慢性萎缩性胃炎热休克蛋白70(HSP70)表达的相关研究

目的 探讨热休克蛋白70(heat shock proteins 70,HSF70)在人胃粘膜组织中的表达.方法 采用免疫组化SABC方法检测HSP70在浅表性炎、慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃窦腺癌组织中的表达.结果 HSP70在浅表性炙、慢性萎缩性胃炎伴高级别上皮内瘤变(CAG和H-IN)、胃癌组织中的阳性率分别为27%、49%、67%,过表达率分别为3%、37%、58%,细胞核内阳性过表达率分别为0%、14%、55%.结论 HSP70在胃癌、CAG和H-IN中过度表达,可能在其致病过程中起着重要的作用,进一步研究其分子机制将为胃癌的防治提供理论依据.     

热休克蛋白27在常见消化道癌及癌前病变中的表达及意义

目的:检测热休克蛋白27(heat shock proteins,HSPs)在人常见消化道癌及癌前病变中的表达情况,探讨其在消化道癌诊断中的作用及其意义。方法:采用免疫组化SABC方法检测HSP27在Barrett食管(Barrett’esophageal)、食管贲门部腺癌(Adenocarcinoma ofthe esophagus and Cardia)、浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎伴高级别上皮内瘤变(CAG and H-IN)、胃窦腺癌、结肠息肉(Colonic polyps)、结肠腺癌(Colonic adenocarcinoma)组织中表达.结果HSP27阳性表达率在Barrett食管68.2%、食管贲门部腺癌91.7%(P<0.05);浅表性胃炎17.9%(P<0.05)、CAG and H-IN47.1%、胃癌组织中的阳性率分别为90%(P<0.05);结肠息肉84%、结肠腺癌96%(P<0.05)。结论:HSP27与肿瘤的发生有关,可作为消化道肿瘤诊断、判断预后和指导治疗提供理论依据。     

PDCD5蛋白在胃腺癌及其癌前病变中的差异性表达研究

目的：通过检测程序化细胞死亡因子5（PDCD5）在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、慢性萎缩性胃炎伴不典型增生及胃腺癌中的表达,以探讨PDCD5蛋白在胃腺癌发生发展过程中的重要作用。方法应用Envision免疫组织化学方法,检测PDCD5在30例慢性浅表性胃炎、30例萎缩性胃炎伴肠上皮化生、30例萎缩性胃炎伴不典型增生和30例胃腺癌组织中的表达。统计学处理应用SPSS19.0统计软件进行。结果①PDCD5在慢性浅表性胃炎中表达最高,明显高于癌前病变及癌组织中的表达（P＜0.05）;在肠化组织中的表达明显高于不典型增生组和胃腺癌组（P＜0.05）,在中重度不典型增生和胃腺癌中的阳性率差异无显著性（P＞0.05）。②PDCD5在胃腺癌组织中的表达与胃癌的组织病理分级无显著相关性（P＞0.05）。结论 PDCD5在慢性浅表性胃炎‐慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生‐慢性萎缩性胃炎伴不典型增生‐胃腺癌的过程中阳性表达逐渐降低;但其在胃腺癌中的阳性表达与肿瘤的组织分化程度无关。     

凋亡相关基因的表达与胃癌的关系

目的：研究凋亡相关基因bcl-2、bax、p53表达在胃癌发展过程中可能的作用机制。方法：采用免疫组化SABC法检测81例临床标本(慢性浅表性胃炎29例、萎缩性胃炎13例、胃炎伴异型增生21例、胃癌18例)的bcl-2、bax、p53蛋白表达。结果：在慢性浅表性胃炎组中无bcl-2表达，异型增生组阳性表达率5％，胃癌组为20％，阳性表达率呈逐渐增加趋势；bax蛋白阳性表达率在慢性浅表性胃炎组为83．3％，萎缩性胃炎组为64．3％，异型增生组为60％，胃癌组为46．7％，阳性表达率呈逐渐减少趋势；p53在慢性浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组无表达，在异型增生组阳性表达率20．6％，胃癌组为42．4％，阳性表达率呈逐渐增加趋势。结论：在胃癌的发展过程中可能存在凋亡抑制，促凋亡基因bax的表达逐渐受抑而抑凋亡基因的表达逐渐增加。     

胃粘膜组织中bcl-2、bax蛋白表达与胃癌的关系

目的：探讨bcl-2、bax表达在胃癌多基因、多阶段发展过程中可能的作用机制。方法：采用免疫组化法对79例临床标本（慢性浅表性胃炎30例、萎缩性胃炎14例、胃炎伴异型增生20例、胃癌15）进行了bcl-2、bax蛋白表达的检测。结果：在慢性浅表性胃炎组中无bcl-2表达,异型增生组阳性表达率5％,胃癌组为20％,阳性表达率呈逐渐增加趋势;bax蛋白阳性表达率在慢性浅表性胃炎组为83．3％,萎缩性胃炎组为64．3％,异型增生组为60％,胃癌组为46．7％,阳性表达率呈逐渐减少趋势。结论：本研究结果提示在胃癌的多阶段发展过程中可能存在促凋亡基因bax的表达逐渐受抑及抑凋亡基因的表达逐渐增加,即存在凋亡受抑。     

幽门螺杆菌感染与胃癌及癌前病变的关系

目的：进一步了解胃粘膜幽门螺杆菌（ＨＰ）感染与癌前病变及胃癌发生的关系。方法：采用快速尿素酶法及免疫组化方法，检测１０５例不同程度胃粘膜病变活检组织中ＨＰ感染，ｐ２１、ｐ５３蛋白的表达。结果：（１）慢性萎缩性伴肠上皮化生性胃炎、不典型增生、胃癌ＨＰ感染率均显著高于慢性浅表性胃炎（Ｐ＜０．０１）。（２）ＨＰ阳性组ｐ２１阳性率（４９．１％）明显高于ＨＰ阴性组（１４．６％）（Ｐ＜０．０１），且ｐ２１蛋白表达率随着病变程度加重而升高。（３）检测ｐ５３突变体，ＨＰ阳性组慢性萎缩性伴肠上皮化生性胃炎、不典型增生及胃癌亦均显著高于慢性浅表性胃炎（Ｐ＜０．０１），且ＨＰ阳性组ｐ５３蛋白表达率（４２．６％）明显高于阴性组。结论：ＨＰ感染在癌前病变及胃癌病变过程中有重要的生物学意义。     

热休克蛋白90α在人胃癌中的表达研究

目的：研究热休克蛋白90α（HSP90α）在人胃癌组织中的表达。方法：应用兔抗人HSP90α多克隆抗体对66例手术及胃镜活检胃癌及非胃癌粘膜病变石蜡标本，用免疫组织化学SP试剂检测HSP90α的表达。结果：HSP90α在胃癌、浅表性胃炎，萎缩性胃炎，萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生组织中的阳性率分别为88％、36％、50％、75％，HSP90α在胃癌，萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生中的阳性率明显主于单纯胃炎病变。在胃癌中的表达率高于萎缩性胃炎伴肠上皮生化和不典型增生（P＜0．01）。结论：HSP90α在人胃癌及癌前病变中表达值明显增高，此现象可能和胃癌的产生和发展有密切关系。     

胃复宁对大鼠胃黏膜异型增生的预防及对P^53、P^21蛋白表达调节的影响

目的观察胃复宁对实验大鼠CAG伴DYS的预防作用和对P^53、P^21基因蛋白表达的干预作用。方法胃炎组用去氧胆酸钠联合无水乙醇制造大鼠CAG伴DYS的实验模型;胃复宁组在胃炎组造模的基础上再施予不同剂量的胃复宁,以观察胃复宁对大鼠CAG伴DYS的防预效果,同时检测P^53、P^21蛋白表达率。比较胃炎组、胃复宁组、果胶铋组和空白对照组之间CAG伴DYS的发生率和P^53、P^21基因蛋白的表达情况。结果胃炎组CAG的发生率为100％,DYS发生率为83％;胃复宁（高、中剂量）组CAG的发生率为13％～20％,DYS发生率仅为6．6％～13％;两组比较有显著的差异（P〈0．01）。胃炎组P^53蛋白阳性表达率为58．33％,胃复宁（高、中剂量）组P^21蛋白阳性表达率为20％～26％,两组比较有显著的差异（P〈0．01）。胃炎组P^21蛋白阳性表达率为50．00％,胃复宁（高、中剂量）组P^21蛋白的表达为13％～26％,两组比较有显著的差异（P〈0．01）。结论胃复宁（高、中剂量）组通过干预P^21、P^53基因蛋白的表达,防止了细胞过度增生和癌变,有效防治大鼠CAG的形成,抑制胃上皮DYS的发生,降低了CAG伴DYS发展为胃癌的危险性。     

ATP4B在不同程度胃黏膜病变中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

目的研究ATP4B在胃黏膜病变演化过程中的表达变化。并探讨其与幽门螺杆菌（Hellcobacter pylori,Hp）感染的关系。方法根据组织形态学检查将221例胃镜活检标本分为慢性浅表性胃炎（CSG）、慢性萎缩性胃炎（CAG）、肠上皮化生（IM）和异型增生（Dys）4组;采用免疫组织化学方法检测ATP4B的表达情况;根据胃镜检查时快速尿素酶试验结果确定Hp感染状态。结果ATP4B表达水平随胃黏膜病变演化而降低,在4组的表达率分别为51．4％、15．4％、15．9％及5．0％．CSG组ATP4B表达水平显著高于其他各组（P〈0．05）。CSG组中Hp阳性标本ATP4B的表达率为33-3％,显著低于其在Hp阴性标本中的表达率（59．7％,P〈0．05）;在另外3组中,Hp阳性标本与阴性标本ATP4B的表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在胃黏膜病变演化过程中,ATP4B的表达随胃黏膜病变的进展而降低;Hp在胃黏膜病变演化的早期阶段抑制了ATP4B的表达。     

幽门螺杆菌感染及环氧合酶-2表达与胃癌变的关系

目的：探讨胃黏膜幽门螺杆菌（helicobactor pylori，Hpylori）感染、环氧合酶-2（COX-2）的表达与胃癌发生、发展的关系．方法：胃癌（GC）标本80例，非典型增生（Dys）40例，萎缩性胃炎（CAG）30例，肠上皮化生（IM）30例，浅表性胃炎（CSG）30例，应用免疫组化方法测定COX-2蛋白的表达，用亚甲兰染色检测H．pylori．结果：CSG，GC中Hpylori阳性和阴性病例COX-2表达差异无统计学意义（P〉0．05），但在CAG，IM，Dys中的Hpytori阳性病例中COX-2表达高于Hpriori阴性病例（52．9％vs7．6％，52．6％vs9．0％，67．9％vs33．3％）．结论：Hpylori感染诱导COX-2表达发生在胃癌形成的早期阶段．     

免疫荧光及激光共聚焦技术检测热盐水致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜组织细胞HSP60及ras蛋白表达

目的 研究热盐水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎(GAG)胃黏膜组织细胞HSP60及ras表达状态,以探讨CAG发病机制及长期热咸饮食与慢性萎缩性胃炎发生的关系.方法 采用热盐水灌胃建立大鼠萎缩性胃炎动物模型,选取大鼠腺胃胃窦组织行激光扫描共聚焦显微镜标本制备并对组织细胞结构的变化进行动态观察.结果 正常组胃黏膜组织细胞未见阳性表达,热盐水组在第12周,在细胞质中可见HSP60及ras表达,呈均质颗粒状,到24周、32周及65周时表达更加明显.双标记中可见HSP60和ras共同表达.结论 热盐水长期灌胃可导致胃黏膜出现萎缩,HSP60和ras表达增加,提示在胃黏膜萎缩形成过程中,HSP60与ras蛋白参与了重要的细胞分化调节过程.     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜炎症反应和IL-8活性的关系

目的 评价幽门螺杆菌（Hp）感染与胃粘膜炎症反应和组织IL－8活性的关系。方法 采用改良Giemsa染色、Hp免疫组化染色和PCR方法检测Hp感染并对Hp分类;组织IL－8含量测定采用ELISA方法。结果 十二指肠溃疡（DU,95％）、胃溃疡（GU,80％）和慢性萎缩性胃炎（CAG,70％）组Hp感染率显著高于正常对照组（30％）,而慢性浅表性胃炎（CSG,37．5％）组与正常对照组相比则无显著差异;DU（85％）、GU（60％）和CAG（50％）组cagA^ Hp感染率显著高于正常对照组（15．0％）,而CSG组（15．6％）与对照组相比则无显著差异;Hp感染率和IL－8水平随炎症程度的加重而增高。Hp感染和cagA^ Hp感染胃粘膜IL－8水平分别显著高于非Hp感染和cagA^-Hp胃粘膜。结论 胃粘膜Hp感染以及Hp cagA的表达状态与胃粘膜炎症反应程度以及胃粘膜IL－8含量密切相关。     

加味七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠血清胃泌素含量及HSP70表达的影响

目的探讨加味七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎（CAG）模型大鼠血清胃泌素含量及胃组织热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。方法采用致癌化学物MNNG复制CAG动物模型,给药后对各组大鼠测定胃酸、采用ELISA法检测血清胃泌素含量、S-P法检测HSP70的表达。结果加味七方胃痛颗粒大、中、小剂量组和胃复春组与模型组比较,血清胃泌素含量显著升高（P〈0.01）;加味七方胃痛颗粒大剂量组与胃复春组相比,HSP70蛋白表达增加（P〈0.05）。结论加味七方胃痛颗粒对CAG模型大鼠具有促进胃酸分泌,提高血清胃泌素含量及增强HSP70的表达的作用。     

突变型p53、PCNA表达和幽门螺杆菌感染与胃黏膜病变

目的　研究突变型 p5 3、增殖细胞核抗原 (PCNA)和幽门螺杆菌 (Hp)感染与胃黏膜良、恶性病变之间的关系。　方法　采用免疫组织化学S -P法 ,对慢性浅表性胃炎 (CSG )、慢性萎缩性胃炎(CAG)、不典型增生 (GED)及胃癌 (GCA)共 115例胃镜活检标本进行突变型 p5 3、PCNA和幽门螺杆菌感染进行检测。　结果　突变型p5 3在CSG及CAG表达均为阴性 ,在GED表达阳性 2 4% ,在GCA表达阳性 5 5 % ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。PCNA反映细胞增殖活性 ,在CSG、CAG、GED、GCA的表达有显著递增性 (P <0 .0 5 ) ;幽门螺杆菌感染在CSG检出率为 36 %、CAG为 48% ,GED为 72、GCA为 80 % ,与 2 0例正常胃黏膜Hp检测率 2 0 %作对照 ,除了CSG外 ,其余几组均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。Hp感染与PCNA表达强级 (阳性细胞 >5 0 % ) ,与 p5 3阳性病例均有显著相关性 (P <0 .0 1)。 　结论　突变型 p5 3、PCNA及幽门螺杆菌感染在胃黏膜不典型增生、胃癌的发生、发展中有一定作用 ;Hp感染对胃黏膜上皮细胞过度增殖可能起促进作用     

Expression of heat shock protein 90 beta in human gastric cancer tissue and SGC7901/VCR of MDR-type gastric cancer cell line.

OBJECTIVE To examine the expression of heat shock protein (HSP) 90 beta in human gastric cancer tissue and SGC7901/VCR of MDR-type gastric cancer cell line.

METHODS Immunohistochemical staining and in situ hybridization methods.

RESULTS Heat shock protein 90 beta was mainly located in the cell cytoplasma and weakly expressed in non-cancerous gastric mucosa. The expression rates of HSP90 beta in normal gastric mucosa, gastritis and paracancer tissues were 11.76%, 13.04% and 11.42% respectively, and there were no significant differences between them (P > 0.05). The expression of HSP90 beta was increased in gastric cancer. The positive rate of HSP90 beta in gastric cancer tissue was 30.00%, and was higher than non-cancerous gastric mucosa (P < 0.05). The expression rates of HSP90 beta in well differentiated, moderately differentiated, poorly differentiated gastric cancer and mucinous carcinoma were 15.38%, 31.25%, 33.33%, and 42.85% respectively. The expression of HSP90 beta in SGC7901/VCR of MDR-type gastric cell line was higher than in its parental cell line SGC7901. In situ hybridization showed that the positive signal of HSP90 beta was mainly located in the cell cytoplasma.

CONCLUSIONS The expression of HSP90 beta was higher in gastric cancer tissue than in non-cancerous gastric mucosa. In gastric cancer tissue, the expression of HSP90 beta was greater in poorly differentiated cancer tissue, and in SGC7901/VCR of MDR-type gastric cancer cell line the expression of HSP90 beta was higher than that in its parental cell line SGC7901.

     

慢性萎缩性胃炎脾胃湿热证与热休克蛋白60、70及CD44s、CD44v6的相关研究

为探讨慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)脾胃湿热证与热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白70(HSP70),细胞粘附分子标准型CD44蛋白(CD44s)及CD44的变异体(CD44v)之一CD44v6之间的关系,选择CAG患者71例进行胃镜检查,胃窦部活检标本行快速尿素酶试验及13C呼气试验,检测幽门螺旋杆菌(Hp),病理诊断和HSP60、HSP70、CD44s及CD44v6的免疫组织化学染色,分析比较它们的相关性。结果:①脾胃湿热组的萎缩和肠化程度高于脾虚组(P<0．05～0．01);②正常对照组胃粘膜内HSP60主要呈阴性或弱阳性表达,CAG脾胃湿热组及脾虚组患者胃粘膜内HSP60表达增强,且二者Hp的感染率均高于正常对照组(P<0．05～0．01),Hp的感染情况与HSP60的表达呈非常显著相关(P<0．01)。脾胃湿热组HSP60 表达与脾虚组相比无显著性差异,但脾胃湿热组HSP60表达有增强的趋势;③脾胃湿热组HSP70的表达与正常对照组、脾虚组相比无显著性差异(P>0．05),但脾胃湿热组强阳性表达率(71．0％)高于脾虚组(47．5％)(P <0．05);④脾胃湿热组CD44s和CD44v6的表达与正常对照组和脾虚组相比无显著性差异(P>0．05)。说明;①CAG脾胃湿热组胃粘膜的萎缩和肠化程度均重于脾虚组,可能是由于脾胃湿热证与炎症关系密切所致。②CAG脾胃湿热组及脾虚组HSP60的表达均较正常对照组增强,原因可能与Hp感染有关。③CAG脾胃湿热组HSP70的强阳性表达率强于脾虚组。④3组之间CD44s和CD44v6的表达无明显差异,说明CAG作为胃癌前疾病尚未出现CD44s和CD44v6的异常表达。     

Survivin基因在不同胃黏膜中的表达的研究

目的:研究胃癌(gastric cancer,GC)及不同胃黏膜组织中生存素(Survivin)基因的表达关系,为临床应用以生存素为靶点的胃癌防治措施提供理论依据.方法:采用免疫组织化学染色(SP法)检测不同胃黏膜组织中Survivin.30例浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG);31例萎缩性胃炎(chronic Atrophic gastritis,CAG),15例异型增生(Dysplasia,Dys).胃癌组织32例.结果:从CSG→CAG→ Dys→GC过程中,Survivin表达均呈递增趋势.CSG灰度值(57.64±4.44)、CAG灰度值(55.05±6.97)、Dys灰度值(48.59±4.16);GC灰度值(32.25±4.13).Survivin表达在CSG、CAG、Dys、GC之间表达有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织Survivin的表达与年龄,性别,肿瘤大小无关;在临床分期和组织分化程度方面Survivin阳性表达率明显不同,具有统计学意义(P＜0.05).结论:Survivin基因在胃癌的发生发展过程中可能起重要作用.     

HSP70在胃癌中的表达及意义

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)及其mRNA在胃癌、癌旁组织、慢性胃炎和正常胃黏膜组织中的表达情况及与临床、病理资料之间的关系。方法:采用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测病理诊断明确的60例胃癌组织标本及对应的距胃癌组织边缘1.5cm处的癌旁组织、距胃癌组织边缘5cm以上的正常组织以及胃炎组织中HSP70的表达差异,RT-PCR法对10例患者的胃癌组织及对应的癌旁组织、慢性胃炎组织和正常组织的HSP70mRNA的表达情况进行检测,结合临床病理资料进行统计分析。结果:HSP70的表达:在60例胃癌组织中的阳性表达率为75%,明显高于癌旁组织(P<0.01)、胃炎组织(P<0.01)和正常组织(P<0.01);在mRNA水平,胃癌组织的HSP70表达也明显高于其余3组(P<0.001)。HSP70的表达与患者年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无明显相关性(P>0.05);与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性(P<0.05)。结论:胃癌中HSP70的表达水平明显高于癌旁组织、胃炎组织和正常组织,提示与胃癌发生、发展密切相关;而且与患者年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无明显相关性;与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性。     

胃粘膜癌变过程中Fas、FasL的表达及意义

目的:通过检测胃粘膜癌变过程中凋亡相关蛋白、的表达,探讨其在胃癌发生发展中的作用。FasFasL方法:采用免疫组化法检测例慢性浅表性胃炎()、例慢性萎缩性胃炎伴肠化生()、例异型增生()和例SP41CSG19CAGIM22Dys37胃癌()。GC结果:在、、和组中的阳性表达率依次下降,的阳性表达率则逐渐升高;、FasCSGCAGIMDysGCFasLFasFasL在高中分化组的阳性表达率均显著高于低分化组。GCGC结论:、的阳性表达率在胃癌发生过程中呈现不同的变化趋FasFasL势,提示由诱导的胃粘膜细胞凋亡异常与胃癌形成可能有密切关系。在胃癌患者,与癌细胞分化有关的、表Fas/FasLFasFasL达的一致性有助于判断肿瘤的恶性程度和预后。     

HP、hTERT在胃癌及癌前病变中的表达及相关性研究

目的:探讨幽门螺杆菌(HP)、端粒酶基因(hTERT)在胃癌及癌前病变中的表达及相互关系。方法:采用特殊染色方法和原位杂交方法分别检测130例石蜡包埋标本中HP感染和hTERTmRNA的表达情况。结果:HP感染在慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、非典型增生(DYS)和胃癌(GC)中表达率分别为40%、60%、70%和72.5%。GC与对照组(CSG)相比有显著性差异(P<0.05);hTERTmRNA在CSG、CAG、DYS及GC中表达率分别是0、10%、30%、78.75%。GC与CSG、CAG、DYS分别相比有显著性差异(P<0.05);HP感染阳性的胃癌组hTERTmRNA阳性的表达明显高于HP阴性的胃癌组(P<0.01)。结论:HP感染在CSG→CAG→DYS→GC这一演变过程中起着重要作用;胃癌的发生与端粒酶活性有密切关系;HP感染与端粒酶活性呈正相关。