型。APS组:诱导麻醉后立即经股静脉推注注射用APS 12 mg/kg,建模处理同脑死亡组。采用全自动生化分析仪检测血液标本中的血清天冬氨酸氨基转移酶(aminotrans-ferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine amino-transferase,ALT)水平,采用ELISA试剂盒检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用HE染色观察肝脏组织的组织学变化;采用SP免疫组化染色方法检测肝脏组织中核转录因子p65蛋白(NF-κB p65)的表达。结果 1 ALT和AST。不论是4 h还是8 h时,同时点与空白对照组比较,脑死亡组和APS组的ALT和AST水平均较高(P0.05),且各时点脑死亡组的ALT和AST水平均高于APS组(P0.05)。同组内比较,8 h时空白对照组的ALT和AST水平与4 h比较差异均无统计学意义(P0.05);8 h时脑死亡组的ALT和AST水平与4 h时比较均升高(P0.05);8 h时APS组的ALT水平与4 h比较有所升高(P0.05),但AST水平与4 h比较差异无统计学意义(P0.05)。2 TNF-α。不论是4 h还是8 h时,同时点与空白对照组比较,脑死亡组和APS组的TNF-α水平均较高(P0.05),且各时点脑死亡组的TNF-α水平均高于APS组(P0.05)。同组内比较,8 h时空白对照组的TNF-α水平与4 h比较差异无统计学意义(P0.05);8 h时脑死亡组和APS组的TNF-α水平比4 h均有所升高(P0.05)。3 HE染色结果。4 h时空白对照组、脑死亡组和APS组的肝脏组织结构基本正常,无明显改变。8 h时脑死亡组的肝细胞呈气球样改变,排列紊乱,胞质疏松淡染呈网状,汇管区见大量炎性细胞浸润,表现为较为明显的组织损伤。8 h时APS组的肝细胞轻度水肿,排列正常,少量炎性细胞浸润,组织形态损伤较脑死亡组8 h时明显减轻。4 SP免疫组化染色结果。4 h时空白对照组、脑死亡组和APS组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平比较差异无统计学意义(P0.05)。8 h时脑死亡组和APS组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平均高于空白对照组8 h时(P0.05),且脑死亡组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平高于APS组(P0.05)。同组内比较,8 h时空白对照组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平与4 h比较差异无统计学意义(P0.05),但8 h时脑死亡组和APS组肝组织中NF-κB p65蛋白的表达水平均高于对应组4 h时(P0.05)。结论脑死亡可导致肝脏损害,8 h时的损害程度较4 h重;APS对脑死亡后的肝脏损害具有保护作用,其可能机制为通过抑制TNF-α的生成以及抑制NF-κB信号通路的活化,从而减轻脑死亡后炎症反应对肝脏的损伤。     

雌激素对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤中核因子-κB/IκB传导通路的影响及保护作用

目的 观察雌激素对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤中核因子-κB(NF-κB)/抑制蛋白(IκB)传导通路影响.方法 制作肝切除肝缺血再灌注损伤动物模型,雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组);肝切除肝缺血再灌注组(I/R组);肝切除肝缺血再灌注+雌激素组(I/R+ E2 组).分别在缺血再灌注后1、3、6h光镜下观察肝组织病理学改变,检测血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的水平和肝组织丙二醛(MDA)的含量及超氧化物岐化酶(SOD)的活性,免疫组织化学法测定肝组织NF-κB的表达,Western blot检测NF-κB抑制蛋白(IκB-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 再灌注后I/R组在各时相血清ALT、AST均显著高于I/R +E2组,并于6h达到峰值(P＜0.05).与I/R+E2组和Sham比较,I/R组肝细胞凋亡率显著升高(P＜0.01);肝组织中IκB-α表达降低,而NF-κB表达增高(P＜0.05);ICAM-1 和MDA的结果变化和NF-κB表达水平变化类似,SOD呈相反变化.在光镜下观察,I/R组肝小叶结构紊乱,肝窦淤血,肝细胞水肿变性,肝细胞片状坏死,在Sham组和I/R +E2组上述病理学变化明显改善.结论 雌激素对肝切除肝脏缺血再灌注损伤有显著保护作用,其作用机制可能与雌激素影响NF-κB/IκB传导通路、减轻脂质过氧化反应、减少炎症介质释放及抑制细胞凋亡有关.     

丙泊酚对大鼠移植肝NF-κB活化、ICAM-1、IL-1β和TNF-α表达的影响

目的 探讨丙泊酚对供肝保护的机理.方法 24只健康雄性SD大鼠,采用Kamada袖套法建立大鼠原位肝移植动物模型,随机均分为三组.移植肝再灌注前30 min,P100组和P50组分别腹腔注射丙泊酚100 mg/kg和50 mg/kg;C组腹腔注射生理盐水15 ml/kg作为对照.于肝脏再灌注6 h抽取下腔静脉血,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,ELISA法测定肝组织核因子(NF)-κB p65转录因子,免疫组织化学染色检测肝组织细胞间黏附分子(ICAM)-1、白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达.结果 再灌注6 h后,P100组、P50组大鼠血浆ALT、AST活性较C组明显降低(P<0.01);P50组ALT、AST活性较P100组增高(P<0.01).与C组相比,P100组和P50组在再灌注6 h大鼠肝组织NF-κB p65转录因子活化水平、TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA明显降低(P<0.01).P100组大鼠在再灌注6 h肝组织NF-κB p65转录因子活化水平、TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA表达明显低于P50组(P<0.01).结论 丙泊酚能抑制大鼠局灶性肝缺血-再灌注时NF-κB的活化,进而抑制炎症反应.这可能是其肝保护作用的机制之一.     

急性胰腺炎大鼠肝脏NF-κB 对 TNF-α表达的调控及其在肝损伤中的作用

目的 观察急性胰腺炎发生时肝组织中核因子-κB(NF-κB)对TNF-αmRNA表达的调节及其在肝损伤中的作用。方法 Wistar大鼠72只，随机均分为急性胰腺炎组(AP组)、急性胰腺炎吡咯基二硫氨基甲酸酯(PDTC)处理组(APP组)以及对照组(SO组)。分别在术后3h、6h、12h及24h检测肝组织NF-κB活性、TNF-αmRNA的表达以及血浆ALT水平。结果 AP组及APP组的NF-κB活性、TNF-αmRNA表达及血浆ALT水平分别在术后3～6h及3～24h显著高于SO组。在应用了NF—κB抑制剂的APP组，NF-κB活性、TNF-αmRNA表达以及血浆ALT水平均显著低于AP组。结论 急性胰腺炎发生时，肝脏中活化的NF-κB促进了TNF-αmRNA的表达，并参与了肝损伤的发生。     

NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后肝细胞凋亡中的作用

目的:探讨腹部火器伤肠管穿透后NF-κB在肝细胞凋亡信号转导中的作用,了解腹部火器伤肠管穿透后继发性肝损伤机制。方法:健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2、4、8、12和24h组,建立腹部火器伤肠管穿透模型,用免疫组化图像分析法测定各组肝内NF-κB活性,观察肝细胞凋亡和肝功能变化情况。结果:伤后各组肝内NF-κB活性明显高于对照组,并于伤后1h和8h出现2个高峰(P<0.05)。肝细胞凋亡指数和血清ALT水平于伤后显著增高(P<0.05),并与NF-κB活性变化基本一致。结论:腹部火器伤肠管穿透后肝内NF-κB活性增强,肝细胞凋亡增多,导致肝损伤。     

N-乙酰半胱氨酸对脑死亡巴马小型猪心脏的保护作用及其机制

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对脑死亡状态下巴马小型猪心脏形态与功能的影响。方法 应用改进的缓慢间断颅内加压法建立巴马小型猪脑死亡模型。将实验动物随机分为3组，每组5只。对照组（A组）：动物麻醉后仅行开颅与开关腹手术。非药物干预组（B组）：建立脑死亡模型，不进行药物干预。NAC处理组（N组）：建立脑死亡模型，于脑死亡后1和12h，按200mg／kg的剂量将NAC加入100ml生理盐水中，经静脉缓慢滴注。分别于脑死亡后6、12和24h检测各组血清中肌钙蛋白T（cTnT）的水平以及干扰素α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）以及白细胞介素6（IL-6）含量。脑死亡后24h，取各组心尖部心肌组织，光镜下观察心脏组织结构变化，电镜下观察心脏组织超微结构变化，免疫组织化学染色法观察核因子κB（NF-κB）的表达水平，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测NF-κB mRNA的变化。结果 脑死亡6h后，B组及N组的血清cTnT、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均开始升高，但N组升高幅度显著低于B组。脑死亡后24h可见心肌细胞出现损伤性改变；N组心肌细胞损伤明显轻于B组。B组及N组心肌细胞中NF-κB mRNA及其蛋白表达水平均升高，但N组显著低于B组。结论 N-乙酰半胱氨酸能够减轻脑死亡状态下心脏的形态和功能损伤性改变，其机制可能与抑制NF-κB mRNA及其蛋白的表达，减少炎症介质的释放有关。     

腹部火器伤肠管穿透后NF-κB在肝损伤发病机制中的作用

目的:探讨NF-κ B在腹部火器伤肠管穿透后肝损伤发病机制中的作用.方法:健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2,4、8、1 2和24 h组,伤后各组建立腹部火器伤肠管穿透模型后,用免疫组织化学图像分析法测定各组肝内NF-κB、TNF-α含量,同时测定肝细胞凋亡和血清中ALT水平变化情况,在光学显微镜下观察各组肝脏组织学变化.结果:伤后各组肝内NF-κB活性明显高于对照组,并于伤后1 h和8 h出现2个高峰(P<0.05);伤后各组肝内TNF-α含量、肝细胞凋亡指数和血清ALT水平均明显高于对照组,并于伤后2 h和12 h出现2个高峰(P<0.05);伤后各组出现逐渐加重的肝细胞水肿、变性、坏死.相关分析表明NF-κB与TNF-α、肝细胞凋亡指数均有正相关关系(P<0.05).结论:腹部火器伤肠管穿透后NF-κB可能在促进肝细胞凋亡的同时使TNF-α表达增多来共同介导肝损伤.     

核因子-κB抑制剂对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响及机制

目的观察核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂--二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达的影响及机制.方法采用内毒素休克模型,47只大鼠随机分为正常对照组(n=8)、内毒素休克组(n=24)和PDTC拮抗组(n=15),留取肝、肺、肾组织检测HMGB1 mRNA表达及相应器官功能指标的变化.结果内毒素攻击可导致动物肝、肺、肾组织HMGB1 mRNA表达广泛上调,分别于2～6h显著增高(P<0.05),12h呈现进一步升高趋势.PDTC处理后12h,肝、肺、肾组织HMGB1 mRNA表达均显著下调,其中肾组织2～12h趋于伤前范围;同时,血清丙氨酸转移酶、天冬氨酸转移酶、尿素氮、肌酐水平6h明显降低(P<0.05),肺组织髓过氧化物酶活性各时相点均显著低于内毒素休克组(P<0.05).结论NF-κB抑制剂能显著抑制内毒素休克动物组织HMGB1 mRNA的表达,NF-κB信号转导通路参与了内毒素介导HMGB1基因表达的调控过程,并与脓毒症时多器官功能损害密切相关.     

红花注射液对肝热缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 探讨红花注射液对大鼠肝热缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用及其机制。方法 选用雄性SD大鼠，随机分成4组，每组6只。S组为假手术组。缺血再灌注组（I／R组）及红花预处理组（SPC组）在缺血前30min分别经肠系膜静脉注射生理盐水或红花注射液2mL／kg，而缺血预处理组（IPC组）缺血前30min阻断血流5min。再灌注后24h检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平；肝组织行HE染色，观察病理组织学改变及评分（根据Suzuki标准）；TUNEL法检测肝细胞凋亡；RT—PCR检测肝组织肿瘤坏死因子α（TNF—α）、巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）及细胞黏附因子-1（ICAM-1）mRNA的水平；Werstern blotting测定核转录因子κB（NF-κB）蛋白的表达。结果 再灌注24h后，与I／R组比较，SPC和IPC组血清ALT，AST水平、肝组织病理学半定量评分、肝细胞调亡指数、肝组织中TNF-α，MIP-2，ICAM-1 mRNA水平及NF-κB蛋白的表达均降低，差异均有显著性（P〈0.05）；SPC组与IPC组比较。上述各项指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 红花注射液通过下调前炎性因子TNF—α，MIP-2及ICAM—1 mRNA的水平及抗细胞凋亡作用，可减轻移植肝IRI。     

NF-κB诱骗寡核苷酸对内毒素性肝损伤的保护作用和机制

目的探讨NF-κB诱骗寡脱氧核苷酸对大鼠内毒素性肝损伤的保护作用及其机制。方法60只SD大鼠随机分为对照组、内毒素(LPS)组、诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)处理组。取各组大鼠肝组织检测NF-κB蛋白结合活性(EMSA),观察组织病理学改变(光镜)及肝细胞凋亡(TUNEL)。取静脉血检测AST(自动生化仪)以及TNF-α,IL-6的表达水平(ELISA)。结果与对照组相比,内毒素组NF-κB活性明显升高,诱发大量肝细胞凋亡,肝脏损伤明显;同时血清AST,TNF-α及IL-6明显升高(P0.01)。与内毒素组相比,NF-κB诱骗寡核苷酸处理组NF-κB活性受抑制(P0.01)、肝脏组织病理学改变和肝细胞凋亡明显减轻,血清中TNF-α和AST表达水平降低(P0.01),但IL-6表达与内毒素组差异无统计学意义(P0.05)。结论NF-κB诱骗策略能高效抑制NF-κB的活性,抑制其下游有害细胞因子的产生,从而减轻内毒素性肝损伤。     

Brain Death Disrupts Structure and Function of Pig Liver

Objective

To observe the effects of brain death on hepatic structure and function in pigs and to assess the role of nuclear factor κB (NF-κB).

Materials and Methods

Twelve healthy pigs were randomly allocated to 2 groups of 6 each: a control group with Foley balloon catheter placement intracalvarium only, and a group with brain death established for 24 hours. Serum and hepatic tissue were obtained at 6, 12, and 24 hours after initial confirmation of brain death. Aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase concentrations were determined using automated biochemistry analysis. Interleukin-1β was determined using an enzyme-linked immunosorbent assay. The NF-κB messenger RNA was determined using real-time polymerase chain reaction, and NF-κB p65 using immunohistochemistry.

Results

Concentrations of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, and interleukin-1β in serum, and NF-κB messenger RNA and NF-κB p65 in hepatic tissue were higher in the brain-dead group compared with the control group, and all increased over time (P < .05).

Conclusion

The NF-κB activated by brain death promotes synthesis and release of inflammatory mediators, resulting in hepatic dysfunction.     

腹腔血流阻断动脉介入化疗对肝脏影响的实验性研究

目的观察腹腔内区域性血流阻断动脉内介入化疗(stop-flow)对肝脏的影响及其可能机制。方法将12只健康雌性幼猪随机分为两组,一组行腹腔血流阻断动脉内介入化疗(SFC组),另一组为单纯腹腔血流阻断(SF组)。应用RT-PCR检测肝脏组织白介素(IL)-8及ICAM-1mRNA表达;Westernblot检测核转录因子(NF)-κBP65亚基在细胞核内表达;测定外周静脉血丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)以及观察肝脏组织形态学改变,以评价阻断前及阻断区域血流循环再通后不同时间段肝脏损伤程度。结果Stop-flow(血流阻断时间为20min)引起阻断区域血流循环再通30min时肝脏组织细胞核内NF-κBP65亚基表达升高,IL-8及ICAM-1mRNA转录活性增强,但于再通后3h、6h逐渐减弱。血清ALT及AST于术后48h内轻度升高,并在升高24h后达到高峰(ALT为89.9U/L及93.2U/L,AST为185.5U/L及217.0U/L),术后1周恢复至术前水平。组织学改变表现为阻断区域血流循环再通后早期肝细胞小泡性脂肪变性伴轻度PMN浸润,肝小叶结构未见明显破坏,上述各种改变在SF组及SFC组之间差异无统计学意义。结论Stop-flow腹腔血流阻断20min引起的肝脏损害是自限且可逆的,不会引起肝脏结构和功能的严重损害。     

骨癌痛大鼠脊髓NF-κB、IL-6和TNF-α表达的变化

目的 评价骨癌痛大鼠脊髓NF-κB、IL-6和TNF-α表达的变化.方法 雌性健康SD大鼠72只,体重150～180 g,随机分为3组(n=24):对照组(C组)、假手术组(S组)和骨癌痛组(BP组).BP组于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μl Walker 256(1×105)乳腺癌细胞制备骨癌痛模型,S组左胫骨上端注射Hank液5μl.分别于肿瘤细胞接种前、接种后2、4、6、9、12、14、16、18和21 d时测定机械阈值.分别于肿瘤细胞接种后6、12和18 d时,处死3只大鼠,取L4-6脊髓组织,采用RT-PCR法测定NF-κB p65 mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA的表达;另处死3只大鼠,取L4-6脊髓组织,计数NF-κBp65阳性细胞,采用免疫组化法测定NF-κB p65表达.结果 与C组和S组比较,BP组机械痛阈降低,脊髓NF-κB p65及其mRNA、IL-6 mRNA和TNF-αmRNA的表达上调,NF-κB p65阳性细胞计数增加(P＜0.05或0.01);C组和S组间上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大鼠胫骨骨髓腔内注射肿瘤细胞通过激活脊髓NF-κB,导致炎性细胞因子IL-6和TNF-α大量释放,从而诱发骨癌痛.     

血必净对尿源性SIRS猪肾组织细胞因子的影响

目的 观察血必净注射液对尿源性SIRS猪肾组织细胞因子表达的影响,探讨血必净治疗尿源性SIRS的作用机制. 方法 健康实验猪45头按随机数字表法分为假手术对照组、模型组和血必净治疗组3组,每组15只,每组所有动物按时间点又分为术后0、4、6、12和24 h5个时间点亚组.建立尿源性SIRS猪模型.应用RT-PCR法检测肾组织中TNF-α、IL-6、IL-10、NF-κB p65mRNA的表达;采用Western blot法检测肾组织中NF-κB的活性. 结果 模型组猪的SIRS表现最为明显,血必净治疗组SIRS表现明显较轻.模型组猪肾组织TNF-α、IL-6、NF-κB p65mRNA的表达以及NF-κB的蛋白表达显著高于假手术组(P＜0.05);血必净治疗组较模型组的TNF-α、IL-6、NF-κB p65mRNA的表达以及NF-κB的蛋白表达显著降低(P＜0.01);IL-10 mRNA的表达情况则与之相反. 结论 血必净通过抑制NF-κB活性、上调IL-10、下调TNF-α,IL-6及NF-κB的表达而达到治疗尿源性SIRS的作用.     

绞窄性肠梗阻后肝内NF-κB活性变化及其在肝损伤中的作用研究

目的：探讨核因子-κB（NF-кB）及其下游因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在绞窄性肠梗阻致急性肝损伤中的作用及机制。方法：将96只SD大鼠随机分为绞窄性肠梗阻模型组（模型组）和假手术组（对照组）。各组再随机分为4个亚组,每个亚组12只,分别于造模完成后6 h、12 h、24 h、48 h 4个时点处死,留取肝组织,采血1～2 mL。用免疫组织化学法测定各组肝内NF-кB活性及TNF-α蛋白含量,并测定血清ALT、AST水平。结果：模型组血清ALT、AST在造模完成后随时间逐渐升高,于24 h达高峰,与对照组相比,各时点均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。模型组肝内NF-кB活性在造模完成后随时间逐渐升高,于12 h达高峰;同时TNF-α蛋白含量也随时间逐渐升高,于24 h达高峰。与对照组相比,除6 h组外,其余各时点均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：大鼠绞窄性肠梗阻发生后可致急性肝损伤,其损伤程度随时间逐渐加重;NF-κB在绞窄性肠梗阻的肝组织中被激活,并可增加TNF-α的转录表达,共同参与肝组织损伤的发生和发展。     

内毒素对大鼠肝星状细胞NF—κB mRNA表达及醛固酮分泌的影响

目的探讨内毒素对大鼠肝星状细胞（HSC）核转录因子κB（NF—κB）p65 mRNA表达及醛固酮分泌的影响。方法将培养后的HSC—T6分为内毒素组和对照组,内毒素组采用1．0μg／mL的内毒素进行处理。放射免疫法检测HSC分泌醛固酮的情况,一步法FIT—PCR检测HSC表达NF—κB p65 mRNA的水平。结果内毒素作用6、12、24和48h时,醛固酮分泌显著高于对照组（t值分别为3．063、4．577、6．847和9．317,P值均〈0．05）,NF—κB p65 mRNA的表达与对照组比较,差异有统计学意义（t值分别为5．155、6．095、7．875和9．313,P值均〈0．01）。HSC中醛固酮的分泌与NF—κB p65 mRNA的表达呈正相关（r=0．889,P〈0．01）。结论内毒素可以上调HSC分泌醛固酮并使NF—κB p65 mRNA的表达上调,这种效果随着内毒素作用时间的延长而更为显著,可能是内毒素致肝纤维化形成的机制之一。     

The Protective Effect of Huperzine A Against Hepatic Ischemia Reperfusion Injury in Mice

Background

Nowadays, hepatic ischemia reperfusion (HI/R) injury is regarded as a serious concern in clinical practices. Huperzine A (HupA) is an alkaloid isolated from the Chinese folk medicine huperzia serrate, which has possessed diverse pharmacological actions.

Methods

A mouse model of HI/R was caused by clamping the hepatic artery, the hepatoportal vein, and the bile duct with a vascular clamp for 30 minutes followed by reperfusion for 6 hours under anesthesia. The sham group experienced the identical procedure without hepatic ischemia. The HupA group received an injection into the tail vein 5 minutes prior to HI/R at the doses of 167 and 500 μg/kg. The vehicle group was injected with physiological saline instead of HupA. The liver function was assessed by determinations of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) activities. Tissue levels of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), malondiadehyde (MDA), and glutathione (GSH) were also measured spectrophotometrically. In addition, the activities of hepatic inflammatory mediators such as nuclear factor kappa B (NF-κB) p65, tumor necrosis factors-α (TNF-α, interleukin-1β (IL-1β) and IL-6 were also measured. Furthermore, the apoptotic damage was evaluated by measuring caspase-3 activity in hepatic tissues.

Results

Treatment with HupA in mice at the doses of 167 and 500 μg/kg remarkably reduced serum ALT and AST activities in HupA-treated ischemic mice. Furthermore, HupA treatment could enhance the activities of hepatic tissue SOD, CAT, and GSH but decrease MDA tissue content. The activities of inflammatory cytokines including NF-κB p65, TNF-α, IL-1β and IL-6 were all decreased in ischemic mice treated with HupA. Colorimetric test results illustrated that a marked reduction of caspase-3 activity was found in the HupA-treated group compared with the vehicle group.

Conclusion

Our present data suggest that HupA has a protective role against HI/R injury of mice and antioxidative, anti-inflammatory, and antiapoptotic actions are involved in its protection.     

乌司他丁对肝脏移植早期外周血NF-κB和TNF-α及酶学活性的影响

目的：通过观察乌司他丁对肝脏移植早期外周血NF-κB、TNF-α和酶学活性的影响,研究乌司他丁对肝脏移植术后早期再灌注损伤的保护作用。方法：收集36例肝硬化晚期患者,随机分为实验组和对照组（各18例）,实验组在肝移植时给予乌司他丁30万U＋生理盐水10mL静脉滴注,对照组给生理盐水10mL静脉滴注,在供肝恢复血供后1、2、4及6h抽取患者外周血进行肝酶学检查,用Westernblot技术检测外周血中核转录因子κB（NF-κB）P65表达,用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定外周血中TNF-α表达水平。结果：和对照组相比,实验组肝移植术后早期各时相点外周血肝酶学指标、NF-κBP65和TNF-α的表达水平明显下降,且差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：乌司他丁能抑制肝移植后早期肝脏炎症通路,对肝脏移植后再灌注损伤具有保护作用。     

治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 清洁级雄性Wistar大鼠32只,6周龄,体重220～280 g,采用完全随机设计的方法两两配对实施肝脏原位移植16只.采用随机数字表法,将受体鼠随机分为2组(n=8):肝移植组(LT组)和治疗性高碳酸血症组(TH组).LT组再灌注即刻吸入50％ O2-50％N2混合气体2 h;TH组再灌注即刻吸入O2-N2-CO2混合气体lh,调节气体浓度和呼吸频率,维持FiO2 50％、PaCO2 80～ 100 mm Hg,而后继续吸入50％O2-50％N2混合气体lh.再灌注期间记录MAP、PaO2和PaCO2.再灌注2h时,取动脉血样,测定血清ALT、AST、TNF-α、IL-1和IL-6的水平;取肝组织,测定NF-κB活性,计算凋亡指数,观察肝组织病理学结果.结果 与LT组比较,TH组血清ALT、AST、TNF-α、IL-1和IL-6水平、肝组织NF-κB活性和凋亡指数降低,MAP、PaO2和PaCO2升高(P＜0.05).TH组肝组织病理学损伤较LT组减轻.结论 治疗性高碳酸血症可减轻大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤,机制与抑制炎性反应和细胞凋亡有关.