化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠行为学及海马神经细胞形态学的影响

目的探讨化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法将50只昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组,每组10只。采用线栓法制造小鼠右侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型。手术造模成功后假手术组、模型组灌服生理盐水20ml/(kg.d),尼莫地平组灌服尼莫地平液19.6g/(kg.d),中药高剂量组、中药低剂量组分别给予化浊解毒活血通络中药19.6g/(kg.d)及9.8g/(kg.d)灌服。均每日1次,14天后进行行为学测试,并通过光镜观察小鼠海马CA1区的病理形态学改变。结果与模型组相比,中药高剂量组能提高脑缺血再灌注损伤小鼠的学习和记忆成绩,改善小鼠海马CA1区的神经细胞形态学表现,并且优于尼莫地平组和中药低剂量组(P<0.05)。结论化浊解毒活血通络法对脑缺血再灌注损伤小鼠的行为学能力及海马CA1区的神经细胞具有保护作用,这可能是该法对抗脑缺血再灌注损伤的机制之一。     

化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤小鼠血清IL-6和TNF-α水平的影响

目的:观察化浊解毒活血通络方对小鼠脑缺血再灌注损伤的局部炎症反应的影响。方法:将50只昆明小鼠随机均分为模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组、假手术组。采用双侧颈总动脉结扎法合并尾端放血制造脑缺血再灌注模型。手术造模成功分别给予高、低剂量组化浊解毒活血通络方中药灌服。在治疗后用放免法检测各组小鼠血清中IL-6、TNF-α的表达水平。结果:化浊解毒活血通络方高剂量组小鼠中IL-6和TNF-α的表达水平明显低于模型组,与假手术组及尼莫地平组比较无统计学意义。结论:化浊解毒活血通络方可以抑制小鼠脑缺血再灌注损伤时炎症细胞因子的表达,减少白细胞的浸润,降低脑缺血再灌注损伤的程度。     

化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤小鼠血清IL-6和TNF-α水平的影响

目的 观察化浊解毒活血通络方对小鼠脑缺血再灌注损伤的局部炎症反应的影响.方法 将50只昆明小鼠按随机数字表法分为脑缺血再灌注损伤模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组、假手术组,每组各10只,前四组采用线栓法制备小鼠右侧大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型.手术造模成功后脑缺血再灌注损伤模型组、假手术组灌服生理盐水,...     

基于16S rRNA测序的肠道菌群探讨化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑-肠轴的影响

目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠肠道菌群的影响,探讨中药调控肠道微生物群进而恢复脑-肠轴平衡的机制.方法:将50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,化浊解毒活血通络方高(25.0 g·kg-1),中(12.5 g·kg-1),低(6.25 g·kg-1)剂量组,每组10只.参照Longa法...     

化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠ZO-1和occludin表达的影响

目的观察化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤模型大鼠紧密连接蛋白ZO-1和occludin表达的影响,探讨其神经保护机制。方法以改进后的Zea-Longa线栓法制备局部梗死性脑缺血再灌注损伤模型,以Longa评分法进行神经功能缺损评分,光镜下观察脑组织形态改变,免疫组化法观察ZO-1和occludin的分布及表达,RT-PCR法评测其在各组大鼠缺血侧脑组织中表达量。结果免疫组化结果显示,与假手术组相比,模型组ZO-1表达水平明显降低(P0.05);与模型组相比,各用药组ZO-1的表达水平均有升高(P0.05),其中以尼莫地平组和中药高剂量组最为明显。与假手术中相比,模型组occludin表达明显减弱(P0.05),与模型组相比,各用药组occludin表达均有增加(P0.05);中药低剂量组、中剂量组、高剂量组表达依次增加(P0.05),高剂量组与尼莫地平组差别不明显(P0.05)。RT-PCR法显示:与假手术组相比,模型组ZO-1及occludin表达水平明显降低(P0.05);与模型组相比,各用药组ZO-1及occludin的表达水平均有升高(P0.05),其中以尼莫地平组和高剂量组最为显著。结论化浊解毒活血通络方可能通过增加ZO-1和occludin的表达、调节血脑屏障通透性等机制,发挥神经保护作用。     

鸭跖草水提取物对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨鸭跖草对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:昆明种小鼠65只随机分成假手术组、模型组和鸭跖草水提物高、中、低剂量组。鸭跖草高、中、低剂量组小鼠分别灌服鸭跖草水提物20,10,5g/kg.d,模型组和假手术组小鼠在相同时间点灌服等体积的蒸馏水,连续10d。末次给药1h后,模型组和鸭跖草各剂量组小鼠均采用夹闭双侧颈总动脉30min再灌注60min的方法复制急性脑缺血再灌注损伤模型,假手术组仅做双侧颈总动脉分离术,不夹闭。测定各组小鼠脑指数、脑组织含水量、脑匀浆中丙二醛(MDA)含量及脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,并观察大脑皮层和海马CA1区细胞形态的变化。结果:与模型组比较,鸭跖草高、中剂量组小鼠脑指数和脑组织含水量均降低(P<0.01和P<0.05),脑匀浆中MDA含量减少(P<0.01),而SOD和GSH-Px的活力增加(P<0.01和P<0.05),且大脑皮层和海马CA1区神经元损伤减轻。结论:鸭跖草水提物对小鼠脑缺血再灌损伤具有保护作用,其机制与抗氧化作用有关。     

通络益智散对脑缺血再灌注损伤大鼠海马亚区c-Fos蛋白表达的影响

目的:探讨通络益智散对脑缺血损伤大鼠海马亚区c-Fos蛋白表达的影响。方法:动物随机分为模型组、通络益智散组和尼莫地平组,尼莫地平组、通络益智散组分别灌胃给予尼莫地平0.001 g·kg-1,通络益智散1.57 g·kg-1,模型组给予蒸馏水。预防性灌胃给药7 d后,采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制造大鼠脑缺血损伤模型,缺血再灌后2 h、4 h分别免疫组化法检测各组大鼠海马亚区c-Fos蛋白表达情况,并进行组间均数比较。结果:各组海马CA1、CA2、CA3、齿状回、下托区均可见c-Fos的阳性表达。与模型组比较,通络益智散、尼莫地平组海马各亚区c-Fos蛋白表达数量在造模后2h、4h明显降低(P0.01)。通络益智散组与尼莫地平组比较无明显差异(P0.05)。各组c-Fos蛋白数量在脑缺血损伤后2 h均达到高峰,4 h出现下降,对比有明显差异(P0.01)。结论:通络益智散能够抑制脑缺血损伤c-Fos蛋白表达,具有神经保护作用。     

丹星通络汤对脑缺血再灌注大鼠Caspase-3表达的影响

目的：观察丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞Caspase-3蛋白表达的影响，探讨其神经保护作用机制。方法：40只健康雄性Wistar大鼠，采用大脑中动脉线栓法建立局灶脑缺血再灌注大鼠模型，并随机将大鼠分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（L／R）、丹星通络汤大、小剂量组和尼莫地平组，每组8只。丹星通络汤组分别按15mL／kg（大剂量），7．5mL／kg（小剂量），尼莫地平组10mL／kg，术前连续灌胃给药7天，每天1次。假手术组和缺血再灌组分别灌以10mL／kg的生理盐水。大鼠局灶性脑缺血2h，然后进行再灌注。在再灌注24h断头取脑组织，采用免疫组织化学法检测脑组织中Caspase-3蛋白的表达，并与病理组织学改变进行对照。结果：丹星通络汤能明显降低大脑皮质及海马Caspase-3的表达，减轻神经细胞损伤。结论：丹星通络汤能减轻脑组织的缺血再灌注损伤，改善神经功能缺失，其作用机制可能与抑制Caspase-3蛋白表达有关。     

复方菖蒲益智汤对脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织谷氨酸及血清CaN活性影响的研究

目的观察复方菖蒲益智汤对脑缺血再灌注损伤小鼠急性期脑组织谷氨酸及血清钙调神经磷酸酶(CaN)活性的影响。方法将实验小鼠随机分为假手术组、模型组、复方菖蒲益智汤高剂量组(高剂量组)、复方菖蒲益智汤低剂量组(低剂量组)、尼莫地平对照组(尼莫地平组),每组10只。采用双侧颈总动脉夹闭的方法制备脑缺血再灌注损伤小鼠模型,给药14天后,观察海马区脑组织的病理形态学变化,测定脑组织谷氨酸及血清CaN(钙调神经磷酸酶)活性。结果各用药组小鼠海马区锥体细胞病变较模型组均有所改善,高剂量组改善最为显著;高剂量组小鼠脑组织谷氨酸活性、血清CaN活性均低于模型组、低剂量组及尼莫地平组(P0.05)。结论复方菖蒲益智汤能够降低脑缺血再灌注小鼠脑组织谷氨酸、血清CaN活性,对于小鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响

目的:探究活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠脑缺血再灌注及神经细胞凋亡模型,观察大鼠神经行为学改变,将尼莫地平作为对照组,观察组活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。结果:假手术组术后2d、5d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组及尼莫地平组对比,具有统计学差异(P0.05);假手术组术后20d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、尼莫地平组对比,具有统计学差异,P0.05;缺血再灌注组梗死面积占给梗死面积百分比为(19.27±2.29)%与活血复方低剂量组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组、尼莫地平组(P0.05);经缺血再灌注后6h,缺血再灌注组海马神经凋亡细胞数与假手术组比较显著增多,具有统计学差异(P0.05)。活血复方各剂量组凋亡细胞数与缺血再灌注组、尼莫地平组比较显著减少,具有统计学差异(P0.05)。结论:活血复方治疗脑梗塞可有效可缓解缺血再灌注后神经细胞凋亡,有效改善大鼠脑缺血再灌注模型的神经行为症状。     

滋阴清热中药预防小鼠单倍体移植后慢性移植物抗宿主病实验研究

目的:观察预防性应用滋阴清热复方中药对慢性移植物抗宿主病(cGVHD)模型小鼠的影响。方法:小剂量中药组、中剂量中药组、大剂量中药组受鼠从诱导起分别给予相应剂量的滋阴清热中药,阴性及阳性对照组给予等剂量生理盐水,诱导后第2、5、8、12周,检查骨髓细胞中的Y染色体数量,进行嵌合体分析。诱导后每3天观察受鼠的体重、毛发变化并评分。诱导后100天断颈处死小鼠,观察皮肤、肝脏、回盲端小肠的病理变化并评分。结果:阳性对照组和不同剂量中药干预组均可形成较为稳定的供受者混合嵌合体,给予滋阴清热中药预防后,大剂量中药组、中剂量中药组cGVHD的发病率降低,小鼠毛发改变、体重变化和肝脏、皮肤、肠道病理改变评分与阳性对照组比较,差异均有统计学意义,小剂量中药组上述指标与阳性对照组比较,差异均无统计学意义。结论:适当剂量的滋阴清热中药可预防单倍体相合移植后cGVHD的发生。     

参草通脉颗粒对大鼠慢性心力衰竭心室重构的影响

目的探讨参草通脉颗粒对慢性心力衰竭(慢性心衰)大鼠MMP-2、TIMP-2、AngⅡ、ACE2及心室重构的影响。方法80只大鼠从中随机选取15只大鼠作为假手术组,65只构建慢性心衰模型,成模后随机选取44只,模型组8只,西药组及中药高、中、低剂量组,每组各9只;采用蒸馏水灌胃模型组、假手术组大鼠,西药组予以赖诺普利处理,中药组予以参草通脉颗粒处理。治疗后PCR法检测心肌组织中MMP-2,TIMP-2,AngⅡ,ACE2的相对表达量。结果中药高剂量组对MMP-2的抑制效果和对TIMP-2的促进效果明显优于西药组,差异有统计学意义(P<0.05);中药组及西药组AngⅡ水平明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),西药组对AngⅡ抑制效果优于中药中剂量组,但与中药高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中药组及西药组ACE2水平显著高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);其中中药高剂量组和中药中剂量组对ACE2的促进效果均优于西药组,差异有统计学意义(P<0.05),中药高剂量组效果优于中药中剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论参草通脉颗粒可以抑制MMP-2的表达,增加TIMP-2的表达,促进ACE2的表达从而对抗AngⅡ的作用,起到保护心肌,延缓CHF的进展,高剂量的参草通脉颗粒疗效更为明显。     

十枣汤对腹水型荷瘤小鼠血管内皮生长因子的影响

[目的]观察十枣汤对腹水型荷瘤小鼠血管内皮生长因子(VEGF)的影响。[方法]使用随机平行对照方法,将6～7周龄健康昆明种小鼠90只随机分为正常对照组、荷瘤模型组、5-FU组、十枣汤大、中、小剂量组,每组15只。正常对照组不予处理,其余小鼠局部消毒后,腹腔内注射腹水型H22肝癌瘤细胞株0.2mL/只。次日起5-FU对照组腹腔内注射5-FU 25mL/kg,隔日1次,共5次。十枣汤组小鼠按27g/kg、81g/kg、160g/kg不同剂量等体积十枣汤灌胃,0.4mL/次,1次/d,连续10天。荷瘤模型空白对照组等容积生理盐水灌胃。各组末次给药24h后(腹腔传代第7日),称体重,脱颈椎处死,眼眶取血,抽吸乳白色浓稠腹水。检测血清VEGF、腹水VEGF。[结果]血清VEGF模型组、5-FU组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组较正常对照组血清VEGF均有不同程度增高(P<0.01);与模型组相比,均有显著性差异(P<0.05);与5-FU组相比,中药组均无显著性差异(P>0.05);其中中药低剂量组与中药高剂量组相比有显著性差异(P<0.05)。腹水VEGF 5-FU组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组较模型组腹水VEGF均有不同程度降低(P<0.05);与5-FU组相比,各中药低剂量组有显著性差异;中药中、高剂量无显著性差异(P>0.05);中药低剂量与中药中、高剂量均有显著性差异(P<0.05);中药中剂量与中药高剂量相比较无显著性差异(P>0.05)。[结论]十枣汤对腹水型荷瘤小鼠血清VEGF、腹水VEGF有与5-FU类似的抑制作用,并与剂量呈量效关系,这可能是十枣汤治疗恶性腹水,延长生存期、改善生存质量的作用机制。     

益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Fas FasL基因蛋白表达影响的实验研究

目的：本实验旨在通过动物实验观测中药益气强心饮对慢性心衰大鼠细胞凋亡及Fas、FasL基因蛋白表达的影响。材料与方法：采用腹主动脉缩窄法结合皮质激素造模法建立慢性心衰阳虚水泛证大鼠模型,随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、假手术组,用药8周后,观察各组大鼠的心肌细胞凋亡及Fas、FasL基因蛋白表达。结果：益气强心饮能明显下调慢性心衰大鼠心肌组织Fas、FasL基因蛋白表达,疗效等同西药对照组。结论：益气强心饮可调控慢性心衰大鼠的心肌细胞凋亡,具有治疗及延缓心衰的发展等作用。     

补肾活血方联合补佳乐对宫腔粘连大鼠YAP1/TGF-β1信号通路的影响

目的:探讨补肾活血方联合补佳乐对宫腔粘连大鼠的疗效及机制。方法:将40只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组(补肾活血方)、西药组(补佳乐)、中药+西药组(补肾活血方+补佳乐),每组8只。应用双重感染建立宫腔粘连模型后,灌胃给药4周,HE染色观察子宫内膜病理变化; Masson染色观察子宫内膜纤维化; 免疫组化检测子宫内膜Yes 相关蛋白1(YAP1)及转化生长因子-β₁(TGF-β₁)蛋白表达。最后将每组剩余大鼠与雄鼠合笼,7 d后记录胚胎孕囊数。结果:与模型组相比,中药+西药组的内膜厚度和腺体数明显改善(P<0.05)。与模型组相比,中药组、西药组、中药+西药组纤维化明显减轻(P<0.05),而与西药组或中药组相比,中药+西药组纤维化程度显著降低(P<0.05)。与模型组相比,中药组、中药+西药组YAP1蛋白表达明显降低(P<0.05); 同西药组或中药组相比,中药+西药组子宫内膜YAP1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比,中药+西药组TGF-β₁蛋白表达明显减少(P<0.05); 同西药组相比,中药+西药组TGF-β₁蛋白表达量减少(P<0.05)。与模型组、中药组、西药组相比,中药+西药组子宫孕囊数明显增多(P<0.05)。结论:补肾活血方联合补佳乐能够有效抑制大鼠宫腔粘连,减轻子宫内膜纤维化,改善妊娠结局,其作用机制可能与调控YAP1/TGF-β₁信号通路有关。     

基于Blimp1/Bcl6通路探讨骨痛灵联合唑来膦酸治疗肺癌骨转移的实验研究

目的观察骨痛灵方对肺癌骨转移疼痛模型小鼠Blimp1/Bcl6通路的影响。方法 85只C57 BL/6小鼠随机选取17只小鼠,注射PBS溶液作为假手术组;其余68只小鼠左后肢胫骨骨髓腔内注射Lewis肺癌细胞建立骨转移疼痛模型,随机分为模型组、中药组、西药组、中西药组,每组17只。中药组小鼠以骨痛灵方煎剂灌胃,西药组予以唑来膦酸腹腔注射,中西药组则两药联合运用,治疗3周。采用TRAP特殊染色法检测小鼠胫骨的破骨细胞,以RT-PCR和Western blot法检测B细胞诱导成熟蛋白1(Blimp1)、B细胞淋巴瘤蛋白6(Bcl6)和组织蛋白酶K(Ctsk) mRNA和蛋白的表达。结果与模型组比较,中药组、西药组和中西药组TRAP阳性细胞数量均明显减少,Blimp1、Ctsk mRNA和蛋白表达均降低,Bcl6 mRNA和蛋白表达均升高,且差异均有统计学意义(P0.05);在3个治疗组中,中西药组阳性细胞数量最少,Blimp1、Ctsk mRNA和蛋白表达最低,Bcl6 mRNA和蛋白表达最高,差异有统计学意义(P0.05)。结论骨痛灵方通过抑制Blimp1/Bcl6通路,抑制破骨细胞的活化,从而缓解肺癌骨转移疼痛。     

压力性溃疡中药组方抗炎镇痛的药理作用研究

目的 探讨压力性溃疡中药组方的抗炎镇痛作用机理.方法 实验动物应用随机数字表进行随机分组,设中药组方高剂量组、低剂量组,以吲哚美辛组、生理盐水组为对照,通过抑制大鼠角叉菜胶性足跖肿胀实验、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验、醋酸致小鼠扭体反应实验,观察检测受试动物的各项指标.结果 大鼠趾部皮下注射角叉菜胶致炎后,中药组方高剂量组1～6 h足跖肿胀明显低于生理盐水组(P＜0.05),2～6 h抗炎作用与吲哚美辛组无统计学意义(P＞0.05);中药组方高剂量组和低剂量组小鼠腹腔染料渗出减少,与生理盐水组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),中药组方高剂量组与吲哚美辛组比较作用强度相当(P＞0.05);中药组方高剂量组和低剂量组小鼠扭体反应次数与生理盐水组比较显著减少(P＜0.05).结论 中药组方高低剂量均有抗炎镇痛作用,作用呈量效正相关.     

泄浊益肾方对高尿酸血症肾损害大鼠肾脏的保护作用

目的:观察泄浊益肾方对高尿酸血症肾损害大鼠肾脏的保护作用及作用机制。方法:利用腺嘌呤加乙胺丁醇复制高尿酸血症肾损害大鼠模型,实验分为正常对照组、模型对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组及西药(别嘌呤醇)对照组(n=10),检测血清尿酸、肌酐、尿素氮及观察肾组织病理变化。结果:中药各剂量组大鼠血尿酸明显下降,与模型对照组相比差异显著(P0.01),尤中药中剂量组;中药各剂量组血肌酐、尿素氮均较模型对照组降低(P0.01或P0.05),尤中药高、中剂量组更为显著;中药各剂量组病理改变较轻,接近正常对照组。结论:泄浊益肾方能够降低高尿酸血症肾损害大鼠的血尿酸、肌酐、尿素氮,改善肾功能,对肾脏病理有修复保护作用,可防治高尿酸血症肾损害。