伤寒杆菌耐喹诺酮类机理研究

以伤寒杆菌临床分离的喹诺酮类敏感株 S2 75与其诱导耐药株 RG1 与 RG2 ,对有关伤寒杆菌耐喹诺酮类机制进行了研究。结果发现与伤寒杆菌 S2 75相比较 ,RG1 与 RG2 对喹诺酮类、四环素、氯霉素敏感性明显降低 ,对头孢唑林 ,亚胺培南敏感性有所增加。喹诺酮类对 DNA旋转酶活性 5 0 %抑制剂量 ,RG1 与RG2 较 S2 75呈 3～ 8倍增加 ,S2 75与 RG1 、RG2 旋转酶亚单位交叉重建及 DNA旋转酶 A亚单位基因 (gyr A)喹诺酮耐药决定区 PCR- RFL P分析表明 A亚单位变异为耐药原因之一。细菌对氧氟沙星聚积测定 ,RG1 与RG2 分别为 S2 75之 1/ 2与 1/ 8,经 CCCP处理后 ,分别上升为 S2 75原水平与 S2 75之 1/ 2水平。外膜蛋白分析示 RG2 5 5 k D蛋白带消失 ,同时伴生化反应改变。表明伤寒杆菌耐喹诺酮类机制存在 DNA旋转酶变异 ,药物主动外运及外膜通透性改变。     

大肠杆菌DNA旋转酶的分离及喹诺酮类药物对其抑制作用

应用溶菌酶溶菌、硫酸铵沉淀蛋白质及新生霉素琼脂糖ＣＬ－６Ｂ相结合的方法，成功地从大肠杆菌ＫＬ－１６分离到ＤＮＡ旋转酶的Ａ、Ｂ亚单位。单独的Ａ、Ｂ亚单位均无ＤＮＡ旋转酶活性，以Ａ、Ｂ亚单位重组的酶能将松弛的质粒（ｐＢＲ３２２）ＤＮＡ转变为超旋型。各种喹诺酮类药物均对其活性具有抑制作用。萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星、环丙沙星及ＤＵ－６８５９抑制该酶活性６０％所需浓度（ＩＣ＿（５０））分别为６７．４９、１．８８４、１．３７５、０．６１３、０．３６１和０．１７８μｇ／ｍｅ。各药物ＩＣ５０与其最低抑菌浓度（ＭＩＣ）平行。     

应用PCR—直接测序法测定结核分支杆菌rpsL基因突变的研究

目的：了解我国结核分支杆菌耐链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ,ＳＭ）分离株ｒｐｓＬ基因突变情况,建立快速检测结核分支杆菌耐药基因型的分子药敏试验方法。方法：通过聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）－单链构象多态性（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＳＳＣＰ）、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＦｒａｇｍｅｎｔＬｅｎｇｔｈＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ－直接测序法（ＤｉｒｅｃｔＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ,ＤＳ）分析３８株结核分支杆菌耐ＳＭ分离株的ｒｐｓＬ基因。结果３８株耐ＳＭ分离株中,２５株ＳＳＣＰ异常、不被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析４３位密码子ＡＡＧ→ＡＧＧ突变;１株ＳＳＣＰ异常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析３３位密码子ＧＴＡ→ＡＴＡ突变;１２株ＳＳＣＰ正常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析未见异常;未发现８８位密码子突变。结论：大多数结核分支杆菌耐ＳＭ是由于其ｒｐｓＬ基因４３位密码子突变所致,采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＤＳ方法可快速测定部分结核分支杆菌ＳＭ耐药基因型。     

细菌DNA促旋酶和拓扑异构酶IV基因突变与其喹诺酮耐药性的相关性

介绍了喹诺酮类药物在细菌细胞中的作用靶位－Ⅱ型拓扑构酶（ＤＮＡ促旋酶和拓扑异构酶ＩＶ）的组成及其在细菌细胞生长过程中的作用，介绍了测定ＤＮＡ促旋酶基因（ｇｖＡ，ｇｙｒＢ）和拓扑异构酶ＩＶ基因（ｐａｒＣ，ｐａｒＥ）点突变的常用方法及分析ｇｙｒＡ，ｇｙｒＢ，ｐａｒＣ和ｐａｒＥ突变与细菌喹诺酮药性的相关性的常用方法，根据近年来的研究成果，以金黄色葡萄球菌，肺炎链球菌和大肠埃希氏菌，淋病奈瑟氏球菌为代表，     

耐甲氧西林金葡球菌对环丙沙星摄取的研究

１１株耐甲氧西林金葡球菌（ＭＲＳＡ）对１４种抗菌药物的敏感度进行了测定，除２株ＭＲＳＡ对环丙沙星敏感外，其他９株ＭＲＳＡ均对环丙沙星耐药，最低抑菌浓度（ＭＩＣ）≥１６ｍｇ／Ｌ。此组耐药菌株对其他受试的氟喹诺酮类药物也呈交叉耐药。ＭＲＳＡ对环丙沙星的摄取在２～５ｍｉｎ内达到稳定态。１９９０年以前的ＭＲＳＡ菌株对环丙沙星的摄取几乎不受氰氯苯腙（ＣＣＣＰ）影响；而１９９０年以后的菌株对环丙沙星的摄取量大多受ＣＣＣＰ影响，ＣＣＣＰ（１０ｍｇ／Ｌ）可增加ＭＲＳＡ对环丙沙星的摄取，为不加ＣＣＣＰ时的１．５３倍。此结果提示能量依赖性流出系统的改变与ＭＲＳＡ对氟喹诺酮耐药有关。诱导耐药株ＭＲＳＡ８７－９０Ｒ对环丙沙星的摄取量较诱导前（ＭＲＳＡ８７－９０）明显为少，但两者对药物的摄取均不受ＣＣＣＰ影响。     

结核分枝杆菌katG和inhA基因突变的研究

为了解结核分枝杆菌耐异烟肼（ＩＮＨ）分离株ｋａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列的突变情况，探讨其在ＩＮＨ耐药性中的可能作用。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＰＣＲ－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法对６２株结核分枝杆菌临床分离株的ｋａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列进行分析。ＰＣＲ分析结果显示：ｋａｔＧ基因和ｉｎｈＡ调节序列的敏感性为１～１０ｐｇＤＮＡ；其引物ＰＣＲ扩增都具有较高的特异性。以Ｈ３７Ｒｖ标准株为对照，１３株敏感株中，１２株ｋａｔＧ基因扩增产物ＳＳＣＰ泳动正常，１株ｋａｔＧ异常；２４株耐非ＩＮＨ抗结核药物株中，８株ｋａｔＧＳＳＣＰ异常；上述２７株的ｉｎｈＡ调节序列ＳＳＣＰ均泳动正常。２５株耐ＩＮＨ株中，３株ｋａｔＧ基因ＰＣＲ扩增阴性，２２株ｋａｔＧ扩增阳性，其中１６株ＳＳＣＰ泳动异常；４株ｉｎｈＡ调节序列ＳＳＣＰ泳动异常，其ｋａｔＧ基因ＳＳＣＰ也异常。结果表明，某些结核分枝杆菌ＩＮＨ耐药性可能是由于其ｋａｔＧ基因完全缺失、ｋａｔＧ基因或ｉｎｈＡ调节序列突变所致，但某些菌株也可能与其无关，是其它耐药基因所致或存在多种机制，尚需进一步探讨。     

应用喹诺酮类抗菌药应注意哪些问题？

应用喹诺酮类抗菌药应注意哪些问题？喹诺酮类抗菌药如氟哌酸、环丙沙星、依诺沙星等是目前临床应用最多的抗菌药物之一。临床应用本类药应注意下列事项：１．耐药以前曾认为喹诺酮类不易产生耐药．近年报道耐药出现率意外地高（约２０％）机制为ＤＮＡ施转酶变异和菌体通...     

6例河南株HGV NS5基因变异的研究

目的：探讨河南省庚型肝炎病毒基因的变异特征。方法：利用逆转录巢式聚合酶链反应（ＲＴＮｅｓｔＰＣＲ） 扩增ＨＧＶＮＳ５ 区序列;将ＰＣＲ扩增产物克隆入Ｔ载体,进行测序和分析。结果：河南株ＨＧＶＮＳ５核酸和氨基酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ 中ＨＧＶ 对应位置序列的同源性分别为８９．０％ ～９８．４％ 和９５．０％ ～９８．４％ ;河南株存在本地区的独特变异点（２３ 位Ａｌｇ→Ｇｌｙ,１１９ 位Ｐｈｅ→Ｌｅｕ ,１５３ 位Ａｓｐ→Ｇｌｕ） 。结论：ＨＧＶＮＳ５ 区基因相当保守,是ＰＣＲ方法检测ＨＧＶ的适宜扩增区段;推测这三个变异点可能是河南株ＨＧＶ 进化标志。     

1992年上海地区细菌耐药性监测

本文报道１９９２年上海地区１３所医院９７１０株临床分离菌对１９种抗菌药物的耐药性监测结果。其中革兰氏阳性菌２５７２株（２６．５％），革兰氏阴性杆菌７１３８株（７３．５％），以大肠杆菌、绿脓假单胞菌和凝固酶阴性葡萄球菌为多见。甲氧西林耐药葡萄球菌（ＭＲＳＡ和ＭＲＳＥ）约占６０％。万古霉素对革兰氏阳性球菌仍有强大抗菌作用，耐药菌株出现在少数情况。伤寒及其他沙门菌属对氯霉素、氨芋西林和复方新诺明仍显示敏感，对喹诺酮类高度敏感，耐药率＜５％，志贺菌属对多数常用抗生素耐药，但对喹诺酮类显示敬感，尤其对话氟沙星耐药率仅为２％。几年来，多数肠杆菌科细菌和绿脓假单胞菌对哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星的耐药率变化不大，对第三代头孢菌素和喹诺酮类耐药率有所增高，约１０～２０％。耐五种以上抗菌药的多重耐药株在某些病房呈相对集中趋势，并具有相同的耐药谱，提示可能有编码相同耐药性质粒的菌株在医院内流行和院内感染的存在。     

霍乱弧菌对喹诺酮耐药性中，与靶基因突变相关的主动外排的作用

喹诺酮是治疗由霍乱弧菌引起的霍乱的可选药物之一。最近 ,Ｂａｒａｎｗａｌ等研究证明除了靶基因ｇｙｒＡ和ｇａｒＣ上的突变外 ,临床分离霍乱弧菌属中 ,质子动力依赖型外排与喹诺酮的耐药性有关。ＭＩＣ显示不同菌株对氟喹诺酮的敏感性不同。基于ＭＩＣ ,菌株ＡＳ6 0 0 ,ＡＳ198,ＡＳ2 5 5 ,ＡＳ4 0 4 ,ＡＳ6 2 7,ＡＳ5 75 ,ＡＳ73,ＡＳ4 80和ＡＳ15 0被定为第 1组 ;菌株ＡＳ6 2 3,ＡＳ2 32 ,ＡＳ385 ,ＡＳ5 2 9和ＡＭ10 7被定为第 2组 ;菌株ＡＭ 5 4,ＡＳ2 8和ＡＳ12 0被定位第 3组。在 ｇｙｒＢ或 ｐａｒＥ中上述菌株均无突变。仅 1株Ａ…     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

槲皮素代谢产物定性检出条件研究

目的:研究给予大鼠槲皮素后血浆中代谢产物的定性检出条件。方法:给予大鼠槲皮素单体(100mg.kg-1)后腹腔静脉取血,血浆样品经2mol.L-1盐酸(甲醇-水溶液)水解,采用高效液相色谱法对血浆样品中代谢产物进行定性分析。结果:大鼠给药后3h内取血、血浆样品经盐酸水解处理4h,可稳定检测槲皮素和异鼠李素,样品在—20℃条件下贮存稳定。结论:血浆样品采集时间、盐酸水解时间及贮存方式等不同均可影响代谢产物的有效检出。     

甲泼尼龙佐治毛细支气管炎疗效观察

目的探讨甲泼尼龙与布地奈德治疗毛细支气管炎的疗效。方法将182例毛细支气管炎患儿随机分成三组,三组均采用综合治疗,A组62例用甲泼尼龙静脉滴注,B组60例雾化吸入布地奈德,C组60例用静滴氢化可的松,观察三组喘憋、哮鸣音消失和住院时间。结果A组喘憋、哮鸣音消失时间及住院时间均比B,C组缩短（P〈0.05）。结论甲泼尼龙静滴治疗毛细支气管炎有效、安全、方便,明显加快治愈过程,优于布地奈德与氢化可的松。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

大蒜提取物抗肿瘤作用研究进展

癌是严重威胁人类生命和健康的恶性肿瘤,中药大蒜含有多种抗癌活性成分,其抗癌、防癌作用已被国内外大量实验研究结果证实。本文就大蒜提取物的抗癌、防癌作用及在这方面的研究进展作一综述。     

构建条形码信息追溯系统对手术器械消毒的管理促进作用分析

目的：探讨构建条形码信息追溯系统对手术器械消毒的管理促进作用,以期为消毒管理提供参考。方法对我院16800件手术器械的消毒使用构建条形码信息追溯系统进行管理,对比实施管理前后效果,分析构建条形码信息追溯系统对于手术器械消毒的管理促进作用。结果构建条形码信息追溯系统之后,手术器械消毒的管理情况明显得到提升,差异有统计学意义（P＜0.05）。构建条形码信息追溯系统前后效果分析实施之后,促进效果显著上升,差异有统计学意义。构建条形码信息追溯系统之后,质量追溯时间明显得到提升,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论构建条形码信息追溯系统之后能够有效提升相关的工作效率,同时准确达到对手术器械的质量追溯,确保手术患者的安全。     

老年人急性肺栓塞29例的临床分析

目的探讨老年人急性肺栓塞的临床特征,分析漏、误诊的原因及预防措施。方法回顾性分析并比较山东省枣庄枣矿集团中心医院29例老年人肺栓塞的病史、临床表现、放射学表现和合并的疾病。结果29例肺栓塞中均有不同性质的胸闷、气促、呼吸困难。有9例误诊,早期误诊率达31%,3例为漏诊,漏诊率为10.3%,死亡13例,死亡率达44.8%,15例好转,无变化1例。结论老年人肺栓塞临床表现多样而无特征性,极易漏诊和误诊,临床医师应提高对肺栓塞的认识,降低漏、误诊率,做到早期诊断和及时治疗。