一种消除维生素C干扰的血清尿酸检测方法

目的 利用4-羟基-2，2，6，6-四甲基-1-氧-哌啶（AAQ-2）作为维生素C（Vit C）的熄灭剂，建立双试剂终点法测定血清尿酸（UA），以消除VitC在UA测定中的干扰。方法 采用双试剂终点法测定UA。结果 方法重复性：日内相对标准差（RSD）为1．50％，1．37％，日间RSD为1．55％、1．40％；平均回收率：99．34％；本法线性可达50～1550μmol／L。结论 本方法可消除血清中高浓度VitC对UA测定的干扰，且适用于自动分析仪。     

用抗坏血酸猝灭剂消除抗坏血酸对血清胆固醇测定的干扰

目的 利用4-羟基2,2,6,6-四甲基-1-氧-哌啶（AAQ-2）作为抗坏血酸的猝灭剂,建立双试剂终点法测定血清胆固醇,以消除抗坏血酸在胆固醇测定中的干扰。方法 双试剂终点法。结果 方法重复性：日内CV1．31％、1．42％,日间CV2.17％、2．03％;平均回收率：99．70％;线性：可迭18．2mmoL／L。结论 本法可消除血清中高浓度抗坏血酸对胆固醇测定的干扰,且适用于自动分析仪。     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对，分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％，批间CV为2．94％；血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％，批间CV为2．7％；平均回收率TBil为101．1％，DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰，三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。     

改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的研究与应用

目的研究建立改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的方法，以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法采用改良试剂，测定方法的精密度、回收率、检测限、线性范围、干扰试验，以确定所建立方法的基本性能；与Doumas法比较以确定方法的可靠性与消除干扰的效果。结果样品与试剂比例为5：220μl，线性范围达140g／L。回归方程：Y=484．0＋48．06X，r=0．9993。批内CV（20次）0．24％，日间CV（20d）1．07％。回收率95．6％～103％，平均99．5％。检测限2．36g／L。血红蛋白（Hb）2．1g／L以下，胆红素（Bil）148μmol／L以下，三酰甘油（TG）aS．2mmol／L以下，葡聚糖30g／L以下干扰不显著。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关，回归方程：Y=-2．4354＋1．0374X，r=0．9882。结果间差异无统计学意义，t=0．156，P=0．877。测定溶血、高脂、黄疸、含葡聚糖标本二种方法间差异有统计学意义。结论采用改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白，能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰，提高结果准确性。     

血清铁自动分析法试剂盒的研制与评价:Nitro-PAPS直接光度法

目的 研制、评价血清铁Nitro-PAPS自动分析法试剂盒。方法 在表面活性剂存在下，用2-（5-硝基-2-吡啶偶氮）-5-[N-正丙基-N-（3-磺酸丙基）氨基]苯酚二钠（Nitro-PAPS）作显色剂双试剂两点终点法测定血清铁。结果 该方法显色络合物最大吸收波长为591nm，线性范围达85μmol／L，表观摩尔吸光数为1．11×10^5L·mol^-1，回收率为98．5％-104．1％，批内变异系数（CV）和批间变异系数分别为0．021和0．035，与原子吸收分光光度法（AAS）比较相关良好，Y=0．997X-0．223，r=0．9786，P〉0．05，224例健康人血清铁含量为（10．83—29．07）,μmol／L（±2s）。结论 用本试剂龠双试剂自动化分析法测定血清铁方法简便、灵敏可靠，适合临床应用。     

一种消除维生素C干扰的血清尿酸检测方法

目的利用4-羟基-2,2,6,6-四甲基-1-氧-哌啶(AAQ-2)作为维生素C(V itC)的熄灭剂,建立双试剂终点法测定血清尿酸(UA),以消除V it C在UA测定中的干扰。方法采用双试剂终点法测定UA。结果方法重复性:日内相对标准差(RSD)为1.50%、1.37%,日间RSD为1.55%、1.40%;平均回收率:99.34%;本法线性可达50~1 550μmol/L。结论本方法可消除血清中高浓度V it C对UA测定的干扰,且适用于自动分析仪。     

应用二点终点法消除乳糜血对血清总蛋白测定的干扰

目的　建立双缩脲法双试剂测定血清总蛋白 ,以消除乳糜血在总蛋白测定中的干扰。方法　以NaOH溶液作第一试剂 ,浓缩双缩脲试剂等其他试剂作第二试剂 ,在自动分析仪用终点法测定。结果　乳糜血在 0 .6mol/LNaOH溶液中吸光度稳定 ,线性范围为 18.75～ 15 0 g/L ,平均回收率 98.86 % ,批内变异系数 (CV)为 1.2 3%、0 .6 1% ,批间CV 1.11%、0 .6 8% ,双试剂法与标化法比较 ,r =0 .972 0 ,P <0 .0 1。结论　双试剂法可消除乳糜血在总蛋白测定中的干扰 ,且适用于自动分析仪     

应用二点终点法消除乳糜血对血清总蛋白测定的干扰

目的建立双缩脲法双试剂测定血清总蛋白,以消除乳糜血在总蛋白测定中的干扰.方法以NaOH溶液作第一试剂,浓缩双缩脲试剂等其他试剂作第二试剂,在自动分析仪用终点法测定.结果乳糜血在0.6 mol/L NaOH溶液中吸光度稳定,线性范围为18.75～150 g/L,平均回收率98.86%,批内变异系数(CV)为1.23%、0.61%,批间CV 1.11%、0.68%,双试剂法与标化法比较,r=0.972 0,P<0.01.结论双试剂法可消除乳糜血在总蛋白测定中的干扰,且适用于自动分析仪.     

试剂携带污染对血清总胆汁酸测定结果的影响及消除措施

目的消除循环酶法测定血清总胆汁酸（TBA）时试剂携带污染对结果的干扰。方法循环酶法测定20份血清标本中的TBA含量，然后分别测定总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL．C）等9个项目后再测定TBA含量。结果在测定TC、TG、HDL—C后测定TBA导致20份血清标本结果存在系统误差，分别为14．95、15．36、22．20μmol／L。3种干扰试剂组分中的TBA含量分别为1016．9、1061．2、1216．8μmol／L。结论合理安排TBA与其他检测项目的分析顺序，或设置避免试剂携带污染功能程序，用碱性清洗液冲洗试剂针，可以有效地消除TC、TG、HDL-C试剂对血清TBA测定结果的干扰。     

液体单试剂酶法测定血清碳酸氢根

目的建立一种稳定的单试剂酶法测定血清碳酸氢根（HCO3^-）。方法利用自配单试剂建立了两点法的检测方法，可满足全自动和手工测定，用Bayer 1650生化仪对本方法进行方法学评价。结果本法的线性范围可达50mmol／L，批内变异系数（CV）为2．48％，批间CV为3．24％，平均回收率102．8％，与血气分析仪（X）相关良好，Y=1．019X-0．745，r=0．9903，黄疸、脂血、溶血标本对结果几乎无影响，健康人静脉血HCO3^-浓度为21．5～32．3mmol／L。结论本法操作简便、反应特异、灵敏准确、试剂较稳定，适用临床检测。     

血清肌酐二步酶法检测新技术研究

目的探讨二步酶法测定肌酐的实验方法。方法以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ,以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)和4-氨基安替比林(4-AAP)色原物作为试剂Ⅰ,建立二步酶法测定血清肌酐。通过内空白法消除内源性肌酸和改变光谱吸收方法消除脂血、溶血、黄疸干扰。采用二步酶法测定36例患者血清肌酐,并与高效液相色谱(HPLC)法和一步酶法比较;同时测定200名健康体检者血清肌酐,以建立参考范围。结果患者组肌酐二步酶法结果[(84.2±26.6)μmol/L]明显低于一步酶法[(116.6±29.6)μmol/L,t=32.12,P<0.01];与HPLC法测定结果[(83.9±26.8)μmol/L]差异无统计学意义(t=0.541 6,P>0.05),且呈良好相关性(Y二步酶法=1.042XHPLC法-0.182 1,r2=0.982 4)。二步酶法测定血清肌酐的线性范围达4 500μmol/L,平均回收率为100.8%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.91%～4.20%和3.20%～4.60%,应用二步酶法每天测定室内质控定值血清[低(78.0μmol/L)、中(206.0μmol/L)、高(900.0μmol/L)],共测定180 d,其日间总CV分别为4.46%、5.27%、7.24%。二步酶法试剂至少能稳定180 d。健康人群血清肌酐的参考范围男性为56～132μmol/L,女性为41～109μmol/L。结论以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ和以HDAOS、4-AAP为色原物(试剂Ⅰ)的二步酶法可以消除肌酸和脂血、溶血、黄疸血的干扰,可用于临床肌酐常规测定。     

改良缺血修饰白蛋白测定方法（白蛋白-钴结合试验）的建立

目的建立改良的缺血修饰白蛋白（IMA）测定方法[白蛋白-钴结合（ACB）试验]。方法以1-亚硝基-2-萘酚（NN）代替二硫苏糖醇（DTT）作为显色剂,确定试验的基本条件（最佳波长、反应时间、试剂稳定性等）,并对该试验的精密度、敏感性、线性等进行评价。测定急性心肌梗死（AMI）和胸痛患者的IMA值并进行统计学分析。结果改良ACB试验最佳吸收波长为410 nm,反应体系0～25 min时吸光度值变化稳定,试剂在室温和4℃30 d内性能稳定,反应体系线性良好。批内变异系数（CV）为2.67%,批间CV为5.44%。应用显色剂NN对钴离子（Co2＋）的最低检出限为0.488 mg/L,应用DTT为7.812 mg/L。三酰甘油（TG）〈2.02 mmol/L、血红蛋白（Hb）〈6.9 g/L、总胆红素（TBil）〈66.0μmol/L时无干扰。AMI组为（1.195±0.320）吸光度单位（ABSU）,胸痛组为（0.855±0.068）ABSU,二者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论以NN作为显色剂测定IMA的ACB试验灵敏、方便、简单,适合批量测定。     

甘油三酯和总胆固醇试剂对总胆汁酸检测结果的影响

目的探讨甘油三酯（triglyceride,TG）和总胆固醇（total cholesterol,TC）试剂对血清总胆汁酸（total bile acid,TBA）检测结果的影响及解决办法。方法 2008年1月-2009年10月采用魅力2000全自动生化分析仪,首先单独检测20份血清标本的TBA含量。然后分别检测TC和TG后进行TBA含量检测。最后设定特殊检测程序和清洗程序后再按TC→TBA,TG→TBA顺序进行TBA含量检测。结果单独检测20份血清标本的TBA结果均值为7.2μmol/L;按TC→TBA,TG→TBA顺序检测结果均值分别为13.5μmol/L和14.3μmol/L,单独和组合测量方法测定TBA结果有统计学意义（P〈0.05）。设定特殊检测程序和清洗程序后按TC→TBA,TG→TBA顺序检测结果均值分别为7.4μmol/L和7.5μmol/L,与单独测量TBA结果相比,无统计学意义。结论 TG和TC试剂对TBA检测产生干扰的原因是试剂成分中含有浓度较高的TBA,在魅力2000全自动生化分析仪上,设定特殊检测程序和清洗程序,能有效消除TG、TC试剂对TBA检测的影响。     

颗粒增强免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸的方法学评价

目的：对胶乳颗粒免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸（HCY）的方法学进行初步评价。方法：应用胶乳颗粒免疫比浊法测定HCY的精密度、标准曲线、干扰实验、稳定性实验、并与循环酶法测定血清HCY的结果进行相关性分析。结果：颗粒增强免疫比浊法测定HCY的精密度（批内CV为1.87%、0.75%,批间CV为2.29%、5.35%）较高;HCY浓度在0μmol/L～50μmol/L范围内线性良好;当抗坏血酸浓度1107mg/L、胆红素浓度445 umol/L、血红蛋白浓度6.7 g/L;甘油三酯浓度14.6 mmol/L、氨离子浓度75 umol/L时均未对测定结果产生干扰;试剂开瓶后稳定周期也可达到25天;颗粒增强免疫比浊法和循环酶法测定HCY相关性良好（y =0.9904x ＋0.0813,r=0.9981）。结论：颗粒增强免疫比浊法测定血清HCY具有较高的精密度,结果准确可靠,适合临床实验室推广。     

选择Jaffe法消除胆红素对肌酐测定的干扰

目的通过调整全自动生化仪测试参数,合理选择比色时间,以消除高胆红素对Jaffe法测定肌酐的干扰。方法使用Jaffe速率法测定血清肌酐,不加入任何化学物品,只通过调整迈瑞BS400全自动生化分析仪的比色周期来消除高胆红素对肌酐测定的干扰。结果试验组(高胆红素组)和对照组(低胆红素组)在44～49比色周期之间读取吸光度变化,可消除高胆红素对肌酐测定的干扰(0.01P0.05)。结论根据仪器特点,合理调整参数可有效排除高胆红素对肌酐测定的干扰,取得与低胆红素含量条件下相同的结果。     

脂类物质对血清总胆汁酸检测的干扰和携带污染分析

目的：探讨脂类物质对循环酶法测定血清总胆汁酸（TBA）的干扰和试剂可能携带的污染,寻找减少和消除干扰和污染的方法。方法采用循环酶法测定血清 TBA,观察高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）试剂对 TBA 检测的携带污染,以及高血脂样本对 TBA 检测的干扰,并尝试通过设置不同的冲洗程序和检测顺序来减少对 TBA 的干扰和携带污染。结果用低值和高值混合血清进行 TBA 检测,研究结果表明,在检测 TBA 前后清洗过程中,用水做冲洗液比酸性洗液做冲洗液,血清 TBA 检测结果的准确更高,设置清洗和不设置清洗对检测结果的影响显著（P ＜0．01）。以脂类试剂为样品重复检测其 TBA 浓度,取均值,发现 HDL-C 对 TBA 检测稳定性的影响最大[（476．06±1．88）μmol/L],其次是 TC 和 TG,分别为[（127．78±1．18）、（121．05±1．08）μmol/L],而 LDL-C 影响最小[（2．23±0．51）μmol/L]。干扰 TBA 检测结果稳定性的严重程度由大到小依次为 HDL-C、TC、TG 和 LDL-C。设置检测顺序,冲洗程序。再用多干扰项目混合样本/TBA,结果表明血脂样本对 TBA 的干扰大大降低（P ＜0．01）,但是不能完全排除干扰。结论生化分析仪的分析顺序和冲洗程序以及试剂成分的外源性物质干扰严重影响测定结果的准确性。要想保证结果准确、可靠,不但需要设置合理的冲洗和反应顺序,还要熟练掌握仪器操作和项目的反应原理,了解试剂的成分,更加要掌握仪器的定期维护和保养等方面的知识。     

两种检测方法测定C反应蛋白的比较

目的评估速率散射比浊法和免疫透射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的分析性能。方法分别采用速率散射比浊法(美国Siemens Healthcare Diagnostica公司BN-Ⅱ特定蛋白仪)和免疫透射比浊法(芬兰OrionDiagnostica公司CRP快速检测仪)对CRP进行测定,方法学评价指标为精密度、线性范围、抗干扰性、相关性及偏倚。结果 CRP浓度为2.0～80.0 mg/L时,BN-Ⅱ特定蛋白仪总变异系数(CV)<6%;CRP浓度为8.0～80.0 mg/L时,CRP快速检测仪总CV<7%;检测线性范围为8.0～70.0 mg/L。血红蛋白(Hb)<10 g/L、胆红素(Bil)<300 mg/L对2种方法检测干扰<10%,在可接受范围内。甘油三酯(TG)<20 mmoL/L时BN-Ⅱ特定蛋白仪不受影响(干扰<10%)。CRP快速检测仪在TG>15 mmol/L时低值血清干扰>10%,高值血清不受干扰。50份血样相关分析的结果显示2台仪器测定结果的相关性良好(r=0.98,P<0.01)。线性回归分析经Cusum检验显示2台仪器间偏倚差异无统计学意义(P>0.05),BN-Ⅱ特定蛋白仪测定结果较CRP快速检测仪结果偏低,Bland-Altman曲线显示2种方法的平均偏倚为-2.1。结论速率散射比浊法和免疫透射比浊法的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求。虽然系统间测定结果存在一定偏倚,但也符合临床检测要求。     

脂蛋白残粒检测方法的评价及在冠心病中的初步应用

目的对免疫分离法测定血清脂蛋白残粒（RLP）进行方法学评价,分析该方法在冠心病患者血清RLP临床检测中的应用。方法评价免疫分离法测定血浆RLP的精密度、稳定性试验、回收试验、干扰试验、线性范围。用该法测定100名体检健康者、59名冠心病患者空腹血清RLP水平,同时测定三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A1（apo A1）和载脂蛋白B（apo B）,比较7个项目的临床符合率。结果免疫分离法测定高（0.48 mmol/L）、低浓度（0.12 mmol/L）血清RLP的批内变异系数（CV）分别为4.6%、4.2%,平均为4.4%;批间CV分别为5.8%、6.0%,平均为5.9%。平均回收率为98.7%。血清样本4℃可保存4 d以上,-20℃可稳定保存1个月以上。血红蛋白（Hb）〈5 g/L、胆红素〈300μmol/L、TG〈14.1 mmol/L时对RLP测定无明显干扰;RLP在2.0 mmol/L范围内线性良好。体检健康人群RLP参考范围为（0.18±0.04）mmol/L。冠心病患者空腹血清RLP浓度为（0.31±0.072）mmol/L,明显高于正常对照组（P〈0.01）;其临床符合率为79.7%,高于TG（44.0%）、TC（30.5%）、LDL-C（28.8%）、apo B（27.1%）、apo A1（25.4%）和HDL-C（18.6%）。结论免疫分离法测定RLP操作简单,结果准确、可靠,符合临床质控要求,适用于基础研究和临床检验。RLP可作为冠心病的致病因子应用于临床。     

维生素C对单试剂氧化酶法检测总胆固醇和三酰甘油的干扰分析

目的分析不同维生素C(VC)浓度对单试剂氧化酶法检测总胆固醇(CHOL)和三酰甘油(TG)的干扰影响,确定影响临床应用价值的最低VC干扰浓度。方法收集覆盖CHOL、TG检测线性范围的新鲜血清样本各10份,制备不同浓度梯度的VC干扰管,单试剂氧化酶法测定CHOL和TG,计算加入不同梯度浓度的VC前后CHOL、TG的差值及相对偏差,使用国家卫生行业标准(WS/T403-2012)的允许总误差判断偏差是否具有临床意义,确定不同CHOL、TG浓度对VC影响检测结果不可接受的浓度。结果VC对单试剂酶法检测CHOL、TG的干扰为负干扰,干扰值与VC干扰浓度呈正相关关系,随着干扰浓度的增加,干扰值越大。相关关系方程式为TG:Y=-1.0021 X(r 2=0.9956);CHOL:Y=-0.997 X-0.0213(r 2=0.9976)。结论VC对单试剂氧化酶法检测CHOL和TG产生负干扰,产生具有临床意义的干扰与VC干扰浓度及CHOL、TG值密切相关。