银杏叶与银杏叶提取物及其片剂中萜类内酯薄层色谱分析

目的研究银杏叶与银杏叶提取物及银杏叶片中萜类内酯薄层色谱鉴别。方法以银杏叶提取物、白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B及银杏内酯C为对象,研究温度对其薄层色谱的影响。结果温度无显著影响。结论该薄层色谱鉴别法可在室温下进行。     

高效液相色谱法测定贵州产银杏叶提取物中萜类内酯的含量

目的研究银杏叶提取物中的银杏萜类内酯A,B,C及白果内酯的含量测定方法并对贵州银杏药材银杏萜类内酯的含量进行调查研究。方法本实验采用甲醇超声提取样品,HPLC梯度洗脱。结果银杏萜类内酯日内和日间精密度的RSD均小于1.5%,稳定性实验的RSD为0.65%（n=5）,最低检测限为0.50μg/ml,加样回收率为97.7%,97.2%,94.7%,94.6%,RSD（n=5）分别为2.8%,2.3%,2.5%,2.1%。银杏叶提取物样品中GA,GB,GC和BB的总含量均符合《中国药典》（2005版）标准。结论该方法缩减了样品的前处理步骤,节约了实验时间,适用于银杏叶提取物中的银杏萜类内酯A、B、C及白果内酯含量测定;同时也证明贵州作为一个药材大省,银杏的质量也相对较好。     

乌参醒脑滴丸中银杏萜类内酯成分的质量控制研究

目的控制银杏叶提取物原料质量并建立乌参醒脑滴丸中萜类内酯成分的含量测定方法。方法采用AB-8大孔吸附树脂进行银杏叶萜类内酯提取优化,HPLC-ELSD法检测4种萜类内酯白果内酯及银杏内酯仁、A、B的含量,优选提取部位入药。优化色谱条件,采用Diamonsil-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,柱温34℃;以甲醇-0.2%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.7 mL·min~(-1);蒸发光散射检测器检测,载气压力为30 psi,漂移管温度为80℃,同时测定乌参醒脑滴丸中白果内酯、银杏内酯仁、银杏内酯A、银杏内酯B的含量。结果乌参醒脑滴丸优选60%乙醇提取部位干浸膏进行成药制剂,滴丸制剂中4种成分(白果内酯及银杏内酯C、A、B)分别在4.77~47.70mg·mL~(-1),2.31-23.10mg·mL~(-1),4.79~47.94mg·mL~(-1),2.32~23.25mg·mL~(-1)浓度的常用对数(X)与峰面积的常用对数(Y)呈良好的线性关系。其4种萜类内酯成分的平均回收率分别为92.1%,91.5%,93.7%,93.7%;RSD分别为2.31%,2.77%,2.12%,1.36%。结论 HPLC-ELSD法测定乌参醒脑滴丸4种萜类内酯分离度好,专属性强。该研究可保证乌参醒脑滴丸萜类内酯成分原料可控,成分可控。     

银杏叶制剂的药理及临床

银杏叶制剂是以银杏叶提取物为原料。银杏叶提取物是采用现代先进的提取技术，从银杏叶中提取其活性物质。１有效成分银杏叶提取物中的有效成分主要是黄酮甙类和萜类［１］。其中黄酮类以槲皮素、山柰素、异鼠李素为主。萜类成分包括银杏内酯和白果内酯。银杏内酯为二萜内...     

银杏叶提取物和银杏内酯A对小鼠的抗焦虑作用

作者研究了银杏叶提取物(GBE)、4个萜类成分银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯对小鼠的抗焦虑作用。     

国产与进口银杏叶片萜类内酯Beagle犬生物利用度的比较

目的比较国产与进口银杏叶片在Beagle犬体内的药动学参数和生物利用度。方法 Beagle犬分别ig国产与进口银杏叶片后,取血测定。采用LC-MS检测Beagle犬血浆中银杏叶片萜类内酯(银杏内酯A、银杏内酯B和白果内酯)的含量,绘制血药浓度-时间曲线,采用DAS软件计算药动学参数。结果 Beagle犬ig国产银杏叶片(80 mg/kg)后银杏内酯A、银杏内酯B和白果内酯的药-时曲线下面积(AUC0~t)分别为51.64、19.86和72.90 ng·h/m L,而ig进口银杏叶片(80 mg/kg)后三者的药-时曲线下面积(AUC0~t)分别为69.98、24.35和169.60 ng·h/m L。根据2种制剂中3种成分的含量,国产银杏叶片中银杏内酯A、银杏内酯B、白果内酯的相对生物利用度分别为37.77%、33.70%和95.98%。结论 Beagle犬ig国产银杏叶片后的萜类内酯生物利用度显著低于进口银杏叶片。     

高效液相色谱及蒸发光散射检测器法测定银杏叶片中萜类内酯的含量

目的测定银杏叶片中萜类内酯银杏内酯A,B,C及白果内酯的含量。方法采用高效液相色谱法(HPLC)以蒸发光散射检测器(ELSD)检测,对银杏叶片中的活性成分银杏内酯A,B,C及白果内酯进行测定。结果银杏内酯A在2.12~10.6μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为96.0%;银杏内酯B在2.10~10.5μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 3),平均回收率为94.6%;银杏内酯C在1.97~9.80μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为92.4%;白果内酯在4.12~20.6μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为93.6%。结论该方法准确可靠,可用于银杏制剂萜类内酯的质量监控。     

HPLC同时测定脉平片中白果内酯、银杏内酯A和银杏内酯B、银杏内酯C的含量

目的:建立脉平片中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量测定方法。方法:采用HPLC对制剂中银杏叶提取物的主要成分白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C进行定量分析。CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6mm×250mm 5μm);流动相四氢呋喃-乙腈-水(12∶10∶78),蒸发光散射检测器,柱温30℃,流速1.0mL·min-1。结果:银杏内酯C在1.11~6.66μg,白果内酯在2.232~13.392μg,银杏内酯A在1.912~11.472μg,银杏内酯B在1.502~9.004μg均呈良好的线性关系,平均回收率分别为96.36%,97.18%,97.71%,96.57%;RSD分别为1.0%,1.4%,2.1%,1.4%。结论:方法准确可靠,专属性强,结果稳定,重复性好,可有效控制制剂质量。     

银杏叶中萜类内酯的稳定性研究

目的 以银杏叶中萜类内酯化合物的含量为指标,评估其在不同环境下的稳定性。方法 将银杏叶在酸、碱、氧化、加热及光照的加速降解条件下放置后,采用HPLC法测定银杏叶中银杏内酯A、B、C和白果内酯共4种萜类内酯的含量。色谱条件:费罗门C18分析柱(4.6 mm × 150 mm,5 μm);甲醇-水(30 ∶ 70)为流动相;漂移管温度:40 ℃ ;氮气压强3.4 bar。结果 银杏内酯A、B、C和白果内酯分别在0.995～24.875 μg、0.568～14.200 μg、0.489～12.225 μg、0.495～12.375 μg范围内线性关系良好,在酸碱条件,特别是酸性条件下出现降解现象。结论 银杏叶中的萜类内酯在酸及氧化条件下稳定性稍差,储藏时需注意。     

银杏叶滴丸中萜类内酯测定方法的改进研究

目的 以银杏叶对照提取物为对照建立银杏叶滴丸中萜类内酯的定量测定方法.方法 采用HPLC-ELSD法,色谱柱为Diamonsil C18柱(150 nun×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(30∶70),体积流量0.8 mL/min,ELSD检测器,漂移管温度105℃,氮气体积流量3.0 L/min.结果 银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯分别在1 672.2～10 033.2、1 026.4～6 158.4、527.8～3 166.8、2 200.8～13 204.8 ng呈良好的对数线性关系;银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯及总萜类内酯的平均回收率分别为100.3％ (RSD 2.5％)、108.1％ (RSD 3.5％)、116.0％ (RSD 4.9％)、90.4％ (RSD0.6％)及99.3％ (RSD 1.1％).结论 本方法简单易行、可控性强、重复性好,可用于银杏叶滴丸中萜类内酯的定量测定,并为中成药中多指标成分同时测定提供了有效的思路和解决方案.     

高速逆流色谱法分离纯化银杏叶中白果内酯和银杏内酯A、B、C

目的从银杏叶中分离纯化白果内酯和银杏内酯A、B、C。方法银杏叶提取液经醋酸乙酯萃取、D-101大孔吸附树脂柱和Al2O3柱纯化后得到总内酯提取物,提取物再经两次高速逆流色谱分离制备4种内酯单体。结果25%乙醇热提取、醋酸乙酯萃取、D-101柱、pH4.0的Al2O3柱对总内酯的提纯最终使总内酯质量分数达到44.98%。经高速逆流色谱制备得到的白果内酯和银杏内酯A、B、C最高质量分数分别为98.3%、98.9%、98.8%、98.4%。结论本法简便快速、回收率高,为银杏叶中内酯单体的制备提供了一种新方法     

不同气候区银杏叶中黄酮和萜内酯含量的变化

目的 :为了比较不同气候区银杏叶中黄酮和萜内酯的含量 ,并进一步探讨影响二者含量的环境因素。方法 :采用 RP- HPL C法对样品中黄酮和萜内酯进行定量分析。结果 :不同气候区之间银杏叶中两类成分的含量存在很大差异 ,贵州高原区银杏叶中总黄酮和总内酯的含量明显高于其它地区。结论 :通过系统比较全国不同银杏分布区银杏叶中有效成分的含量 ,为提高银杏叶质量 ,优化银杏叶资源提供了理论依据     

银杏内酯A、B和白果内酯的分离与纯化

以银杏叶浸膏ＥＧｂ７６１为原料,通过预处理,制备色谱和重结晶过程,得到纯度达９８％以上的银杏内酯Ａ、Ｂ和白果内酯纯品。建立了一种较简单的分离和纯化银杏内酯Ａ、Ｂ和白果内酯的方法。     

Pharmacokinetics of bilobalide,ginkgolide A and B after administration of three different Ginkgo biloba L. preparations in humans

A sensitive LC‐ESI‐MS method with a solid‐phase extraction was established for the determination of bilobalide, ginkgolide A and ginkgolide B in human plasma; bioavailability and pharmacokinetics of three different Ginkgo biloba L. preparations have been investigated. The preparations used in the present single‐dose pharmacokinetic study were different formulations of Ginkgo biloba L. extracts (Geriaforce? tincture, new Ginkgo fresh plant extract tablets and EGb 761?) with various excipients. The analysis of Ginkgo terpene lactones was performed by LC‐MS on a Zorbax^® SB‐C18 column. The mobile phase consisted of water + 0.1% acetic acid and methanol 68/32 (v/v) to 49/51 (v/v) at a flow rate of 200 μL/min. Bilobalide, ginkgolide A and ginkgolide B were monitored using the selected‐ion monitoring (SIM) mode at m/z of 325, 453 and 423, respectively. The amounts of the active compounds (terpene lactones) in the administered products were in the low‐mg range per dose. The assay method was successfully applied to the study of the pharmacokinetics and bioavailability of bilobalide, gingkolide A and ginkgolide B in humans. The resulting maximum concentrations (median) of bilobalide, ginkgolide A and ginkgolide B in plasma after administration of the maximum daily dose of the different Ginkgo products were 3.53, 3.62, and 1.38 ng/mL respectively after administration of Geriaforce? tincture; 11.68, 7.36, and 4.18 ng/mL, respectively after taking Ginkgo fresh plant extract tablets; and 26.85, 16.44, 9.99 ng/mL, respectively after administration of EGb 761? tablets. These data are relevant to demonstrate relative bioavailabilities of different Ginkgo biloba L. preparations (Geriaforce? tincture, new Ginkgo fresh plant extract tablets and EGb 761?). Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

银杏叶的化学成分及其抗氧化活性

目的：研究银杏叶中化学成分的抗氧化活性。方法：对银杏叶提取物进行化学成分的分离鉴定，采用化学发光法，测定所得成分对邻苯三酚-鲁米诺-碳酸缓冲液体系产生的超氧阴离子（O2ˉ）的清除能力，以及对大鼠中性粒细胞（PMN）呼吸爆发的抑制作用。结果：分得9种黄酮类成分及4种萜内酯类成分，分别为：槲皮素（Ⅰ）、山柰酚（Ⅱ）、异鼠李素（Ⅲ）、木犀苹素（Ⅳ）、异银杏素（Ⅴ）、槲皮苷（Ⅵ）、芦丁（Ⅶ）、槲皮素-3-0-（2″-0．（6′″-对羟基-反式-桂皮酰）-β-D-葡萄糖）-α-L-鼠李糖苷（Ⅷ）、苜蓿草素-7—O-β-D-葡萄糖苷（Ⅸ）、银杏内酯A（Ⅹ）、银杏内酯B（Ⅺ）、银杏内酯C（Ⅻ）、白果内酯（ⅩⅢ），其中化合物Ⅸ为首次从银杏叶中分离得到。黄酮类化合物均具有不同程度的清除O2ˉ及抑制PMN呼吸爆发作用，活性对结构依赖性明显；内酯类成分不能清除自由基，仅对PMN呼吸爆发有微弱抑制作用。结论：银杏叶体外抗氧化作用的主要活性成分为黄酮类成分，内酯类成分无明显抗氧化作用。     

叶用银杏的良种选育与定向培育研究进展

银杏叶主要含黄酮类和萜内酯类等药用成分,其提取物制剂在临床上对心脑血管等疾病的治疗显示出良好效果。为获得优质高产的银杏叶原料,我国确定了高黄酮、高萜内酯、高产量的叶用银杏良种选育标准,并筛选出多个优良品种;研究了品种、性别、树龄、产地、生态环境、采收时期、叶着生部位与枝条类型等对银杏叶有效成分量的影响,以及施肥、整形修剪、密植等措施在增加银杏叶品质和产量方面的作用。今后仍需坚持对现有资源的搜集、保存、研究和良种选育工作,并在叶用银杏林的经营管理中推广生产良种化、种植规范化和基地化。     

银杏叶有效成分抗血小板聚集和清除DPPH自由基的量效关系和协同作用

目的：考察银杏叶中有效成分的抗血小板聚集、清除DPPH自由基的量效关系和协同作用。方法：分别采用抗血小板聚集实验和DPPH自由基清除实验研究量效关系和协同作用。首先,考察银杏内酯PAF诱导的家兔血小板聚集的抑制作用。然后,考察银杏黄酮对DPPH自由基清除作用。最后,考察有效成分之间的协同作用。结果：得到银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C和白果内酯抗血小板聚集的量效关系图,槲皮素、山柰酚和异鼠李素清除DPPH自由基的量效关系图和有效成分之间相互作用等效图。结论：银杏内酯抗血小板聚集具有量效关系,且银杏内酯A和银杏内酯B有协同作用;银杏黄酮清除DPPH自由基具有量效关系,且槲皮素和异鼠李素具有协同作用。     

银杏叶提取物中酚酸的含量测定及去除方法考察

目的:建立银杏叶提取物中银杏酚酸含量测定方法,并考察其去除方法.方法:运用HPLC测定银杏酚酸的含量;以槲皮素为对照品,HPLC测定总黄酮醇苷含量,考察银杏酚酸的去除方法.结果:用吸附剂及离子交换树脂合用法去除银杏酚酸效果较好,银杏叶提取物处理后银杏酚酸含量为2.77 μg·g-1.结论:该研究得到的银杏叶提取物中酚酸含量符合国际标准要求,且其去除方法不影响银杏总黄酮含量.     

Evaluation of Ginkgo biloba extract as an activator of human glucocorticoid receptor

Ethnopharmacological relevance

Ginkgo biloba, which is one of the most frequently used herbal medicines, is commonly used in the management of several conditions, including memory impairment. Previously, it was reported to decrease the expression of peripheral benzodiazepine receptor and the biosynthesis of glucocorticoids, thereby regulating glucocorticoid levels. However, it is not known whether Ginkgo biloba extract regulates the function of the glucocorticoid receptor.

Aim of the study

We determined whether Ginkgo biloba extract and several of its chemical constituents affect the activity of human glucocorticoid receptor (hGR).

Materials and methods

A hGR-dependent reporter gene assay was conducted in HepG2 human hepatocellular carcinoma cells and hGR target gene expression assays were performed in primary cultures of human hepatocytes.

Results

Multiple lots and concentrations of the extract and several of its chemical constituents (ginkgolide A, ginkgolide B, ginkgolide C, ginkgolide J, and bilobalide) did not increase hGR activity, as assessed by a cell-based luciferase reporter gene assay. The extract did not influence the expression of hGR target genes, including tyrosine aminotransferase (hTAT), constitutive androstane receptor (hCAR), or pregnane X receptor (hPXR), in primary cultures of human hepatocytes. Moreover, hGR antagonism by mifepristone (also known as RU486) did not attenuate the extent of induction of hCAR- and hPXR-regulated target genes CYP2B6 and CYP3A4 by Ginkgo biloba extract.

Conclusion

Ginkgo biloba extract, ginkgolide A, ginkgolide B, ginkgolide C, ginkgolide J, and bilobalide are not activators of hGR. Furthermore, the extract does not influence the hGR-hCAR or the hGR-hPXR signaling pathway in primary cultures of human hepatocytes.