马铃薯淀粉制备磷酸寡糖的研究

以马铃薯淀粉为原料,采用全酶法并借以喷射液化工艺制备低DE值的麦芽低聚糖浆,采用高效阴离子交换色谱法测定所制备样品的糖分组成,离子树脂交换法从中分离制备磷酸寡糖,最后,采用薄层层析法和红外光谱法对其进行定性分析。结果表明:制备液化DE值16%,糖化DE值35%的糖液,其中,主要成分为麦芽二糖至麦芽七糖,以二糖至五糖居多。201×4强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂分离效果好,分离条件为:洗脱液为0.4 mol/L NaCl,洗脱速度为1.4 mL/min。经红外光谱定性分析,结果显示样品为结合有磷酸基团的糖类物质。     

响应面试验优化玉米淀粉挤出-酶解复合法糖化工艺

以经过挤出-酶解复合法液化后的玉米淀粉为原料,利用葡萄糖淀粉酶为糖化酶,采用挤出-酶解复合法糖化玉米淀粉挤出酶解物。以葡萄糖(dextrose equivalent,DE)值为考察指标,在单因素试验的基础上,利用响应面法对糖化工艺参数进行优化,确定最佳挤出工艺。响应面分析结果表明,最优工艺为葡萄糖淀粉酶添加量140 U/g、原料质量分数70%、挤出温度85℃,由此工艺得到的淀粉糖DE值为42.12%。利用高效液相色谱法检测得出DE38产品葡萄糖含量26.17%、麦芽糖含量25.29%、麦芽三糖含量14.86%,DE42产品葡萄糖含量29.57%、麦芽糖含量33.40%、麦芽三糖含量17.23%。红外图谱显示挤出物中含有葡萄糖等低聚糖特征峰,扫面电镜图显示原料经挤出后表面生成多孔状结构,X-射线衍射图显示有新的晶型结构生成,Brabender黏度曲线表明挤出物中含有小分子可溶性糖,黏度降低。     

由马铃薯淀粉制得磷酸寡糖的定性定量测定

对以马铃薯淀粉为原料、全酶法制得的磷酸寡糖进行定性定量分析。通过采用薄层层析法(thin layer chromatography,TLC)和高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测(high-performance anionic exchange chromatography-air pulsing ampere detectors,HPAEC-PAD)对磷酸寡糖组分进行检测分析,同时利用红外吸收光谱(infrared spectroscopy,IR)对其进行结构分析。结果表明：磷酸寡糖是结合有磷酸基团的并且聚合度在3～7之间的麦芽低聚糖混合物,以麦芽三糖至麦芽六糖组分居多。     

麦芽寡糖醇高效制备新方法的研究

麦芽寡糖醇是近年来发现的现代食品工业中重要的糖醇,其中由麦芽三糖衍生而得的麦芽三糖醇的含量决定了其质量与用途。以玉米淀粉为原料,首先研究耐高温α-淀粉酶对淀粉的液化作用,制得特定液化度的淀粉液化液;然后探究普鲁兰酶、β-淀粉酶和中温α-淀粉酶在淀粉糖化阶段的作用,获得高麦芽三糖含量的低聚麦芽寡糖。由此通过加氢反应制得高麦芽三糖醇含量的低聚麦芽寡糖醇。淀粉液化与糖化的最佳条件是:以25%(w/v)淀粉乳开始,控制淀粉液化后的DE值为20,分别按8、100、16 U/g的添加量同步加入普鲁兰酶、β-淀粉酶和中温α-淀粉酶,在pH5.5、55℃下糖化10 h。所得糖液经加氢制得的糖醇中麦芽三糖醇占42.18%、麦芽糖醇占48.51%,总低聚糖醇转化率达到98.76%。研究结果可指导高品质麦芽寡糖醇及其相关产品的高效制造。     

磷酸寡糖检测方法的研究

实验结果表明,用展开剂正丁醇∶乙酸∶水=3∶1∶1,显色剂苯胺-二苯胺-磷酸,点样量为2μg/μL,点样原点直径小于2mm时,可将麦芽糖至麦芽七糖各组分分开,斑点清晰、圆形、无托尾,分离效果好。土豆淀粉中的磷酸寡糖主要含有麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖和麦芽六糖,其中平均每四个葡萄糖残基上连接有一个磷酸根。用碱性磷酸酯酶法测定土豆淀粉中的磷酸寡糖,具有样品回收率高、相对误差较小、方法简便、仪器廉价、准确性好等优点,适合于磷酸寡糖常规检验。     

橡子粉酶法制备低聚异麦芽糖的工艺研究

对橡子粉酶法制备低聚异麦芽糖的工艺过程进行优化,以期提高低聚异麦芽糖中异麦芽糖、潘糖和异麦芽三糖的含量。采用Box-Benhnken响应面法,优化以耐高温α-淀粉酶液化橡子粉的工艺条件。最佳的液化工艺条件为:以DE值13%为最佳液化指标,液化时间31 min、液化温度95℃、液化p H6.6、酶添加量13 U/g,结合生产实际最佳条件下的DE值为12.91%;继而采用正交实验,优化以普鲁兰酶、β-淀粉酶糖化橡子粉液化液的工艺条件,得到最佳的糖化工艺条件为:普鲁兰酶添加量25 U/g、β-淀粉酶添加量130 U/g、温度60℃、时间10 h,在此最佳工艺条件下糖化转苷后的(IG2+P+IG3)含量为36.11%±0.17%;转苷工艺过程的α-葡萄糖转苷酶最佳添加量为1.5 U/g,最佳条件下异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖含量之和为36.27%±0.18%。     

根霉PE—8菌株淀粉降解酶类的研究菌株的选育及其酶解淀粉产物的鉴定（Ⅰ）

从淀粉厂土样等样品中分离筛选到一支产淀粉降解酶的根霉菌株P78，经紫外线及Co^60辐射诱变和自然分离，获得一支突变菌株PE－8，在麸曲培养基上，46－48℃、固态培养22－24h，酶活力达3000U/g(干）。经高压液相色谱和纸层析分析证明，其分泌的淀粉降解酶类作用于适当液化的玉米淀粉产物中麦芽三糖至麦芽八糖的比例达77.6%、葡萄糖含量仅为3.03%，属于麦芽低聚糖，说明根霉PE－8菌株分泌的淀粉降解酶类不同于葡萄糖淀粉酶或α－淀粉酶，属于低聚糖酶。     

麦芽四糖生产工艺的研究

麦芽四糖是一种新型麦芽低聚糖,具有易消化吸收、低甜度、高黏度、保湿性好、吸湿性低、抗龋齿、增稠作用强、冰点作用小、低渗透压、防止食品中蛋白质变性等特点,广泛应用于食品行业、饲料行业、造纸行业及及生化试剂分析行业等。以本公司自制的淀粉液化液为原料,通过对液化液DE值、糖化温度、糖化p H、糖化时间、普鲁兰酶添加量及麦芽四糖酶添加量的研究发现,普鲁兰酶与麦芽四糖酶协同作用效果比较明显,它们的共同使用可以明显提高麦芽四糖含量。通过对DE值、糖化温度、糖化p H作正交试验表明,影响麦芽四糖含量各因素的主次关系依次是DE值、糖化温度、糖化p H;在底物浓度27%,普鲁兰酶添加量为0.5ml/L,麦芽四糖酶添加量为0.4ml/L,DE值为5,糖化温度为55℃,糖化p H 5.5时,麦芽四糖含量最高,为57.42%。     

非抗生素促生长的生物技术途径(二)

4　低聚糖的作用及应用低聚糖,又称寡聚糖、寡糖,通常是指2～10个单糖通过糖苷键连接形成的糖类物质。低聚糖的种类很多,已知的有近千种。根据组成单糖分子数的不同,可分为:二糖、三糖、四糖以至十糖;根据组成的单糖及其结合类型不同,可分为:寡果糖、寡甘露糖、寡木糖、异麦芽寡糖、大豆寡糖、半乳寡糖、乳果寡糖、α-寡葡萄糖、β-寡葡萄糖等。由于低聚糖在主要作用上与益生素异曲同工,所以也有人称它为“化学益生素”。41　作用机理[11]目前对低聚糖在动物营养中的作用机理并不十分清楚,但综合最新的研究结果表明,低聚糖作为饲料添加剂的…     

芭蕉芋淀粉生产低聚异麦芽糖的研究

采用正交实验,优化芭蕉芋淀粉液化条件。结果表明:耐高温α-淀粉酶的使用量为1000U、反应温度为60℃、反应时间为75min、淀粉悬浮液浓度为25%,最优芭蕉芋淀粉液化DE值为13.22。在此条件下加入β-淀粉酶2.52U/g、α-葡萄糖苷酶使用量3.67U/g,反应温度60℃,pH6.8,反应时间72h条件下,异麦芽低聚糖为(以总糖计)34.36%。     

SrtA蛋白在大肠杆菌中的高效表达与活性鉴定

按大肠杆菌偏好优化密码子并合成高活性突变型srtA基因,构建Trx蛋白共表达载体pTIG-srtA,转入大肠杆菌BL21（DE3）后低温诱导表达,通过Ni2+柱亲和层析纯化SrtA蛋白,连接LH_N-LPETG和G-H_C蛋白检测SrtA蛋白活性。菌液PCR鉴定和测定序列比对结果显示,构建pTIG-srtA载体成功;SDS-PAGE及Western Blot分析结果显示,在大肠杆菌中实现了SrtA蛋白的可溶性高表达,Ni2+柱亲和层析后得到纯度大于95%的SrtA蛋白,LH_N-LPETG和G-H_C蛋白成功连接表明,原核系统表达纯化的SrtA蛋白具有良好的转肽酶活性。     

高效液相色谱测定玉米油生育酚含量研究

该研究通过比较应用高效液相正相色谱和反相色谱两种方法对玉米油生育酚含量测定结果,以期建立更适于测定玉米油生育酚含量的高效液相方法。正相色谱法采用硅胶柱色谱柱,流动相为正己烷∶异丙醇=98∶2(V/V),流速为1.0 ml/min,紫外检测器波长为298 nm,平均回收率97.1%,变异系数为2.00%:反相色谱法采用C18色谱柱,流动相为甲醇∶水=90∶10(V/V),流速为0.8 ml/min,紫外检测器波长为298 nm,平均回收率84.9%,变异系数为2.29%。通过对两种方法比较可知,正相色谱法测定玉米油生育酚含量更为高效、稳定、省时,且成本较低。     

姜黄素3种单体的分离纯化

以中药姜黄饮片为原料提取姜黄色素,采用乙醇超声波法提取、大孔树脂吸附分离以及硅胶柱色谱法过柱洗脱依次得到3种姜黄色素单体,并通过薄层层析和HPLC对姜黄素3种单体进行纯度检测。以DM301大孔树脂吸附纯化姜黄色素,提取率为58.09%;利用硅胶柱色谱分离法对姜黄色素提取液进一步纯化得到3种姜黄素单体：姜黄素（curcumin Ⅰ）、脱甲氧基姜黄素（demethoxycurcumin Ⅱ）和双脱甲氧基姜黄素（bisdemethoxycurcumin Ⅲ）,薄层层析检测结果显示各单体斑点明显、均一,纯度较高。高效液相色谱法确定色谱条件：色谱柱为Diamonsil■ C18（5 μm,250 mm×4.6 mm）,流动相为乙腈-0.4%冰醋酸体积比48∶52,检测波长为254 nm,在该HPLC条件下,总姜黄素中的3种单体能够实现基线分离,分离度较好。     

香肠中红色2G的HPLC法及UPLC-MS/MS检测

建立香肠中红色2G色素的高效液相色谱法(HPLC)测定和确证的超高压液相色谱-质谱/质谱法(UPLC-MS/MS)。以0.662mol/L氨水为提取液,样品均质提取两次,离心后用C18柱净化,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测,流动相为乙酸-乙酸铵缓冲液-甲醇(55:45,V/V),等度洗脱,流速为1mL/min,检测波长为530nm,阳性结果用UPLC-MS/MS确证。HPLC-DAD法在0.0212～1.06mg/L范围内,红色2G的峰面积与其相应浓度呈现良好相关性,r＞0.999,方法测定限为0.106mg/kg,在空白样品中添加已知浓度的红色2G色素,平均回收率在79.0%～86.5%之间,相对标准偏差(RSD)在3.19%～5.06%之间。UPLC-MS/MS法的测定限为0.005mg/kg,平均回收率在75.5%～80.2%之间,RSD在3.62%～9.97%之间。该方法可用于香肠中红色2G的检测及确证。     

高效液相色谱法定量测定果蔬中甲醛含量

通过五氟苯肼与甲醛进行衍生,建立高效液相色谱法定量测定果蔬中甲醛含量的分析方法。样品在温度为60 ℃超声波条件下直接提取衍生30 min,离心纯化后高效液相色谱检测,外标法定量。优化的色谱条件为：XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相：乙腈-水（70∶30,V/V）,流速1.0 mL/min,柱温40 ℃,检测波长258 nm。结果表明,该方法的定量检测限可达到0.114 mg/kg,在0.114～57 mg/L范围内呈良好的线性关系,当甲醛添加量分别为1.14、8.55、17.10 mg/kg时,平均回收率为81.4%～101.8%,相对标准偏差为2.6%～5.0%（n=6）。该方法样品前处理简便、稳定性好、检测限低,适合果蔬中甲醛含量的快速检测。     

高效液相色谱快速分析亚麻籽环肽条件研究

采用高效液相色谱法分析亚麻籽环肽组成及相对含量。以14种亚麻籽环肽色谱峰平均分离度和分析效率作为指标,对不同色谱柱、进样量、梯度洗脱初始体积分数、流速、乙腈体积分数上升速率进行优化,并利用HPLC-ESI-MS进行定性分析。结果表明,高效液相色谱最优条件为:采用Kinetex■色谱柱,水、乙腈为流动相,进样量5μL,梯度洗脱程序为乙腈体积分数从40%以5%/min升至90%,流速1 m L/min。最优条件下亚麻籽环肽14个色谱峰分离度较好,平均分离度为1. 65,分析时间为9. 09 min,分离效率为10. 86。优化后的色谱条件可对市售亚麻籽、亚麻籽油以及亚麻籽粕中环肽组成进行有效分析。     

国产玛咖中腺苷含量的高效液相色谱分析

目的：建立一种玛咖中腺苷的高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）检测技术,并根据海拔、组织部位、干燥处理方法及表皮颜色差异对国产玛咖中腺苷含量进行分析。方法：用10%的甲醇溶液为提取溶剂提取玛咖中的腺苷,采用Waters SunfireTM C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以甲醇-水（10∶90,V/V）为流动相,流速1.00 mL/min,紫外检测波长260 nm,柱温26 ℃为条件进行腺苷的HPLC含量测定,并用该方法对多个玛咖样本进行了腺苷含量分析;结果：该方法显示腺苷含量在2.81～90 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（R2为0.999 4）,精密度较高（相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为0.728 3%）、重复性较好（RSD为1.745%）,样品溶液24 h内的稳定性好（RSD为1.069%）,平均加样回收率为99.76%（RSD为0.48%）。根据不同玛咖样品检测结果发现,腺苷含量受玛咖颜色和海拔的影响较大,而且干燥处理方法和组织部位影响更大。结论：HPLC法适合玛咖中腺苷成分的含量测定,可用于玛咖原料的质量控制     

高效液相色谱法测定果蔬饮料中的克百威和甲萘威农药残留

建立用HPLC-荧光检测法测定果蔬饮料中克百威、甲萘威残留量的方法。试样用甲醇-二氯甲烷(1:99,V/V)提取,取一定量有机相过氨基柱、浓缩、定容,外标法定量。该方法的检出限为克百威0.002mg/kg、甲萘威0.0008mg/kg,加标回收率在77.1%～94.5%之间,测定的相对标准偏差在1.3%～9.0%之间。     

高效液相色谱和离子色谱测定水中短链脂肪酸的方法比较

从分离谱图、分析时间、线性范围、检出限、精密度和加标回收率角度,对离子色谱和高效液相色谱(HPLC)测定水中的短链脂肪酸的方法进行比较。HPLC使用SunFire~(TM)C18色谱柱,流动相为磷酸二氢钾溶液和甲醇,梯度洗脱,流速1.0 m L/min。离子色谱法使用Dionex~(TM)ATC-3色谱柱,流动相为不同浓度氢氧化钠溶液梯度洗脱,流速1.5 m L/min。结果表明:HPLC的分析时间、线性范围、检出限、保留时间精密度、峰面积精密度和加标回收率分别为14.5 min、0~1 200 mg/L、15.57~23.23 mg/L、0.079%~0.597%、1.12%~3.50%和96.1%~112.0%,离子色谱法的相应指标分别为13.0 min、0~20 mg/L、0.03~0.10 mg/L、0.000%~0.053%、1.18%~2.69%和98.2%~122.0%。HPLC线性检测范围宽,但检出限相对高。离子色谱法检出限低,但线性检测范围窄,过高的进样质量浓度使得分离效果不佳。应根据样品实际质量浓度,选择合适检测方法。     

辛硫磷的柱层析纯化及其结构表征

采用硅胶柱层析法对辛硫磷原药进行分离纯化,用红外光谱、核磁共振进行表征,高效液相色谱(HPLC)进行定量测定。结果表明,柱层析的最优洗脱剂为乙酸乙酯:石油醚=1:12。红外光谱、核磁共振都可以证明辛硫磷的提纯产品与其分子结构特征一致。高效液相色谱表明提纯的辛硫磷纯度可以达到98.60%。