红景天苷衍生物N03对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

目的：研究红景天苷衍生物1-C-β-D-吡喃葡萄糖基-N-（2′-氯苯甲基）甲胺（1-C-β-D-glucopyranosyl-N-(2’-chlorophenyl) methyl methanamine,N03）对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用。方法：以1~2 d龄Wistar大鼠乳鼠心室肌进行心肌细胞培养并建立缺氧-复氧损伤模型,检测不同浓度（2,10,50 mg•L-1）N03预处理后细胞的形态变化,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶（CK）、天冬氨酸转移酶（AST）的泄漏量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,luminometer法检测细胞中三磷酸腺甘(ATP)水平,荧光探针负载法检测其是否能够拮抗缺氧-复氧损伤所引起的细胞内活性氧(ROS)升高和钙超载。结果：红景天苷衍生物N03能减轻心肌细胞缺氧-复氧损伤后LDH,CK和AST的漏出量,同时能够升高SOD活性,降低缺氧-复氧损伤所致的ATP水平下降程度和拮抗细胞内ROS升高和钙超载。结论：红景天苷衍生物N03对缺氧-复氧损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,可能对心肌缺血的一些疾病具有治疗作用     

右美托咪啶预处理对新生乳鼠心肌细胞低氧/复氧所致能量代谢障碍的影响

摘要目的探讨右美托咪啶（DEX）对新生乳鼠心肌细胞低氧/复氧损伤的影响。方法培养1～3 d龄乳鼠心肌细胞,建立低氧/复氧模型。随机分为4组：对照组、低氧/复氧组、低剂量（0.1 μmol•L－1）DEX预处理组和高剂量（1.0 μmol•L－1）DEX预处理组。检测各组三磷腺苷（ATP）、二磷腺苷（ADP）及一磷腺苷（AMP）水平及乳酸脱氢酶（LDH）和线粒体琥珀酸脱氢酶（MSDH）活性。Annexin V/PI流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果对照组、低氧/复氧组、低剂量（0.1 μmol•L－1）DEX预处理组LDH活性分别为（336.32±55.98）,（992.72±100.78）,（716.26±78.22） U•L－1;MSDH的吸光度（A570）值分别为1.12±0.22,0.59±0.11,0.76±0.09;线粒体膜电位（相对值）分别为879.22±90.53,623.18±70.89,682.78±80.56。与对照组相比,低氧/复氧组ATP、ADP及AMP水平明显下调,LDH活性明显上调,线粒体MSDH活性及线粒体膜电位明显下调,细胞凋亡率亦明显上调。结论DEX可抑制低氧/复氧诱导的新生乳鼠心肌细胞损伤,其机制可能与下调心肌细胞凋亡率有关。     

黄芪多糖对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨黄芪多糖(APS)对乳大鼠培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法取体外培养的乳大鼠心肌细胞建立缺氧/复氧心肌细胞损伤模型,实验分为5组:空白对照组;模型组(A/R组);3个APS给药组,于缺氧及复氧开始时分别加入终浓度为10、30、100mg·mL-1的APS,观察APS对细胞上清液中缺氧/复氧后LDH、CK、AST漏出量、MDA含量、SOD活性。用MTT法检测APS对缺氧/复氧损伤心肌细胞存活率的影响。用流式细胞仪测定APS对缺氧/复氧损伤心肌细胞凋亡的影响。结果 APS可明显减少缺氧/复氧后LDH、CK、AST漏出量(P<0.05或P<0.01);降低MDA含量,提高SOD活性(P<0.05或P<0.01);明显提高缺氧/复氧损伤心肌细胞的存活率,并能明显抑制缺氧/复氧损伤心肌细胞凋亡。结论 APS对培养心肌细胞的缺氧/复氧损伤具有保护作用,作用机制与其增强细胞抗氧化作用,减少自由基及脂质过氧化物导致的细胞膜损伤和抑制细胞凋亡有关。     

环维黄杨星D对培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究环维黄杨星D对纯化培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法采用纯化培养的心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,测定细胞凋亡率、caspase-3、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果与正常组比较,模型组LDH、MDA含量、caspase-3活性及细胞凋亡率明显增高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01);CVB-D(1×10-5mol.L-1)组降低LDH、MDA含量、caspase-3活性和细胞凋亡率,提高SOD活性,与缺氧/复氧组比较各实验指标均差异具有显著性(P<0.05)。结论CVB-D对缺氧/复氧造成的心肌细胞损伤具有保护作用,作用机制与清除氧自由基,抗脂质过氧化及降低细胞凋亡率有关。     

茜草双酯对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用研究

目的探讨茜草双酯对缺氧复氧的乳鼠心肌细胞是否具有保护作用。方法原代培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧复氧模型,分别测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量及细胞的凋亡与坏死。结果与缺氧/复氧模型组比较发现,缺氧/复氧模型预先加茜草组较缺氧/复氧模型组LDH活性和MDA含量降低有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡和坏死有所减少。结论茜草双酯对体外培养的缺氧/复氧心肌细胞具有保护和抗凋亡作用。     

附子多糖对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞的保护机制

目的以细胞凋亡的线粒体信号通路为着眼点,对附子多糖对缺氧/复氧后心肌细胞的保护机制进行探讨。方法建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组、缺氧后适应组和附子多糖组。缺氧/复氧组给予心肌细胞缺氧3 h后复氧6 h;缺氧后适应组在细胞缺氧3 h后,复氧前即给予3个循环的5 min复氧/5 min缺氧,随后复氧6 h;附子多糖组在缺氧3 h后,将心肌细胞换入含附子多糖浓度为10 g.L?1的培养液中常规培养6 h。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率和线粒体膜电位,进行凋亡诱导因子(AIF)的Western blotting分析,检测心肌细胞内SOD活性和MDA含量。结果与缺氧/复氧组相比较,附子多糖后处理可以保护心肌细胞SOD活性,减少MDA的生成,阻止线粒体膜电位的下降,抑制AIF自线粒体向胞浆的释放,减少心肌细胞凋亡率。结论附子多糖后处理对缺氧/复氧后心肌细胞的保护机制与其抗氧化损伤,抑制细胞凋亡的线粒体信号途径有关。     

前列地尔对培养乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的 :观察前列地尔对培养乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法 :采用纯化培养的心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型 ,观察不同浓度前列地尔 (5 ,15 ,4 5 μg·L- 1)剂量组细胞的形态学变化 ,黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力 ,硫代巴比妥酸显色法测定细胞内丙二醛 (MDA)含量 ,并测定缺氧复氧后细胞培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)活性 ,透射电镜观察细胞超微结构改变。结果 :与正常组比较 ,模型组细胞SOD下降 ,MDA和LDH升高 (均P <0 .0 1)。前列地尔各剂量组与模型组比较 ,心肌细胞SOD(除小剂量组 )活性提高 ,MDA和LDH含量降低 (P <0 .0 1)。且心肌细胞形态及超微结构改善。结论 :前列地尔具有明显的抗缺氧复氧损伤、保护心肌细胞的作用。     

冠心苏合丸系列组方药物血清对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响*

目的:观察冠心苏合丸系列组方药物血清对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响,阐明系列组方抗缺氧复氧损伤作用机制上的异同。方法:用体外细胞培养方法,培养乳鼠心肌细胞,复制心肌细胞缺氧复氧模型;运用血清药理学方法,将心肌细胞与含药血清共培养,测定细胞活性、上清液中肌酸激酶(CK)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量以及细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、Na ,K -ATP酶和Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性。结果:含青木香的冠心苏合丸、含土木香的冠心苏合丸以及不含木香的冠心苏合丸给药后30~90 m in的药物血清均能不同程度地增强缺氧复氧损伤的心肌细胞活性;显著抑制缺氧复氧损伤所致心肌细胞LDH和CK的外漏;显著增强缺氧复氧损伤的心肌细胞SOD活性,降低MDA含量;显著增强缺氧复氧损伤的心肌细胞Na ,K -ATP酶和Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性;含土木香及不含木香的冠心苏合丸方在个别指标上的作用优于含青木香的冠心苏合丸。结论:冠心苏合丸方系列组方对缺氧复氧心肌细胞损伤均有明显保护作用,作用机制相似;原方中青木香被土木香替换或者去掉青木香,不影响其抗缺氧复氧损伤的作用。     

新型褪黑素受体激动剂Neu-P11激活AMPK减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的研究新型褪黑素受体激动剂Neu-P11对心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用及分子机制。方法实验分为对照组、缺氧/复氧模型组(H/R组)、H/R+Neu-P11组、H/R+Compound C组、H/R+Neu-P11+Compound C组。构建H9c2心肌细胞缺氧/复氧模型,检测各组心肌细胞凋亡情况,细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、SOD活性及MDA含量及心肌细胞AMPK的活性。结果与缺氧/复氧组细胞相比,Neu-P11预处理组细胞凋亡率明显减少,CK、LDH、MDA含量明显下降,SOD活性增加,心肌细胞AMPK活性明显增高,而AMPK特异性抑制剂Compound C可以阻断Neu-P11的保护作用。结论 Neu-P11能够减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤,这一保护作用与激活AMPK有关。     

荭草苷对缺氧-复氧心肌细胞的保护作用

目的探讨荭草苷 (orientin)对缺氧 复氧损伤心肌细胞的保护作用及其机制。方法采用原代培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧 复氧损伤模型 ,实验分为正常细胞培养组、缺氧 复氧损伤模型组、缺氧 复氧损伤 +荭草苷 (3、10、30 μmol·L-1)组、缺氧 复氧损伤 +verapamil(5 μmol·L-1)组。用黄嘌呤氧化酶法测定SOD的活力 ,硫代巴比妥酸显色法测定MDA含量 ,MTT染色法测定线粒体脱氢酶活性改变并测定LDH含量变化 ,荧光法测定细胞内钙浓度的变化。结果荭草苷可显著提高缺氧 复氧损伤心肌细胞内SOD的活性及细胞内线粒体脱氢酶活性 ,并能显著抑制LDH的活性、MDA的生成以及细胞内钙浓度。结论荭草苷具有明显的抗缺氧 复氧损伤 ,保护心肌细胞的作用