健脾益气中药对脾虚大鼠肝组织线粒体功能的影响

目的 观察黄芪四君子汤和四君子汤对脾虚大鼠肝组织线粒体琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶活性的影响,从能量代谢角度揭示脾虚证的发生机理,阐明健脾益气中药的作用机制.方法 取SD大鼠40只,随机分为4组,即空白对照组、脾虚模型组、四君子汤组(10.5 g/kg)和黄芪四君子汤组(18 g/kg),每组10只,空白对照组与脾虚模型组给予等体积的生理盐水,每日1次,连续4周.除空白对照组外,其余各组大鼠以破气苦降加饥饱失常的方法建立大鼠脾虚模型,每日灌饲小承气汤煎剂60 g/kg,隔日半量进食,自由饮水,造模15 d后,开始灌胃给予相应的药物.观察各组大鼠的一般情况,以及肝组织线粒体琥珀酸脱氢酶和细胞色素氧化酶活性的变化情况.结果 与空白对照组比较,脾虚模型组大鼠肝组织线粒体琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶活性均明显下降(P<0.01);黄芪四君子汤和四君子汤均可显著提高脾虚大鼠肝组织线粒体琥珀酸脱氢酶和细胞色素氧化酶的活性(P<0.01),且黄芪四君子汤的疗效优于四君子汤.结论 健脾益气中药能够明显地改善脾虚大鼠肝组织线粒体的损伤和能量代谢的障碍,黄芪四君子汤的疗效优于四君子汤.     

扶正解毒汤防治硫酸镍致大鼠心肌线粒体酶毒性的实验研究

腹腔注射(ip)硫酸镍,可抑制大鼠心肌线粒体酶活性。本文灌胃(PO)扶正解毒汤,检测大鼠心肌线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、细胞色素C和aa3活性的变化,观察扶正解毒汤的疗效。结果表明：扶正解毒汤可提高硫酸镍抑制的大鼠心肌线粒体酶系的活性,并呈剂量一效应关系。     

心复康口服液对大鼠实验心衰模型心肌细胞Ca~(2+)-ATPase及琥珀酸脱氢酶活性的影响

目的:为了探讨心复康口服液治疗心衰的机制。方法:通过腹腔注射ADR复制实验大鼠心衰模型,以心肌细胞Ca~(2+)-ATPase及琥珀酸脱氢酶活性为观察指标,研究中药心复康口服液对大鼠实验心衰模型的影响。结果ADR模型组Ca~(2+)-ATPase活性为1.46±0.756μmolpi/mgprotein·h,与正常对照组(3.16±0.979μmolpi/mgprotein.h)比较有极显著性差异(p<0.01);心复康治疗组明显提高实验心衰模型大鼠心肌细胞Ca~(2+)-ATPase活性(2.68±1.067μmolpi/mgpmtein·h),与ADR模型组比较有显著性差异(p<0.05),接近正常对照组。同时心肌细胞琥珀酸脱氢酶活性电镜细胞化学观察发现ADR模型组在受损的线粒体嵴部和内膜上,可见SDH活性反应产物大为减少,有的已全部灭活或仅有少量的活性产物沉积。心复康治疗组SDH活性反应产物主要分布在线粒体嵴部和内膜上,呈现出强弱交替的现象,但其活性已有所减弱,部分线粒体内仅有少量的SDH活性产物沉积。结论:提示心复康口服液可显著改善ADR实验心衰模型大鼠心肌细胞Ca~(2+)-ATPase及琥珀酸脱氢酶活性。     

香砂六君子汤对脾气虚证浅表性胃炎大鼠线粒体能量代谢影响研究

目的:探讨香砂六君子汤对脾气虚证浅表性胃炎模型大鼠体内的琥珀酸脱氢酶活性与细胞色素氧化酶C含量的作用。方法:采用劳倦过度与饥饱失常加强酸刺激等复合因素塑造脾气虚证模型,在此基础上运用强酸刺激加感染幽门螺旋杆菌法复制大鼠脾虚浅表性胃炎模型,观察香砂六君子汤对脾气虚证浅表性胃炎大鼠胃窦组织琥珀酸脱氢酶活性和细胞色素氧化酶C含量的影响。结果:模型组大鼠胃窦细胞琥珀酸脱氢酶活性显著低于正常组和治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组琥珀酸脱氢酶活性显著高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05); 正常组大鼠胃窦组织细胞色素氧化酶C含量明显高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组胃窦细胞色素氧化酶C含量高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:香砂六君子汤治疗脾气虚证浅表性胃炎的效果确切,作用机制可能与其提高胃窦线粒体琥珀酸脱氢酶活性与细胞色素氧化酶C含量相关。     

小续命汤有效成分组对脑缺血/再灌注大鼠恢复早期脑线粒体的保护作用研究

观察小续命汤有效成分组对脑缺血/再灌注大鼠恢复早期脑线粒体的作用,研究其对脑缺血/再灌注大鼠恢复早期的神经保护作用机制。采取插线法制备大鼠大脑中动脉阻塞脑缺血模型,2 h后再灌注。应用Zea-Longa's级标准评分法评价动物脑缺血程度,将模型成功大鼠随机分为模型组、小续命汤有效成分低、中、高剂量组和阳性药金纳多组,以假手术大鼠作为对照组。于给药5 d后梯度离心提取大鼠脑组织缺血周边区线粒体,通过Clark氧电极法检测线粒体呼吸功能,荧光探针法检测线粒体内ROS含量及线粒体膜电位,分光光度法检测线粒体琥珀酸脱氢酶活性和脑组织ATP含量。结果显示,小续命汤有效成分组能够显著改善脑缺血再灌注大鼠恢复早期脑线粒体的呼吸功能,提高线粒体琥珀酸脱氢酶的活性,降低线粒体ROS的含量,提高脑线粒体膜电位,促进脑组织ATP的合成。提示小续命汤有效成分组能够明显减轻脑缺血再灌注早期导致的脑组织能量代谢紊乱,改善脑线粒体结构和功能损伤,说明小续命汤有效成分组对脑线粒体的保护作用可能是其发挥神经保护的作用机制之一。     

附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活性的影响

目的研究附子正丁醇、水提取物对虚寒证模型大鼠琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活性的影响。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、附子正丁醇组、附子水提物组,模型组与治疗组大鼠均予灌含生药量3.2 g/ml的造模药5ml,每天1次,连续14天,空白对照组每天灌服等量的生理盐水,分光光度数法检测大鼠肝匀浆液中的琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶活性。结果与空白对照组相比,模型对照组大鼠琥珀酸脱氢酶含量明显降低(P0.01);与模型对照组相比,附子正丁醇、水提取物组琥珀酸脱氢酶含量明显升高(P0.01);与空白对照组相比,模型对照组大鼠乳酸脱氢酶含量明显升高(P0.05);与模型对照组相比,附子水提取物组乳酸脱氢酶含量明显降低(P0.01)。结论虚寒证模型大鼠组琥珀酸脱氢酶活性明显低于空白对照组和治疗组,乳酸脱氢酶活性明显高于空白对照组和治疗组。附子正丁醇和水提取物能提高虚寒证大鼠的琥珀酸脱氢酶活性、降低乳酸脱氢酶活性,有利于虚寒证大鼠的物质代谢的恢复,琥珀酸脱氢酶活性降低可能是造成虚寒证的原因之一,但仍需后续的研究进一步确认。     

四物合剂对顺铂肝毒性作用的实验研究

目的:观察四物合剂对化疗药物顺铂肝毒性的作用,并对其作用机制进行探讨。方法:小鼠腹腔注射顺铂,3·0mg/kg体重/日,连续7日,并灌饲四物合剂14日,观察血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、肝脏系数、肝匀浆中SOD、GSH-PX、GSH和MDA含量变化及肝线粒体中NADH脱氢酶复合体(复合体Ⅰ)和琥珀酸脱氢酶复合体(复合体Ⅱ)活性变化。结果:注射顺铂7日后小鼠肝脏中SOD和GSH-PX活性及GSH含量下降,MDA含量升高,同时给予四物合剂小鼠肝脏中SOD含量上升,GSH-PX活性及GSH含量、MDA含量均下降;顺铂小鼠肝线粒体中NADH脱氢酶复合体(复合体Ⅰ)活性升高,琥珀酸脱氢酶复合体(复合体Ⅱ)活性下降,四物合剂可减弱该反应。结论:顺铂模型小鼠肝组织细胞潜在抗氧化能力明显下降,四物合剂可改善此现象,其作用机制可能与升高机体内抗氧化酶活性、减少自由基生成有关。     

黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体氧化应激的影响

目的 研究黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠氧自由基所致肝脏线粒体损伤的保护作用，并探讨其作用机制。方法 高脂饲料喂养Wistar大鼠，建立胰岛素抵抗模型；造模成功后随机分为黄连解毒汤组、小檗碱组、硫辛酸组和模型组，各组以相应的药物干预6周；测定肝脏线粒体ATP酶、琥珀酸脱氢酶（SDH）、细胞色素C氧化酶（CCO）活性及ATP含量以观察线粒体功能及能量代谢活性；测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量以观察线粒体抗氧化能力。结果 黄连解毒汤能提高胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体中GSH Px、SOD、ATP酶活力，抑制MDA生成，促进能量生成代谢，增强SDH和CCO活力。结论 黄连解毒汤可以改善线粒体功能及能量代谢，增强线粒体抗氧化能力，对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体损伤有明显保护作用，其机制可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化有关。     

漏芦乙醇提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠组织学影响的研究

目的：研究漏芦乙醇提取物对D-半乳糖致衰老小鼠组织学的影响。方法：D-半乳糖制作小鼠衰老模型，组织化学方法观察小鼠脑组织琥珀酸脱氢酶（SDH）、乳酸脱氢酶（LDH）、脂褐素（LPF）的变化，同步观察电子显微镜下的组织学变化。结果：漏芦乙醇提取物对D-半乳糖所致的衰老小鼠的大脑皮质神经元的SDH活性下降、LDH活性升高及LPF含量增多有明显的抑制作用，对线粒体等细胞器的变性具有改善作用。结论：漏芦乙醇提取物对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用。     

四君子汤抗脾虚动物胃肠细胞损伤的机理研究

对食醋致脾虚大鼠四君子汤具有升高胃肠中性粘液的趋势，能促进肠上皮细胞更新，提高胃肠细胞线粒体琥珀酸脱氢酶和细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性，降低血清ＬＰＯ含量，增强ＳＯＤ活性；对食醋致脾虚小鼠四君子汤能扩张肠系膜微动脉管径，增加毛细血管开放数，又能增加正常小鼠胃粘膜血流量；对食醋致脾虚家兔，四君子汤有升高血清胃泌素、血浆及胃液前列腺素Ｅ２的倾向。     

黄芪组分配伍对血管紧张素Ⅱ致肥大心肌细胞模型线粒体活力的影响

目的在原代培养的心肌细胞上观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及黄芪组分对心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活力的影响,旨在探讨黄芪组分（包括黄芪皂苷和黄芪多糖）对心肌细胞能量代谢的干预作用,为中药防治心衰提供实验依据。方法利用培养的乳鼠心肌细胞,根据活细胞线粒体琥珀酸脱氢酶在能量代谢过程中可使四氮唑盐（MTT）还原产生蓝紫色结晶产物for-mazan这一原理,应用比色法测定AngⅡ对培养心肌细胞能量代谢的影响和黄芪组分的干预作用。结果AngⅡ在作用24h后使formazan产物的吸光度A值（OD）显著增加,此后开始下降,至48h低于正常水平,具有显著性差异（P〈0.05）;48h黄芪干预组与正常组无显著性差异。结论黄芪皂苷和黄芪多糖可显著地拮抗AngⅡ引起的心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活力下降,从而改善心肌细胞能量代谢。     

腹针对慢阻肺呼吸肌疲劳型大鼠线粒体琥珀酸脱氢酶活性作用研究

目的:研究腹针对慢阻肺(COPD)呼吸肌疲劳型大鼠线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)活性作用机理,为进一步推广该治疗技术提供实验证据。方法:取SD大鼠30只,体重180~220g,适应性饲养1周后,按随机数字表分为对照组、模型组、腹针组各10只。采用烟熏联合气道内注射脂多糖法建立COPD大鼠模型,连续治疗30天后测定COPD大鼠膈肌线粒体悬液中SDH的活性。结果:模型组及腹针组膈肌线粒体SDH活性较空白对照组明显降低(P均0.05),腹针组大鼠膈肌线粒体SDH活性降低幅度小于模型组(P0.05)。结论:腹针可影响SDH活性,腹针对COPD作用机理与影响SDH活性有关。     

黄芪组分配伍对血管紧张素Ⅱ致肥大心肌细胞模型线粒体活力的影响

目的 在原代培养的心肌细胞上观察血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及黄芪组分对心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活力的影响,旨在探讨黄芪组分(包括黄芪皂苷和黄芪多糖)对心肌细胞能量代谢的干预作用,为中药防治心衰提供实验依据.方法 利用培养的乳鼠心肌细胞,根据活细胞线粒体琥珀酸脱氢酶在能量代谢过程中可使四氮唑盐(MTT)还原产生蓝紫色结晶产物formazan这一原理,应用比色法测定Ang Ⅱ对培养心肌细胞能量代谢的影响和黄芪组分的干预作用.结果 Ang Ⅱ在作用24 h后使formazan产物的吸光度A值(OD)显著增加,此后开始下降,至48 h低于正常水平,具有显著性差异(P＜O.05);48 h黄芪干预组与正常组无显著性差异.结论 黄芪皂苷和黄芪多糖可显著地拮抗Ang Ⅱ引起的心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活力下降,从而改善心肌细胞能量代谢.     

栀子对急性胰腺炎大鼠胰腺细胞亚细胞器的保护作用

本实验利用去氧胆酸钠胰管内注射诱发大鼠急性胰腺炎，以琥珀酸脱氢酶，酸性磷酸酶，细胞２色素Ｐ４５０分别作为线粒体，溶酶体和微粒体的标志酶，检测ＡＰ时胰腺细胞亚细胞器的功能级栀子的影响，并就组织学的变化作了同步观察。     

黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体氧化应激的影响

目的 研究黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠氧自由基所致肝脏线粒体损伤的保护作用,井探讨其作用机制.方法 高脂饲料喂养Wistar大鼠,建立胰岛素抵抗模型;造模成功后随机分为黄连解毒汤组、小檗碱组、硫辛酸组和模型组,各组以相应的药物干预6周;测定肝脏线粒体ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素C氧化酶(CCO)活性及ATP含量以观察线粒体功能及能量代谢活性;测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量以观察线粒体抗氧化能力.结果 黄连解毒汤能提高胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体中GSH-Px、SOD、ATP酶活力,抑制MDA生成,促进能量生成代谢,增强SDH和CCO活力.结论 黄连解毒汤可以改善线粒体功能及能量代谢,增强线粒体抗氧化能力,对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体损伤有明显保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化有关.     

四逆汤类方提取物对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的：探讨四逆汤类方提取物对离体培养的乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用。方法：培养的乳鼠心肌细胞经终浓度分别为1、5、25μg／mL的四逆汤类方提取物预处理，进行缺氧／复氧损伤后，比色法测定细胞内线粒体脱氢酶活性、丙二醛(MDA)含量及培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果：与对照组比较，附子、干姜配葱白提取物(EAGO)，附子、干姜配甘草提取物(EAGL)，附子、干姜配胆汁提取物(EAGB)，附子、干姜配人参提取物(EAGG)可以提高细胞内线粒体脱氢酶活性，与附子配干姜提取物(EAG)组比较无显著差异。EAGO、EAGL、EAGB、EAGG可以降低上清液中乳酸脱氢酶活性，与EAG组比较差异显著。EAGL、EAGG可以降低细胞内MDA含量，与FAG组比较差异显著。结论：四逆汤类方均可以提高缺氧／复氧损伤的乳鼠心肌细胞内线粒体脱氢酶活性，降低上清液中乳酸脱氢酶活性。四逆汤和人参四逆汤提取物有降低细胞内MDA的作用。提示四逆汤类方对缺氧／复氧损伤的心肌细胞均有保护作用。     

西红花酸对羟自由基损伤的原代心肌细胞的保护作用

目的　研究西红花酸 (crocetin)对羟自由基 (OH· )损伤的原代培养心肌细胞的保护作用。方法　培养的原代心肌细胞加入不同浓度的西红花酸后 ,用 0 .5 mm ol/ L OH·损伤原代培养的心肌细胞 ,检测细胞培养上清液中的乳酸脱氢酶 (L DH)、心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶 (MSD)的活性 ,心肌细胞线粒体膜电位 (MMP)的变化 ,并用流式细胞仪及 DNA梯度电泳检测细胞凋亡。结果　 0 .5 mm ol/ L OH·使细胞培养上清液中 L DH活性增加、MSD的活性降低、MMP降低、心肌细胞凋亡率增加。西红花酸 1.0 ,0 .1μmol/ L 明显降低培养上清液中 L DH活性、提高 MSD的活性及 MMP、降低心肌细胞凋亡率 ,与模型组比较差异显著 (P<0 .0 5 )。结论　西红花酸对OH·所致的心肌细胞损伤 (凋亡 )具有保护作用     

珍珠梅提取物抗衰老作用的研究

目的：探讨珍珠梅提取物对D-半乳糖所致衰老大鼠的保护作用。方法：60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、人参皂甙组、珍珠梅大、中、小剂量组，连续40d。用比色分析法测定大脑皮质超氧化物歧化酶(SOD)、单胺氧化酶(MAO)的活性及丙二醛(MDA)的含量，用免疫组织化学方法观察琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、脂褐素(LPF)的变化，同步观察电子显微镜下的组织学变化。结果：珍珠梅提取物可提高D-半乳糖所致大鼠脑组织SOD活性、降低MDA含量，抑制MAO活性；对衰老大鼠的大脑皮质神经元的SDH活性下降、LDH活性升高及LPF含量增多有明显的抑制作用；电子显微镜观察珍珠梅提取物可以减轻D-半乳糖导致的线粒体等超微结构的改变。结论：珍珠梅提取物可延缓D-半乳糖所致的大鼠衰老，抑制脂质过氧化物的形成，提高SOD的活性，这可能是珍珠梅抗衰老的作用机理之一。     

心肌肽素对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用

采用MTT比色法,观察不同浓度的心肌肽素对阿霉素损伤乳鼠心肌细胞活力的影响。结果表明:心肌肽素具有促进阿霉素损伤心肌细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶活力的作用,使损害的心肌细胞尽快得到修复。     

调心方对氧化损伤型类AD大鼠空间记忆能力和脑线粒体呼吸功能的影响

目的：探讨调心方对氧化损伤型类AD大鼠空间学习记忆能力，脑线粒体呼吸功能及其酶活性的影响。方法：采用二羟延胡索酸（DHF）加FeCl3-ADP左侧脑室注射，造成大鼠氧化损伤型类AD大鼠模型；Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力；Clark氧电极法测定脑线粒体呼吸功能各项指标，包括R3、R4、RCR、P／O、OPR及琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶，CytC氧化酶活性变化及调心方的作用。结果：与对照组比较，模型鼠空间学习记忆能力，脑线粒体呼吸功能和CytC氧化酶活性显著下降，调心方对模型鼠上述指标有明显改善作用。结论：调心方具有改善氧化损伤型类AD大鼠空间学习记忆障碍提高脑线粒体呼吸功能和呼吸链复合酶活性作用。可能与其对抗自由基氧化损伤作用有关。