鹿蹄草素对金黄色葡萄球菌的抑制作用及其机理研究

对鹿蹄草素作用下的金黄色葡萄球菌生长曲线、膜通透性和结构进行了研究,探讨鹿蹄草素抑菌和杀菌机理。鹿蹄草素能够有效抑制金黄色葡萄球菌的生长,其最小抑菌质量浓度为0.16mg/mL;鹿蹄草素对金黄色葡萄球菌具有较强的杀菌作用,最小杀菌质量浓度为0.2mg/mL。鹿蹄草素作用于金黄色葡萄球菌后,细胞膜通透性与空白对照组相比显著提高。扫描电镜的结果表明,鹿蹄草素作用后菌体细胞结构被破坏,细胞壁呈溶解状,菌体细胞间相互粘结,细胞与细胞间的界限变得模糊。试验结果表明,鹿蹄草素的抑菌性和杀菌功能与其对金黄色葡萄球菌细胞膜和细胞壁结构的破坏直接相关。     

抗菌肽brevilaterin与ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌的协同抑菌机理

金黄色葡萄球菌是食品中常见的致病菌,控制食品中金黄色葡萄球菌的生长繁殖对提高食品安全性至关重要。本研究以金黄色葡萄球菌作为指示菌,考察了抗菌肽brevilaterin与ε-聚赖氨酸的协同抑菌机理。抑菌动力学结果表明抗菌肽与ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌具有协同抑菌效果;细胞膜质子动力势研究结果显示,抗菌肽对跨膜pH值梯度无明显影响,ε-聚赖氨酸会破坏跨膜pH值梯度,1/4最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)抗菌肽+1/4 MICε-聚赖氨酸(联用组)对跨膜pH值梯度产生了协同破坏作用;采用流式细胞术结合荧光显微镜考察细胞膜的完整性,发现抗菌肽对细胞膜完整性具有较强的破坏作用,1/4 MIC抗菌肽即可导致36.3%的膜破损,而ε-聚赖氨酸对膜完整性损伤较小,1/4 MICε-聚赖氨酸仅破坏10.4%的细胞膜完整性,两者联用可对细胞膜完整性产生协同破坏作用,导致51.3%细胞膜完整性发生损伤;采用透射电子显微镜观察了细胞超微结构,发现抗菌肽和ε-聚赖氨酸联用较单独使用对细胞形态和细胞内容物的泄漏产生了协同破坏作用;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,ε-聚赖氨酸会抑制菌体蛋白质的合成或降解蛋白质,而抗菌肽对蛋白质合成无影响;琼脂糖凝胶阻滞电泳表明,抗菌肽对菌体DNA条带无明显变化,而ε-聚赖氨酸以及两者联用会造成DNA滞留,表明ε-聚赖氨酸可以通过与DNA结合发挥抑菌作用。上述结果表明,抗菌肽brevilaterin和ε-聚赖氨酸联用可以增强对细胞膜的破坏强度,且兼具抗菌肽对呼吸链脱氢酶活性的抑制与ε-聚赖氨酸对跨膜pH值梯度的破坏和DNA的结合作用,从而实现多靶位协同抑菌。     

10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究

利用倍半稀释法确定10-HDA对金黄色葡萄球菌的最小抑菌质量浓度为0.062 mg/m L。通过对金黄色葡萄球菌生长曲线、细胞膜通透性、细胞超微结构、细胞代谢、菌体蛋白表达的影响研究,探讨10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。结果表明10-HDA可破坏金黄色葡萄球菌细胞的完整性,使细胞膜通透性增加,胞内大量离子以及具有紫外吸收的大分子物质泄漏,细胞代谢发生紊乱。原子力显微镜结果表明,10-HDA可破坏菌体细胞结构,导致细胞表面凹陷,形成褶皱。SDS-PAGE电泳结果显示,10-HDA对金黄色葡萄球菌蛋白表达有明显影响,可抑制部分蛋白的正常表达。结论:10-HDA通过使金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,破坏菌体正常形态及代谢活力,进而使细胞生长受到抑制,最终导致死亡。     

双歧杆菌细菌素Bifidocin A对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机制

Bifidocin A是由Bifidobacterium animalis BB04代谢合成的一种新型广谱高效细菌素。以革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌为测试敏感菌,分析细菌素Bifidocin A的最低抑菌浓度及不同质量浓度下的抑菌效果,并从敏感菌细胞形态与结构、细胞膜的通透性、细胞膜的完整性以及细胞膜质子移动势的变化4个角度分别探讨该细菌素的抑菌作用机制。结果表明,细菌素Bifidocin A对金黄色葡萄球菌CVCC 26112的最低抑菌浓度为0.058μg/m L,抑菌活性较强且存在浓度依赖性;并初步推测其抑菌作用机制是通过耗散细胞膜质子移动势,增加细胞膜通透性,形成孔洞,进而破坏细胞膜完整性,并最终瓦解细胞。     

姜黄素介导的光动力技术对鲜切马铃薯的杀菌效果

本文运用光动力技术（Photodynamic technology,PDT）对鲜切马铃薯进行非热杀菌,实验选用姜黄素为光敏剂,420 nm LED蓝光为激发光源。探究了光照功率、光照时间、孵育时间以及光敏剂浓度等因素对鲜切马铃薯表面大肠杆菌、金黄色葡萄球菌杀菌效果的影响,并确定最优杀菌条件。结果表明,该技术对大肠杆菌的最优杀菌条件分别为:光照功率40 W、光照时间20 min、孵育时间15 min、姜黄素浓度30 μmol/L;金黄色葡萄球菌的最佳杀菌条件分别为:光照功率40 W、光照时间10 min、孵育时间15 min、姜素浓度30 μmol/L。与对照组相比,光动力技术处理后的大肠杆菌与金黄色葡萄球菌菌落总数分别为降低3.60与5.23 lg CFU/mL。     

壳聚糖与表面活性剂复合物的抑菌活性及抑菌机理研究

本文对壳聚糖与表面活性剂十二烷基磺酸钠（SDS）、十六烷基三甲溴化铵（CTAB）、曲拉通（TritonX-100）的复合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性进行了研究。结果表明：壳聚糖与CTAB、TritonX-100复合物对大肠杆菌抑菌活性强干壳聚糖,合成的三种复合物对金黄色葡萄球菌抑菌活性强于壳聚糖。其中壳聚糖-CTAB复合物抑菌活性最强,且织物经该复合物的整理后,也具有了较强的抗菌作用,故选择壳聚糖-CTAB的复合物考察抑菌机理。通过测定壳聚糖-CTAB作用后菌液中O．D260nm和0．D280nm、细胞膜蛋白荧光强度的变化,分别研究细菌细胞膜的完整性和细胞膜蛋白结构的变化。结果发现,壳聚糖-CTAB影响了细胞膜蛋白结构,使细胞膜破坏,从而达到抑菌作用。     

工业大麻叶对金黄色葡萄球菌的抑菌机制

探索工业大麻叶的抑菌组成及对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,为以工业大麻叶成分为先导化合物开发新型天然防腐剂提供理论依据。工业大麻叶乙醇提取物经乙酸乙酯萃取、硅胶柱分离,采用微量二倍稀释法确定最低抑菌浓度(MIC),获得高活性组分,GC-MS分析抑菌组成;研究作用前后菌体细胞壁完整性、细胞膜通透性、能量代谢和氧化损伤变化,探讨抑菌机制。结果表明,工业大麻叶Fr5(石油醚和乙酸乙酯的体积比为1∶1)组分抑菌效果最佳,对金黄色葡萄球菌的MIC为31.25μg/mL,GC-MS共鉴定出24种化合物;经Fr5处理后,细菌表面明显凹陷,胞外碱性磷酸酶(AKP)活力升高,培养液电导率升高,核酸相对浓度增加,可溶性蛋白质质量浓度增大,菌体三磷酸腺苷(ATP)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性均先升后降。工业大麻叶Fr5可破坏金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜结构,导致细胞膜通透性增加,内容物外泄,进而影响菌体能量代谢并造成质膜氧化损伤,最终抑制细胞生长。     

纳米氧化锌对金黄色葡萄球菌的抑制及其作用机制研究

目的 研究纳米氧化锌对金黄色葡萄球菌的抑制及其作用机制。方法 统计金黄色葡萄球菌在含有0.5、1.0、1.5、2.0和4.0 mg/mL纳米氧化锌的胰蛋白胨大豆肉汤中的活细胞数目, 不同质量浓度纳米氧化锌处理金黄色葡萄球菌后, 分别采用扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和超微结构的变化, 并分析细胞中活性氧(O2-)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性的变化。结果 纳米氧化锌可显著抑制金黄色葡萄球菌的生长(P<0.05), 当纳米氧化锌的质量浓度为2.0 mg/mL时, 培养24 h后金黄色葡萄球菌的数目比不加纳米氧化锌的对照组低5.2 logCFU/mL (P<0.05)。经纳米材料处理后, 金黄色葡萄球菌的菌体外形虽然未发生明显改变, 但细胞内部的组织结构遭受严重损伤, 细胞膜结构模糊, 胞内的O2-含量显著升高(P<0.05), SOD酶活性在处理后期显著降低(P<0.05)。结论 纳米氧化锌的处理可使金黄色葡萄球菌菌体细胞组织结构和细胞膜发生损伤, 并导致细胞产生了氧化应激反应, 从而抑制其增殖。     

新型广谱米酒乳杆菌素对金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

测定了由米酒乳杆菌C2产生的广谱细菌素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度和杀菌浓度,以金黄色葡萄球菌ATCC63589为模式菌株,过细菌素对细胞渗透性影响及采用原子力显微镜研究了这种细菌素的作用机理.结果表明,种细菌素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度和杀菌浓度分别为20AU/mL和80AU/mL.同时杀菌浓度的细菌素引起了胞内紫外吸收物质的大量泄露,引起细胞表面的严重皱折和破裂.因此,推断杀菌浓度下细菌素导致了金黄色葡萄球菌ATCC63589细胞壁和细胞膜的破坏,起胞内物质的泄露,终导致细胞的死亡.     

复合生物保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

研究了壳聚糖、溶菌酶与茶多酚配制而成的复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。采用琼脂平板打孔法确定复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),结合抑菌率、抑菌活力、细菌生长曲线、膜完整性、AKP活性与细菌超微结构,综合评价复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的影响。结果得出,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的MIC与MBC分别为0.8 mg/mL与1.6 mg/mL,随着作用时间的延长,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的生长抑制明显,菌体的细胞壁与细胞膜完整性受到破坏,菌体细胞中的AKP量增多,影响菌体细胞的代谢循环,菌体内部的核酸与蛋白质外泄,抑制其正常生长。由细菌超微结构观察发现,菌体细胞经复合保鲜剂处理后,造成菌体扭曲变形,细胞壁破裂,细胞质外渗。表明复合保鲜剂可破坏菌体的细胞壁,影响胞膜稳定性与胞内环境,最终导致菌体死亡。     

槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑菌机理

通过测定槐糖脂抑制金黄色葡萄球菌最低抑菌质量浓度和生长曲线,探讨槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑菌机理,同时利用扫描电镜和透射电镜观察金黄色葡萄球菌显微形态。结果表明:槐糖脂能有效抑制金黄色葡萄球菌生长,且抑制作用体现质量浓度依赖特性,最小抑菌质量浓度(MIC)为1.5625mg/mL。酸性和高温条件不影响槐糖脂抑菌性,表明其具有很好的稳定性。电镜结果表明,槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑制可能源于其对菌体细胞壁和细胞膜的破坏作用。     

羧甲基硫脲壳聚糖的结构表征及抑菌活性研究

运用红外光谱、紫外光谱和差热-热重分析对合成的羧甲基硫脲壳聚糖进行结构表征,并研究羧甲基硫脲壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果表明：硫脲壳聚糖中羟基发生了羧甲基化反应,与壳聚糖相比热稳定性降低;羧甲基硫脲壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性较壳聚糖本身增强,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌最小抑菌质量浓度(MIC)均为0.20mg/mL。     

山茶油抑菌性能和机理的研究

以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为实验菌,研究了山茶油的抑菌性能和抑菌机理。通过测定山茶油的最低抑菌浓度、菌生长曲线的影响来评定山茶油的抑菌性能;通过测定菌液中碱性磷酸酶、电导率、还原糖和蛋白质含量的变化,从菌体细胞膜和细胞壁的损伤等方面来阐述山茶油的抑菌机理。结果表明:山茶油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为0.5%和1%,山茶油对大肠杆菌的抑制效果强于金黄色葡萄球菌;山茶油可使大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜受到损伤,并引起菌体细胞溶出物、蛋白质以及离子的泄露,从而导致菌体的死亡。     

壳聚糖对细菌细胞膜的影响

研究了壳聚糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌性能。运用透射电子显微镜观察了壳聚糖作用前后大肠杆菌和金黄色葡萄球菌超微结构的变化;通过测定壳聚糖作用后菌液中OD260nm的变化,研究了壳聚糖对细菌细胞膜完整性的影响;通过测定壳聚糖作用后,菌悬液的上清液中所含壳聚糖残余量、乳酸脱氢酶和谷氨酰转移酶的内酶活性,考察了壳聚糖对细菌细胞外膜和内膜渗透性的影响。采用红外吸收光谱,对壳聚糖和模拟细胞膜卵磷脂间的反应产物进行表征。结果表明,壳聚糖可改变细胞内、外膜的渗透性而使细胞膜破坏,并伴随大量内溶物(DNA和mRNA)的溢出。壳聚糖与细胞膜间的作用主要是壳聚糖中的－NH3和卵磷脂中－C＝O、－P＝O形成了新的化合物引起的。     

茶多酚-肉桂精油复合保鲜剂抗氧化活性及抑菌作用

为了研究茶多酚-肉桂精油复合保鲜剂抗氧化活性和对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。采用体外抗氧化法测定了复合保鲜剂抗氧化能力。通过抑菌圈大小确定抑菌效果和最小抑菌浓度(MIC),结合抑菌活力、细菌生长曲线、细胞壁完整性和细胞膜通透性,综合评价复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的影响。结果表明,复合保鲜剂清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的IC50分别为4.02μg/m L、9.15μg/m L、0.61 mg/m L。复合保鲜剂能够有效抑制金黄色葡萄球菌的生长,MIC为0.5 mg/m L,且能够破坏细胞壁和细胞膜。综上所述复合保鲜剂具有很强的抗氧化活性,对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌效果,其可能的抑菌机理是破坏细胞壁,影响细胞膜的通透性。     

源自螺旋藻渣枯草芽孢杆菌发酵抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素对金黄色葡萄球菌抑菌机制对比研究

目的：研究枯草芽孢杆菌发酵螺旋藻渣的发酵液中分离出的抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。方法：采用紫外分光光度法、邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷法和原子吸收光谱法研究抗菌肽对金黄色葡萄球菌细胞膜通透性的影响;采用考马斯亮蓝法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳考察抗菌肽对金黄色葡萄球菌胞内蛋白合成及对基因组DNA结合作用的影响,并通过模拟细胞膜的疏水环境探究抗菌肽发挥抑菌作用时其二级结构的变化情况。结果：抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素均能引起金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,导致胞内钾离子释放量、蛋白质泄漏量及细胞膜疏水性增加,但抗菌肽SP-AP-1的抑菌效果更为显著（P＜0.05）;两种抗菌肽均能抑制菌体蛋白合成,尤其对分子质量为17、20、25～35 kDa的蛋白抑制作用最为明显;虽然两种抗菌肽对金黄色葡萄球菌基因组DNA没有明显阻滞作用,但增大抗菌肽质量浓度,SP-AP-1可与溴化乙锭竞争性结合DNA,使基因组DNA条带变暗,影响蛋白质的表达。本实验为螺旋藻渣抗菌肽拮抗金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究提供了理论参考。     

香旱芹精油对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

采用微波辅助水蒸气蒸馏提取出香旱芹精油,对其成分进行GC-MS分析,通过测试其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)评价其抑菌效果。分别从菌体微观形态、细胞溶出物、蛋白质和钾离子泄漏等方面研究香旱芹精油对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。实验结果表明香旱芹精油的主要成分为百里香酚(45.85%)、对伞花烃(20.72%)和γ-松油烯(23.57%),其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为75mm,MIC为0.25μL/mL,MBC为0.5μL/mL。香旱芹精油可使金黄色葡萄球菌细胞膜受到损伤,使细胞膜表面出现塌陷和破裂,并引起菌体细胞溶出物、蛋白质以及钾离子的泄露,从而导致菌体的死亡。     

鹿蹄草素对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的抑制效果观察

对鹿蹄草素作用下金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌生长曲线、膜通透性和扫描电镜下形态进行研究,初步探讨了鹿蹄草素抑菌和杀菌机理.结果表明:鹿蹄草素能有效抑制金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的生长,抑制作用随着药物浓度增加而增加,且对金黄色葡萄球菌具有杀灭作用.鹿蹄草素作用细菌后,金黄色葡萄球菌细胞膜通透性与空白对照组相比显著提高,绿脓杆菌无明显变化.扫描电镜结果表明,鹿蹄草素作用后金黄色葡萄球菌菌体细胞结构被明显破坏,细胞壁呈溶解状,菌体细胞间相互粘结,细胞间界限变模糊;绿脓杆菌菌体细胞间界限变模糊,但并未对菌体细胞壁和细胞膜造成破坏.结果分析认为,鹿蹄草素对金黄色葡萄球菌的抑制和杀灭与菌体细胞膜和细胞壁结构被破坏直接相关,而鹿蹄草素对绿脓杆菌的抑制与菌体细胞膜和细胞壁无关.     

基于细胞膜损伤的蔗糖月桂酸酯对金黄色葡萄球菌的作用机制

研究蔗糖月桂酸酯对金黄色葡萄球菌的抑菌活性及其对细胞膜的损伤机制。首先采用二倍稀释法考察了蔗糖月桂酸酯对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度,用平板计数法绘制了时间-杀菌曲线;通过DiSC3(5)探针标记荧光分光光度法考察了蔗糖月桂酸酯对菌体细胞膜电势差的影响,使用荧光显微镜结合流式细胞术研究了菌体细胞膜渗透性的影响,使用紫外分光光度法考察了大分子物质的泄漏情况,使用PBFI钾离子探针测定了胞内钾离子泄漏量,最后通过透射电子显微镜观察了蔗糖月桂酸酯处理前后菌体的超微结构。结果表明：蔗糖月桂酸酯对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）为0.312 5 mg/mL;经蔗糖月桂酸酯作用的金黄色葡萄球菌与对照组相比,DiSC3(5)探针的荧光强度呈现剂量依赖性增大;PI探针对菌体的沾染率增加,MIC处理30 min菌体PI沾染率达到84.7%;260 nm波长处的吸光度随作用时间的延长逐渐增大,但增大量较小;蔗糖月桂酸酯会导致金黄色葡萄球菌细胞钾离子泄漏,且泄漏量与添加的蔗糖月桂酸酯质量浓度呈正相关;经MIC蔗糖月桂酸酯作用1 h后,金黄色葡萄球菌体表面变粗糙,边缘模糊。结论：蔗糖月桂酸酯可以通过破坏细胞膜渗透性消散细胞膜电势,从而导致胞内物质发生轻微泄漏,最终达到抑菌作用,本研究可为多功能性糖酯抑菌产品的开发提供理论依据。     

光动力对金黄色葡萄球菌的杀伤作用及其AFM观察

通过细菌菌落计数以及原子力显微镜图像研究了血啉甲醚对金黄色葡萄球菌的光动力杀伤作用。结果表明:HMME在金黄色葡萄球菌菌液中的最强吸收峰为392nm,溴钨灯光源波长范围350～2500nm,能满足HMME所需的波长;HMME浓度为5μg/mL接受溴钨灯光源光照30min能杀死82.2%的金黄色葡萄球菌;原子力显微镜图像显示其灭菌机制是HMME在光照条件下导致菌体破裂,细胞内容物大量外泄;无光照条件下,HMME对金黄色葡萄球菌杀伤效果不显著。