PVA固定化细菌ZG-4株生产L-苹果酸的研究

从60余份土样中筛选得到一株富马酸酶活力较高的细菌ZG－4株，以改性PVA为载体，制得固定化细胞，其较佳转化条件：基质为1mol/L Na2Fu，转化液PH7．0，转化温度40度，固定化细胞经质量浓度为0．4％的胆酸或0．06％的TPC预处理，可有效抑制琥珀酸副产物的生成，添加质量浓度为0．1％没食子单宁，可使富马酸酶比活力达1．95mmol.h^-1g^-1，同时比较了固定化细胞与游离细胞的富马酸酶特性。     

乳化法制备两歧双歧杆菌微胶囊

以两歧双歧杆菌BB01和BB28为试验菌株,活茵数及包埋产率为指标,研究了海藻酸钠浓度、CaCI：浓度、乳化时间及固定化时间对乳化法制备两歧双歧杆菌微胶囊的影响．结果表明：当两歧双歧杆菌BB01微胶囊制备的条件分别为海藻酸钠浓度2％、CaCl2浓度1％、乳化时间10min、固定化时间15min时,对应的活菌数分别为4．9×10^9cfu／mL、3．06×10^9cfu／mL、2．47×10^9cfu／mL和4．37×10^9cfu／mL,包埋产率分别为80％、56．7％、40．9％和54．1％;当两歧双歧杆菌BB28微胶囊制备的条件分别为海藻酸钠浓度2．5oA、CaCl。浓度1％、乳化时间15min、固定化时间15min时,对应的活菌数分别为4．0×10^9cfu／mL、41×10^9cfu／mL、1．59×10^9cfu／mL和5．55×10^9cfu／mL,包埋产率分别为80％、92％、87％和76．1％．     

吸附交联法和包埋法固定化混合酶研究

对从自然界分离得到的Microbacterium sp．OU01进行发酵,制得粗酶液（壳聚糖酶和伊肛氨基葡萄糖苷酶混合液）,采用吸附交联法及包埋法对其进行固定,研究其固定化的最优条件和固定化酶的酶学性质。结果表明,游离混合酶液的最佳PH为5．6,最适反应温度为50℃。吸附交联法固定化酶的最佳条件为：戊二醛体积分数5．0％,加酶量15mL（49．51U／mL）,固定化时间6h。该条件下制得的固定化酶的最适pH为4．5,最适反应温度为60℃。包埋法固定化酶的最佳条件为：海藻酸钠质量浓度10g／L,CaCl。质量浓度15g／L,加酶量为1mL（50．35U／mL）／5mL质量浓度10g／L海藻酸钠,固定化时间20min。该条件下制得的固定化酶的最适PH为5．0,最适反应温度为50℃。固定化酶酶解壳聚糖所得产物中含D-氨基葡萄糖,说明粗酶液中的壳聚糖酶和外切-β-D-氨基葡萄糖苷酶被同时固定。通过对游离酶和固定化酶稳定性的研究,表明吸附交联固定化酶更适于工业化应用生产D-氨基葡萄糖。     

重铬酸钾改性煤基活性炭催化合成环己酮缩1，2-丙二醇缩酮

以环己酮和1，2-丙二醇为原料，重铬酸钾改性煤基活性炭为催化剂催化合成了环己酮1，2-丙二醇缩酮．并得到了较佳合成条件，环己酮为0．05mol，n（环己酮）：n（1，2-丙二醇）=1：2．0，催化剂用量为总反应物质量的2．9％（环己酮质量的7％），8．0mL环己烷作分水剂，反应时间为4．0h，产率为92．7％．结果表明，该催化剂具有较高的催化活性．     

混合酶法制备高含量可溶性糖南瓜粉

采用混合酶水解南瓜中的淀粉．利用L9（3^4）正交实验优化了酶解工艺,确定的最佳工艺条件为：添加0．04％果胶酶、0．5％α-淀粉酶和1．0％的糖化酶;混合酶作用温度50℃,酶处理时间2h,摇床摇速120r／min,酶解后南瓜浆中的可溶性糖为9．37％     

硫酸盐竹浆高温高压H2O2漂白工艺的研究

通过实验研究了硫酸盐竹浆高温高压过氧化氢漂白工艺．实验结果表明：高温高压过氧化氢漂白在加入4％（质量分数，下同）的H2O2，H2O2／NaOH用量比为1.3，MgSO4用量为0．5％，Na：SiO3用量为3％，控制反应温度为120℃，保温时间为60min，氧压为1．2MPa，浆浓为10％的条件下，漂后浆料白度达79．5％ISO，卡伯值达2．5，粘度为719mL／g．     

CoTAPc-Fe3O4纳米复合固定化漆酶研究

制备了CoTAPc—Fe3O4磁性纳米复合粒子，以戊二醛为交联剂，利用该纳米复合粒子对漆酶进行了固定，研究了戊二醛浓度、固定化温度、pH值、BSA浓度、给酶量等因素对固定化漆酶活力的影响，确定了以此载体固定漆酶的最佳条件：戊二醛浓度为5％，固定化温度为0℃，pH值为7，BSA浓度为2．5mg／mL、给酶量为2mL。固定化漆酶具有较好的操作稳定性和贮存稳定性。     

纤维素酶法提取茶多糖

为了保持茶多糖的活性，采用低温水提、酶提二次结合法提取茶多糖，第一次在50℃、茶叶与水的质量比为1：15、水提取30min，多糖的提取率为2．33％，粗多糖（干重）的提取率为6．82％；过滤后，滤渣用pH4．6的柠檬酸－柠檬酸钠缓冲液加纤维素酶提取，经正交试验确定酶提最佳工艺参数为55℃、茶叶与水的质量比为1：14、酶用量2．2μL/g（以茶叶质量计），反应时间为120min，其多糖的提取率为0．64％，粗多糖（干重）的提取率为1．11％，分别占二次总提取量的21．5％和14．0％，而在相同条件下无酶提取，提取率仅为0．39％和0．56％，相对水提法，酶法的多糖提取率分别增加63．3％和98．9％，多糖总提取率达2．97％，粗多糖（干重）的总提取率为7．93％，采用酶法提取的茶多糖具有较强抑制α-淀粉酶活力的能力。     

肺泡巨噬细胞在低氧诱导肺动脉内皮细胞向平滑肌样细胞转分化中的作用

研究低氧条件下肺动脉内皮细胞（PAEC）向平滑肌样细胞的转分化及肺泡巨噬细胞（PAM）在此转分化过程中的作用。将经免疫磁珠法（用血小板-内皮细胞粘附分子PECAM-1做免疫分选标记）纯化后的原代肺动脉内皮细胞分别在常氧（含21％O2、5％CO2和74％N2）和低氧（含1％O2、5％CO2,94％N2）条件下培养1、4、7d,并在低氧条件下用肺泡巨噬细胞条件培养基与肺动脉内皮细胞共培养,用免疫组化法检测平滑肌细胞标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SM-actin）的表达,结合形态学观察从而判定有无平滑肌样细胞的转分化。结果显示：随着低氧培养时间的延长,肺动脉内皮细胞转分化为平滑肌样细胞的比率逐渐增加（P〈0．05）;与肺泡巨噬细胞条件培养基共培养后,平滑肌样细胞的转化率明显升高（P〈0．05）。肺动脉内皮细胞中存在具有转分化为平滑肌样细胞潜能的细胞;低氧可明显促进转分化,肺泡巨噬细胞在此转分化过程中起重要作用。     

高锰酸钾法去除染料的影响因素及其工艺条件

利用高锰酸钾对4种染料进行了处理。以染料的去除率为监测指标，考察了影响染料去除率的因素——反应时间、pH以及高锰酸钾加入量的影响。找出了处理这4种染料的最佳工艺条件。反应的最佳条件分别为：直接桃红12B，反应时间为5min，pH为5．7，高锰酸钾加入量为0．5mL；直接耐酸大红4BS，反应时间为5min，pH为1．0，高锰酸钾加入量为1．2mL；直接耐晒翠蓝GL．反应时间为5min，pH为1，5，高锰酸钾加入量为1．0mL；活性翠蓝K—GL，反应时间为7min，DH为0．5，高锰酸钾加入量为2．0mL。在最佳工艺条件下，4种染料的去除率均在90％以上。     

链霉菌TD-1菌株抑菌活性物质发酵条件的优化

利用正交设计法及均匀设计法对链霉菌TD-1菌株发酵条件进行了优化,研究不同发酵因子对链霉菌TD-1产抑菌活性物质的影响.结果表明,发酵培养基中影响抑菌活性大小的主要因素为葡萄糖、黄豆粉、硫酸亚铁、磷酸氢二钾及硝酸钾;抑菌活性物质较佳发酵条件为90 mL/250mL三角瓶,接种量的体积分数为0.06,发酵周期8 d,初始pH值为7.15.在此条件下,最终抑菌效率与原发酵液相比发酵液对串珠镰刀菌抑菌活性提高了53.38%.     

蛋白质芯片微陈列条件优化及在疾病诊断上的应用

以PSA为模式抗体,对固定在氨基玻片表面时的甘油浓度、固定抗体的浓度、清洗缓冲溶液的选择等条件进行了优化。结果表明:含有30%(体积百分比)甘油的蛋白质溶液显示出灵敏度高、重现性好的微陈列点位;固定在氨基玻片表面的抗体的浓度较高时(2 mg.mL-1)可得荧光强度高的比较均匀的点位;依次用DI H2O、PBST、DI H2O洗涤氨基玻片表面时背景干扰少。按优化的蛋白质微陈列条件制备了芯片并尝试应用于对肿瘤标志物蛋白质PSA、AFP、CEA和CA15-3的检测。     

卡拉胶-聚乙烯醇固定化酿酒酵母条件研究

利用卡拉胶聚乙烯醇混合胶体固定化酿酒酵母可以制备出机械强度高,传质效果好的凝胶颗粒,其最佳的固定化条件为:聚乙烯醇浓度8%,卡拉胶浓度0.5%,菌体添加量0.1 g/mL,固定化时间24 h.固定化小球能连续反应60 h以上,腺苷三磷酸产量达297.1 mg/L,可用作腺苷三磷酸再生体系.     

海参肠道中高产胞外多糖酵母的筛选及发酵条件

从大连海域的海参肠道中筛选得到一株产胞外多糖较高的酵母菌HS-J9,经形态学和26SrDNA序列分析,初步鉴定为季也蒙假丝酵母(Meyerozyma guilliermondii),GenBank检索号为KF668241。采用苯酚-硫酸法和响应面法对该高产菌株进行胞外多糖测定及发酵条件优化。通过单因素试验确定了pH、接菌量和发酵时间3个主要因素对发酵产糖量的影响,根据Box-Behnken中心组合设计原理确定显著性因子的最佳水平,并以胞外多糖产量为响应值进行回归分析。结果表明,当pH为6.6、接菌量4%、发酵时间41.3h时,HS-J9的胞外产糖量最大,为0.762 mg/mL,比优化前的产胞外多糖量(0.616mg/mL)提高了23.67%。     

复合前驱体溶胶—凝胶法固定木瓜蛋白酶条件的优化

以正硅酸甲酯(TMOS)和甲基三甲氧基硅烷(MTMS)为复合前驱体,以聚乙二醇400(PEG400)为稳定剂,采用溶胶—凝胶法固定木瓜蛋白酶.利用单因素和正交试验设计,得到最佳的固定化条件为:MTMS与TMOS的体积比4∶1,水与硅源的体积比(R值)0.3,用5mL前驱体水解液制备成凝胶,0.1mol/L盐酸溶液的用量210L,PEG400的用量为240L,给酶量150L.在优化条件下制得的固定化酶包封率为84.1%,活力回收率为84.4%.     

响应面法优化茅岩莓茶黄酮的提取条件

为探讨茅岩莓茶中黄酮的最佳提取工艺,以茅岩莓茶为原料,采用单因素和响应面结合的方法,通过乙醇溶液浸提茅岩莓茶黄酮,对其提取条件进行优化。结果表明,最佳提取条件为：乙醇体积分数为80%,液料比为25 mL/g,水浴温度为85 ℃,水浴时间为40 min;此时,黄酮得率为162.72 mg/g,与模型所给预测值接近,说明优化方法合理可行。     

不同载体固定化产脂肪酶发酵性丝孢酵母的比较

选择活性炭、硅胶G、大孔树脂DM-130为载体,采用吸附培养的方法将发酵性丝孢酵母细胞固定化,确定了固定化的适宜条件。通过比较适宜条件下固定化细胞的脂肪酶活力,筛选出固定化效果较好的吸附载体为活性炭。结果表明,在培养基中添加10g/L 40目活性炭,接入体积分数为10%的液体种子,于30℃、160r/min吸附培养48h的固定化效果较好,获得的固定化酶活力可达110.32U/g。     

以糖蜜酸水解液为原料制备PHB的工艺优化

以制糖工业的副产品糖蜜为原料,通过酸水解法制备乙酰丙酸（LA）,再用富含LA的糖蜜水解液发酵生产生物可降解塑料聚羟基丁酸酯（PHB）。本文采用单因素和响应面方法对糖蜜酸水解条件进行优化,得到最优反应条件为液固比1.24 mL/g、反应温度146 ℃、反应时间1 h。该反应条件下LA的最高产率达到44.09%,大大优于未优化时LA的产率（17.39%）,也优于已报道的响应面法优化硫酸催化甘蔗糖蜜制备LA的产率（30.11%）。随后利用该水解液培养杀虫贪铜菌（Cupriavidus necator）,48 h后生物量达到2.99 g/L,菌体中PHB含量达到细胞干重的14.85%。结果表明:通过优化水解反应条件能够明显提高糖蜜酸水解制备LA的产率;富含LA的糖蜜酸水解液直接用于PHB的生产具备可行性。     

适合膜片钳电流测定的金铁锁原生质体制备技术

以金铁锁愈伤组织为材料,利用传统酶解法和快速酶解法,对金铁锁原生质体的制备分离技术进行比较和研究,记录全细胞电流,获得高质量的原生质体材料.结果表明,采用传统酶解法,2％纤维素酶R-10+1％果胶酶Y-23的混合酶液酶解7h,可以获得大量原生质体;采用快速酶解法,1.2％纤维素酶RS+0.5％果胶酶Y-23的混合酶液酶...