亲和素-生物素系统介导的炎症预定位显像研究

目的：探讨亲和素-生物素系统在小鼠炎症模型中进行预定位炎症显像的实验研究。方法：实验动物均为用肌肉注射松节油所致炎症模型,采用生物素化人免疫球蛋白（B-hIgG）和99mTc标记亲和素（99mTc-Avi-din）进行二步法预定位炎症显像,在注药后3h、6h、12h对小鼠炎症模型进行显像和体内生物学分布测定,并以^99mTc-hIgG和^99mTc-Avidin作为对照组。结果：二步法预定位显像组炎症病灶在3h即可显像,其靶/非靶（T/NT）比值为1.95,6h达3.12,血中放射性清除较快。而^99mTc-hIgG组T/NT在3h仅0.38,由于其分子量较大,血中清除时间较长,血本底较高,6h-12h血中仍保持较高放射性水平,且肝脏积聚放射性较多,图像也不清晰;^99mTc-Avidin组则在肝、肾有较多放射性浓聚。结论：二步法预定位炎症显像的T/NT比值较^99mTc直接标记hIgG法为高,且病灶显像时间提前,并可提高图像的清晰度。     

^125I标记单克隆抗体4E5的制备及其在小鼠体内的分布

目的：探讨放射性核素^125I标记单克隆抗体4E5的方法,观察标记物在正常小鼠体内的生物学分布。方法：采用Iodogen法进行单克隆抗体4E5的Ⅲ标记,标记产物用SephadexG-50分离纯化,三氯醋酸（TCA）法测定标记率和放化纯,并对标记物的稳定性进行分析。取45只昆明小鼠随机分成9组,每只小鼠从尾静脉注入剂量为148KBq／0．2ml的^125I-4E5,分别于注药后5min、15min、30rain及1h、2h、6h、24h、48h、72h各处死一组小鼠,取主要脏器称重并测量其放射性计数,计算各脏器每g组织百分注射剂量率（％ID／g）。结果：”I标记4E5的标记率为（79．24-2．6）％,放射化学纯度为（97．1±1．1）％,比活度为294．5MBq／mg;^125I－4E5加入到血清及PBS中放置1w后,放化纯度仍〉90％;体内分布显示^125I-4E5在小鼠体内主要分布于肝、脾、肾,在血液中清除较快。结论：Iodogen法^125I标记4E5的标记率和放化纯度高,方法简便,标记物的稳定性好;。I-4E5在小鼠体内主要通过肝和肾代谢,血液中清除较快。     

^99mTc-CPF制备及实验研究

目的 探讨炎症显像剂^99mTc-环丙沙星（^99mTc-CPF）在小鼠体内分布的特点，评价其作为新型炎症显像剂的价值。方法 制备^99mTc-CPF，并测定其放化纯度和标记率。制作小白鼠炎症模型。并经尾静脉注入0．1ml ^99mTc-CPF，分别于0．5、1、4、6、12h处死小白鼠，取血样和部分器官组织。测量其放射性。结果 ^99mTc-CPE标记率〉90％。室温下6h内化合物的放化纯稳定。小白鼠炎症组织与正常组织的放射性比值高，注射后1、4、6、12h，炎症组织与对侧正常组织比值分别为3．48、4．30、4．17、4．16．^99mTc-CPF主要由肝脏代谢、经肾脏排泄。血液清除较快。结论 ^99mTc-CPE是一种灵敏度高的炎症灶显像剂。且制备方法简单、方便。     

99mTc-CPF制备及实验研究

目的探讨炎症显像剂99mTc-环丙沙星(99mTc-CPF)在小鼠体内分布的特点,评价其作为新型炎症显像剂的价值.方法制备99mTc-CPF,并测定其放化纯度和标记率.制作小白鼠炎症模型,并经尾静脉注入0.1ml99mTc-CPF,分别于0.5、1、4、6、12h处死小白鼠,取血样和部分器官组织,测量其放射性.结果 99mTc-CPE标记率>90%,室温下6h内化合物的放化纯稳定.小白鼠炎症组织与正常组织的放射性比值高,注射后1、4、6、12h,炎症组织与对侧正常组织比值分别为3.48、4.30、4.17、4.16.99mTc-CPF主要由肝脏代谢、经肾脏排泄,血液清除较快.结论 99mTc-CPE是一种灵敏度高的炎症灶显像剂,且制备方法简单、方便.     

99m Tc 标记单克隆抗体Au14-1对荷宫颈癌小鼠的放射免疫显像研究

目的和方法：应用99mTc直接法标记抗小鼠宫颈癌（U14）单克隆抗体Au14-1,对荷瘤Km小鼠进行放射性分布和放射免疫显像的实验观察,探讨用99mTc－An14-1作宫颈癌导向诊断和导向治疗的可能性。结果：（1）99mTc－Au14-1注射后12h肿瘤灶已有放射性聚集,24h肿瘤组织的％ID／g值达8．79,呈明显特异性浓聚;（2）除肾脏外,各脏器的T／NT值在2．02~6．71之间,SPECT图像12h已见肿瘤显影,24h肿瘤影像更为清晰。结论：99TcTc－An14-1的体内分布与显像结果相一致,表明An14-1在体内具有良好的宫颈癌导向定位作用。     

99mTc—HSA（FSA）药盒的制备研究

目的 研制一种快速、简便、可靠的~99nzTc标记的心血池显像剂.方法 用二氧硫脲(FSA)作人血清白蛋白(HSA)还原剂,用放射性直接标记方法制备~99nzTc标记一步法药盒,测定该药盒及其标记产物的~99nzTc-HSA的理化性质、还原蛋白巯基(-SH)数目及生物性能.结果 对还原后的HSA进行了~99nzTc的标记,放化纯度大于95%,标记后室温放置24小时,放化纯度仍大于95%,体外稳定性很好,小鼠体内分布血中浓度高且较稳定.结论 采用该方法制备的药盒明显提高了~99nzTc-HSA在小鼠体内血中浓度,与~99nzTc-二亚乙基三胺五乙酸一人血清白蛋白(~99nzTc-DTPA-HSA)小鼠体内分布数据二者无显著差异,宜于临床进一步研究.     

99mTc-MDR1寡聚核苷酸DNAs的制备及质量控制

研究99mTc标记多药耐药基因(MDR1)mRNA反义DNAs寡聚核苷酸及其正义DNAs寡聚核苷酸的最佳标记方法并制备其二步法冰冻试剂盒,完成99mTc标记MDR1反义DNAs寡聚核苷酸和正义DNAs寡聚核苷酸及其二步法冰冻试剂盒的的质量控制.合成20个碱基单链的MDR1 mRNR的反义DNA寡聚核苷酸(ASON)及其正义DNA寡聚核苷酸(SON),全程硫代修饰并在5′末端附加氨基酸以修饰,分别将ASON和SON DNA 与MAG3偶联后用99mTc标记,制备了99mTc-寡聚核苷酸DNA二步法冰冻试剂盒.通过改变ASON-和SON-MAG3 DNAs、氯化亚锡及缓冲液的用量,调整反应介质的pH值条件,探讨其最佳标记方法.用高压液相色谱仪(HPLC)测定该药盒化合物的放射化学纯度、标记物的体内外稳定性、药盒的稳定性.99mTc-ASON-和SON-MAG3 DNAs标记化合物的放射化学纯度＞92%,标记物室温放置24 h后其放射化学纯度＞90%;药盒在-20℃条件下放置6个月,标记物的放射化学纯度仍＞90%.99mTc-寡聚核苷酸DNAs二步法冰冻试剂盒性能优良,标记方法简单、可行、有效,且标记物稳定性良好.     

Tc-MDR_1寡聚核苷酸DNAs的制备及质量控制

研究99mTc标记多药耐药基因(MDR1)mRNA反义DNAs寡聚核苷酸及其正义DNAs寡聚核苷酸的最佳标记方法并制备其二步法冰冻试剂盒,完成99mTc标记MDR1反义DNAs寡聚核苷酸和正义DNAs寡聚核苷酸及其二步法冰冻试剂盒的的质量控制。合成20个碱基单链的MDR1 mRNR的反义DNA寡聚核苷酸(ASON)及其正义DNA寡聚核苷酸(SON),全程硫代修饰并在5′末端附加氨基酸以修饰,分别将ASON和SON DNA与MAG3偶联后用99mTc标记,制备了99mTc-寡聚核苷酸DNA二步法冰冻试剂盒。通过改变ASON-和SON-MAG3 DNAs、氯化亚锡及缓冲液的用量,调整反应介质的pH值条件,探讨其最佳标记方法。用高压液相色谱仪(HPLC)测定该药盒化合物的放射化学纯度、标记物的体内外稳定性、药盒的稳定性。99mTc-ASON-和SON-MAG3 DNAs标记化合物的放射化学纯度>92%,标记物室温放置24h后其放射化学纯度>90%;药盒在-20℃条件下放置6个月,标记物的放射化学纯度仍>90%。99mTc-寡聚核苷酸DNAs二步法冰冻试剂盒性能优良,标记方法简单、可行、有效,且标记物稳定性良好。     

SHNH法和NHS-MAG3法标记的99mTc-寡聚核苷酸的比较

比较研究采用联肼尼克酰胺(Hydrazino Nicotinamide Derivative, SHNH)法和N-羟基琥珀酰胺基S-乙酰巯基乙酰三氨基乙酸(N-hydroxysuccinimidyl S-acetylmercaptoacetyltriglycline,NHS-MAG3)法以99mTc标记反义寡聚核苷酸(Antisense Oligonucleotide,ASON)的标记物的放射化学和生物学特性.合成SHNH和NHS-MAG3后,分别以SHNH和NHS-MAG3为双功能络(螯)合剂,用99mTc标记ASON;比较标记物99mTc-SHNH-ASON和99mTc-MAG3-ASON的体内外稳定性、兔血浆蛋白结合、正常BALB/C小鼠体内分布及结肠腺癌HT29细胞摄取的情况.结果显示,采用NHS-MAG3法标记的标记物99mTc-MAG3-ASON的标记率和稳定性明显高于SHNH法标记的标记物99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05)、血浆蛋白结合率显著低于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05);99mTc-MAG3-ASON在血液、心脏、胃、肠的分布显著低于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05),而在肝、脾的分布略低于99mTc-SHNH-ASON(P＞0.05),但在肾的分布显著高于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05);99mTc-MAG3-ASON的HT29细胞摄取率显著高于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05).因此,采用NHS-MAG3法的标记物99mTc-MAG3-ASON的放射化学和生物学特性明显优于SHNH法的标记物99mTc-SHNH-ASON.     

IGF-IA~（99）Tc~m标记及其在正常裸鼠体内放射性分布

目的：建立99Tcm标记胰岛素样生长因子I类似物（IGF-IA）的方法,观察其在正常裸鼠体内的生物学分布。方法：SnCl2.2H2O浓度0.75g～4g/L,IGF-IA的用量（20～100）μg,Tween80的用量从（0～10）μl,淋洗液的体积从（20～200）μl,在0.25h～6h不同时间点测定标记率及其在体外的稳定性。将标记物经正常裸鼠尾静脉注射,于5min、30min、1h、2h、4h取血液及主要脏器测量其放射性计数率值。结果：99Tcm标记IGF-IA的最佳标记方法为：浓盐酸溶解SnCl2.2H2O后用葡萄糖酸钠溶液配成3g/L,吸取100μl后加入40μlIGF-IA（2g/L）;300μlNa3PO4和2μl0.1%Tween80混匀后加入50μl99TcmO4-新鲜淋洗液;在IGF-IA体系中加入淋洗液体系,混匀,室温下反应0.5h;加入500μlNaH2PO4将pH值调节到7左右,99Tcm-IGF-IA最高标记率为（94.43±0.75）%,室温下放置6h标记率为（85.57±2.81）%。99Tcm-IGF-IA在正常裸鼠体内主要分布于肾脏和肝脏。结论：预锡化法进行99Tcm标记IGF-IA方法简捷且具有较高标记率和良好稳定性。99Tcm-IGF-IA在正常裸鼠体内主要被肾脏和肝脏摄取,血液清除快。     

~(125)I标记重组融合蛋白dTMP-GH在小鼠体内分布的实验研究

目的研究重组融合蛋白dTMP-GH在小鼠体内的分布情况,明确其是否具有靶向分布特点。方法实验室制备dTMP-GH重组融合蛋白;用放射性125I标记融合蛋白dTMP-GH后,按100μg/kg的标准小鼠尾静脉注射125I-dTMP-GH,分别于给药后5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h取心、肝、脾、肾、股骨、甲状腺等进行放射性计数。结果制备得到纯度大于98%的重组融合蛋白dTMP-GH;125I标记率为71.53%,放化纯度为96.53%,比活度为0.22 MBq/μl;尾静脉注射125I标记的dTMPGH后30 min股骨的放射性计数占到注射总量的10%,并随时间推移经肝脏和肾脏代谢。结论融合蛋白dTMP-GH经尾静脉注射后在小鼠体内主要分布于骨髓,具有骨髓组织偏向分布特点。     

Simplified scintigraphic methods for measuring gastrointestinal transit times.

To investigate whether simple transit measurements based on scintigraphy performed only 0, 2, 4 and 24 h after intake of a radiolabelled meal can be used to predict the mean transit time values for the stomach, the small intestine, and the colon, a study was conducted in 16 healthy volunteers. After ingestion of a meal containing 111indium-labelled water and 99mtechnetium-labelled omelette, imaging was performed at intervals of 30 min until all radioactivity was located in the colon and henceforth at intervals of 24 h until all radioactivity had cleared from the colon. Gastric, small intestinal and colonic mean transit times were calculated for both markers and compared with fractional gastric emptying at 2 h, fractional colonic filling at 4 h, and geometric centre of colonic content at 24 h, respectively. Highly significant correlations were found between gastric mean transit time and fractional gastric emptying at 2 h (111In: r=0.95, P<0.00001; 99mTc: r=0.96, P<0.00001), between small intestinal mean transit time and fractional colonic filling at 4 h (111In: r=-0.97, P<0.00001; 99mTc: r=-0.89, P<0. 00001), and between colonic mean transit time and geometric centre of colonic content at 24 h (111In: r=- 0.88, P<0.00001). We therefore conclude that reliable regional gastrointestinal transit times can be estimated from scintigraphic images taken 0, 2, 4 and 24 h after intake of radiolabelled markers.     

放射性3,3’-二碘甲腺氨酸（（131）I-T2）的合成

目的：获得放射性3,3’-二碘甲腺氨酸（131I-T2）,为下一步硫酸化得到3,3’-二碘甲腺氨酸硫酸化物（131I-T2S）作准备。方法：采用氯胺T法以131I标记3-单碘甲腺氨酸（3-T1）,凝胶柱层析法及纸层析法分离、纯化。测定标记率、放射化学纯度和标记物稳定性,并鉴定标记物的免疫活性。结果：131I标记率为65.1%±4.5%（n=5）,标记物的放化纯度为96.5%±1.1%（n=5）。经-20℃储存10d后放化纯度仍〉90%。结论：氯胺T法可获得较高碘标记率及较稳定的标记物。     

制备脂质体包裹的99m锝标记c-myc mRNA反义寡聚核苷酸的研究

探讨脂质体包裹的 99m-锝标记 c- myc m RNA反义寡聚核苷酸的制备方法 ,为反义显像和反义治疗的实验研究奠定基础。合成 15 bp的反义寡聚核苷酸 (DNA)和双功能螯合剂 -联肼尼克酰胺衍生物 ,DNA与双功能螯合剂偶联后 ,用 99m锝标记 ,然后用 C1 8Sep- Pak反相柱进行纯化 ,根据纯化结果 ,绘制淋洗曲线 ,计算标记率。再用阳离子脂质体对纯化产物进行包裹 ,获得脂质体包裹的 99m锝 - DNA。用纸层析测定脂质体包裹的 99m锝 - DNA的放射性化学纯度及与水、血清孵育后的稳定性。结果 ,不同放射性活度的 99m Tc O4 - 标记时的标记率为 :14 80 MBq时为 6 3.37%± 3.5 1% ,74 0 MBq时为 6 2 .5 2 %± 3.6 9% ,5 92 MBq时为 5 9.82 %± 5 .12 % ,经 χ2检验无显著性差异。脂质体包裹 99m Tc- DNA的放射化学纯度 =96 .4 7%± 3.0 1% ,与水、血清孵育后脱落的 99m Tc极少 ,可见 99m Tc- DNA的稳定性极好。由此可见 ,以脂质体作载体 ,联肼尼克酰胺衍生物作为双功能螯合剂 ,可制备脂质体包裹的 99m锝标记的单链寡聚核苷酸     

Technetium-99m-labeled monoclonal antibodies for immunoscintigraphy. Simplified preparation and evaluation

Ascorbic acid incubated with monoclonal antibodies (22 degrees C, 60 min, pH 6.5) at a molar ratio of 3500:1, reduced 2.7 +/- 0.2% of the available disulfides to sulfhydryl groups that strongly bind 99mTc, and provided greater than 95% labeling efficiency for several IgM, IgG and F(ab')2 antibodies. The colloid formation was consistently less than 3% and the stability of the tracer when challenged with DTPA and cysteine was excellent. The immunospecificity of labeled antibodies as determined by immobilized specific antigen assay was 84 +/- 1% for IgM and 82.6 +/- 1.1% for IgG antibodies. For in vivo evaluation in mice bearing experimental abscesses and tumors, corresponding 125I-labeled antibodies served as controls. The liver uptake was similar (P = 0.76 and P = 0.12) for 99mTc or 125I labeled antinuclear antibody TNT-1 in mice bearing abscesses as well as for 99mTc-TNT-1-F(ab')2 and 125I-TNT-1-F(ab')2 in mice bearing tumors. Higher but statistically insignificant (P = 0.08, 0.18, and 0.73) urinary excretion was noted for 99mTc-antibodies. For corresponding 99mTc- and 125I-labeled antibodies, the abscess to muscle ratios (3.3 +/- 0.5 vs. 3.4 +/- 0.8) and tumor to muscle ratios (10.04 +/- 4.4 vs. 10.54 +/- 3.0) were similar. The high 99mTc-TNT-1-F(ab')2 uptake permitted excellent scintigraphic visualization of tumors whereas the nonspecific 99mTc-HSA did not (tumor/muscle ratio: 2.4 +/- 0.3). This method is simple, reliable, and adaptable to an instant labeling technique.