拉米夫定治疗中乙型肝炎病毒YMDD野毒株和变异株的变化

目的 观察慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者应用拉米夫定治疗前后,YMDD野毒株及变异株的动态变化,并分析其临床意义。方法 取5例CHB患者治疗前与治疗48周的10份血清标本,先用PCR法扩增包括YMDD基序的乙型肝炎病毒(HBV)部分核苷酸序列,然后进行DNA序列测定,同时分别进行克隆,每份标本随机挑选20～24株单克隆,用实时荧光PCR法检测YMDD野毒株及其变异株。结果 5例CHB患者治疗前PCR产物直接测序结果未检出YMDD变异,治疗48周时有4例检出YMDD变异,但对每株克隆的分别检测显示：治疗前YMDD变异株(YIDD／YvDD)所占比率分别为0％、9．5％、0％、4．5％、5．6％;治疗48周时所占比率分别为100％、100％、65％、100％、0％。其中1例患者治疗前检出YIDD变异株,而治疗48周时YVDD变异株则变成优势株。治疗52周时,4例YMDD变异患者中2例HBVDNA和血清丙氨酸转氨酶(ALT)突破,1例患者ALT突破,但HBVDNA为阴性。结论 YMDD变异株在拉米夫定治疗前的血清中已存在,在服用拉米夫定后,由于选择性抑制了野毒株,使YMDD变异株由弱势株变成优势株,部分患者可导致拉米夫定临床耐药。YVDD变异株可能比YIDD变异株的复制能力强。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎失败的相关因素分析

目的探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎（CHB）失败的相关因素。方法回顾性分析224例拉米夫定治疗CHB患者的临床资料,根据其疗效分为失败组和成功组,比较两组年龄、性别、用药前ALT、HBV DNA水平、治疗24周后HBV DNA阴转、规则用药、HBeAg性质及HBV YMDD变异等因素。结果拉米夫定治疗失败96例,成功128例;与成功组比较,失败组治疗前ALT水平、治疗24周后HBV DNA阴转率、HBeAg阳性患者治疗中阴转和血清转换率低（P〈0.01）,治疗前HBV DNA水平和HBV YMDD变异率高,患者不规则用药（P〈0.01）,两组在年龄和性别间的差异无显著性意义（P〉0.05）。结论ALT、HBV DNA基线水平,治疗24周后HBV DNA阴转、用药规则,HBV YMDD变异及治疗后HBeAg性质改变均是影响拉米夫定治疗CHB疗效的相关因素。     

阿德福韦酯联合拉米夫定治疗YMDD变异慢性乙型肝炎的临床研究

目的:对经拉米夫定治疗出现YMDD变异的慢性乙型肝炎患者采用阿德福韦酯联合拉米夫定治疗48周,观察其疗效及不良反应,探讨慢性乙型肝炎YMDD变异后的治疗方案.方法:将72例患者随机分为3组,A组单用阿德福韦酯治疗48周;B组采用阿德福韦酯与拉米夫定联合治疗12周,后单用阿德福韦酯治疗36周;C组采用阿德福韦酯与拉米夫定联合治疗48周.结果:3组治疗12周内ALT水平进一步反弹升高的患者比例分别为29.2%(7/24)、12.5%(3/24)、4.2%(1/24)(P＜0.05),A组1例患者出现重型肝炎;治疗12周3组患者YMDD变异株检测阳性率分别有17.4%、0、0.治疗48周与治疗前比较3组患者血清ALT水平均显著下降(P＜0.05);但3组之间比较差异均无显著性意义(P＞0.05),HBV DNA水平较基线值显著下降(P＜0.05),均未检测出YMDD变异株;治疗48周3组间e抗原阳性患者血清转换率比较,差异均无显著性意义(P＞0.05);C组患者HBV DNA转阴率与A组比较,差异有显著性意义(P＜0.05),3组患者的HBV DNA反弹率分别为8.3%(2/24)、4.2%(1/24)、0.A组2例耐药患者测序结果为rtN236T变异,B组rtA181V+rtN236变异和rtN236T变异各1例.结论:YMDD变异后采用阿德福韦酯与拉米夫定联合治疗更安全有效.     

乙肝患者拉米夫定治疗过程中YMDD耐药突变株的变化

目的探讨乙肝患者拉米夫定治疗过程中YMDD变异与HBV基因型、HBV DNA含量及治疗时间的关系。方法采用实时PCR法和基因测序法分别对107例拉米夫定治疗的慢乙肝患者进行HBV DNA含量和HBV基因分型、YMDD变异检测。结果 107例慢乙肝患者中,B型19例（17.8%）,C型81例（75.7%）,B、C混合型7例（6.5%）,未发现A、D、E、F、G、H等其他基因型;共25例（23.4%）发生YMDD变异,其中B型、C型和B、C混合型YMDD变异的发生率分别为26.3%、22.2%、28.6%。各基因型患者YMDD变异的发生率及Y IDD、YVDD的变异类型均无统计学差异（P〉0.05）。血清HBV定量水平低、中、高度组产生YMDD变异株的时间有统计学差异（P〈0.05）。结论 YMDD变异与HBV基因型无明显相关性;治疗前血清HBV DNA含量越高,拉米夫定治疗期间发生YMDD变异的时间越早;出现YMDD变异患者肝组织内处于不同的炎症及纤维化状态。     

拉米夫定抗乙型肝炎病毒感染中YMDD变异类型及时间研究

目的 研究拉米夫定抗乙型肝炎病毒(HBV)感染中P基因发生YMDD变异的类型和出现时间。方法 取拉米夫定治疗过程中HBV DNA由阴性再次转为阳性33例患者及HBV DNA始终保持阳性达一年或一年以上2例患者的血清,经PCR扩增HBV的P基因,对扩增产物进行测序及用3个限制性内切酶分析HBVP基因的YMDD变异。 结果 14例出现YMDD变异,其中6例YVDD变异,4例YIDD变异,3例YI/VDD混合变异,1例YI/MDD变异。变异出现时间平均为(11.07±3.65)个月,最短5个月,最长7个月。其中YIDD为(10.00±1.41)个月,YVDD为(11.67±4.41)个月,YI/VDD为(13.33±3.31)个月,三种变异类型的出现时间差异无显著性(F=0.543,P>0.05)。3例YMDD变异后拉米夫定加量至200mg/d,未能消除变异病毒。 结论 拉米夫定抗HBV感染后变异有多种形式,包括YIDD、YVDD、YI/VDD、YI/MDD。变异发生时间一般在治疗后(11.07±3.65)个月。变异类型与用药时间无关。     

慢性乙型肝炎患者血清中病毒的YMDD自然变异

近年来,随着拉米夫定的广泛应用,部分患者出现YMDD变异而产生耐药性,最常见的有YVDD(M552V)和YIDD(M552I)变异.因此,服用拉米夫定后患者的YMDD变异成为近几年的研究热点[1-2];但有研究证实存在YMDD自然变异[3].国内目前尚缺乏大样本YMDD自然变异率的研究,我们对未经治疗的449例慢性乙型肝炎患者进行YMDD变异株的检测,探讨了不同慢性乙型肝炎患者血清中HBV YMDD的自然变异率及其与血清HBV DNA水平的关系.     

慢性乙型肝炎拉米夫定耐药患者HBV基因型及ALT变化的观察

观察慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗后HBVP基因变异与不同HBV基因型感染及HBV DNA复升水平和转氨酶变化.收集51例慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗52-78周后发生YMDD变异的血清标本,对照组128例未用拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本,应用聚合酶链反应方法,测定HBV DNA基因型;用限制性片段长度多态性分析方法(PCR RELP)测定HBV DNA YMDD变异;同时进行HBV DNA定量分析.结果显示51例拉米夫定治疗后HBV DNA基因变异患者以B型和C型为主,分别为10例(19.6%)和39例(76.47%),B C混和型2例(3.92%),未见其它基因型.拉米夫定治疗引起HBVDNAYMDD变异可以发生在不同HBV基因型感染的慢性乙型肝炎患者中,与对照组比较二者没有显著性差异.     

乙型肝炎病毒多聚酶变异与拉米夫定治疗反应

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶酪氨酸－蛋氨酸－天氧氨酸－天冬氨酸（YMDD）基序变异对拉米夫定抗病毒疗效的影响。方法 对19例拉米夫定治疗（100mg/d）48周时血清病毒核酸阳性的慢性乙型肝炎患者,采用聚合酶链反应（ PCR）产物直接测序技术,检测其血清中HBV多取和酶（YMDD）变异情况,并观察其血清HBV DNA和丙氨酸转氨酶（ALT）水平。结果 在检出YMDD变异株的10 例患者（4例为YV^550DD型,均伴L^526→M突变,6例为YI^550DD型）,至52周为止,共5例出现HBV DNA突发（分枝DNA信号扩增法）,其中2例伴ALT再高。追踪其治疗前血清均未发生上述变异。而在未检出YMDD变异的9例患者中,1例出现DNA突发后又阴转,而另1例治疗过程中HBV DNA未阴转、ALT始终波动于正常值上下的患者,发现多聚酶其他部位的变异^473→R,D^477→N,D^480→N,L^491→M)治疗前后相同。结论 乙型肝炎病毒多聚酶（ YMDD）变异与药物诱导相关,发生变异者较无变异者疗效降低;在拉米夫定治疗过程中,该变异的检测将有助于其疗效监测。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎36例临床观察

目的观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的效果。方法36例患者,采取拉米夫定治疗,分别于12月和24个月时观察ALT复常率,HBV DNA转阴率及HBeAg转阴率,同时检测YMDD变异的情况。结果拉米夫定治疗1年的HBV DNA、HBeAg转阴率为别为54.5%、24.2%,HBeAg/抗HBe血清转换率12.1%,ALT复常率78.8%,YM-DD变异率5.6%。停药半年后血清HBV DNA复阳率为22.2%,YMDD变异率18.2%,ALT再次升高率33.3%,死亡1例。结论拉米夫定能够有效降低HBV DNA水平,随着用药时间的延长,YMDD变异的发生率逐渐升高,部份病例停药后出现病情反复或加重。     

拉米夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者7年结果总结

目的 评估拉米夫定治疗乙型肝炎5年的长期疗效和安全性,以及对病毒变异发生率的影响.方法 429例HBsAg,HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者,先按3:1随机双盲分成拉米夫定组和安慰剂组,治疗共12周,以后所有患者均服拉米夫定100 mg/d,共5年.结果 服药治疗5年后,血清HBV DNA仍持续降低,在YMDD变异患者中则增高,中位值为107.5 Meq/nd.HBeAg阴转率和HBeAg/抗Hbe血清转换率分别为28.6%和27.5%.与治疗前ALT水平有显著关系.治疗前ALT基础值＞2×ULN(正常值上限)和＞5×ULN者,5年时HBeAg阴转率和血清转换率均为50%和67%.治疗前ALT增高的患者,5年治疗后,ALT的复常率为58%,治疗前ALT正常的患者,67.0%仍正常.1,2,3,4和5年的YMDD变异率分别为12.1%,49.7%,70.5%,67.0%和70.8%.发生变异后,HBV DNA大多仍可有一定程度抑制,在基线以下少部分可回升.在YMDD变异患者,继续有HBeAg阴转和血清转换,分别为18.4%和17.8%,低于非变异组患者.疗程中ALT增高＞5×ULN有22例,其中变异者16例,非变异者6例,经处理后均缓解.在5年治疗期间,不良反应24.8%.结论 长期应用拉米夫定可持久抑制HBV复制和促进血清转换,耐受性和安全性好,选择适合的患者,可取得最佳疗效.     

阿德福韦酯联合拉米夫定治疗YMDD变异的慢性乙型肝炎疗效相关因素分析

目的研究分析影响阿德福韦（ADV）联合拉米夫定（LAM）治疗YMDD变异的慢性乙型肝炎疗效的相关因素。方法应用ADV联合LAM治疗71例YMDD变异的患者48周,采用Logistic回归分析影响疗效的相关因素。结果治疗48周时,HBVDNA转阴率为78．9％（56／71）,ALT复常率为80．3％（57／71）,HBeAg阳性患者HBeAg转阴或血清转换率为26．7％（12／45）;治疗24周和48周HBVDNA转阴、48周HBeAg转阴或血清转换和48周ALT复常者较相应时间点未转阴者的基线HBVDNA水平低（P〈0．05）;Logistic回归分析结果显示,基线HBVDNA低水平、24周HBVDNA转阴、12周YMDD变异转阴是48周获得较好疗效的相关因素。结论采用ADV联合LAM治疗YMDD变异的慢性乙型肝炎患者,其基线HBVDNA低水平、24周HBVDNA转阴、12周YMDD变异转阴是48周疗效较好的预测因素,发生病毒学突破而无生化学突破的患者早期联合治疗可获得更佳的疗效。     

A 7‐year study of lamivudine therapy for hepatitis B virus e antigen‐positive chronic hepatitis B patients in China

OBJECTIVE: To evaluate the long‐term efficacy and safety of lamivudine treatment for chronic hepatitis B and the impact of emergence of YMDD mutation of hepatitis B virus (HBV). METHODS: A total of 429 patients with serum HBsAg, HBeAg and HBV DNA positive were randomized to receive either lamivudine 100 mg daily or a placebo in a 3:1 ratio for the first 12 weeks. Thereafter, all patients were administered with lamivudine 100 mg/d for 5 years and followed up for 2 years. RESULTS: After 12 weeks of the lamivudine treatment, serum HBV DNA levels decreased rapidly and HBV DNA negativity (<1.6 pg/mL) was 92.2%, whereas it was only 14.1% (P < 0.01) in the placebo group. At the end of 5 years, serum HBV DNA continued to be substantially suppressed. The loss of HBeAg and seroconversion were significantly correlated with baseline alanine aminotransferase (ALT) levels, in patients with baseline ALT > 2 × upper limits of normal, the loss of HBeAg was 54% and seroconversion rate was 50%, respectively. YMDD mutation developed in 70.8% of the patients at years 5. In YMDD mutant patients, HBV DNA levels were increased moderately and with mild to moderate elevations of ALT. ALT flares (ALT > 5ULN) occurred in 22 patients, 16 with YMDD variants and six with non‐variants. One year durability of seroconversion after stopping lamivudine was 80%. CONCLUSION: Lamivudine is effective and tolerable for chronic hepatitis B.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎三年疗效观察

目的　评估拉米夫定治疗慢性乙型肝炎 3年的长期疗效和安全性 ,以及病毒变异的发生率和影响。方法　采用多中心双盲、随机、安慰剂、对照临床试验及开放试验。 4 2 9例HBsAg、HBeAg阳性的慢性乙型肝炎病人 ,先按 3∶1随机分成拉米夫定组和安慰剂组 ,治疗 12周 ,以后所有病人均服拉米夫定 10 0mg/d ,共 3年。结果　治疗 12周 ,拉米夫定组HBVDNA累计阴转率 (<1 6pg/ml)为 92 2 % ,安慰剂组仅为 14 1% (P <0 0 1)。服药 3年后 ,血清HBVDNA仍持续降低 ,非变异组病人其中位值 ,低于可检测水平 ,变异组则可有轻度或中度回升 ,中位值为 86mEq/ml (bDNA法 ,相当于液相杂交法的 10pg/ml)。第 3年结束时 ,HBeAg阴转率为 2 0 3% ,HBeAg/抗 HBe血清转换率为17 3%。此与治疗前ALT水平有显著关系。治疗前ALT基础值 >2倍正常值上限 (2ULN)和 >5ULN者 ,3年时HBeAg阴转率分别为 4 2 2 %和 6 6 7% ,血清转换率分别为 34 4 %和 6 1 1%。治疗前ALT增高的病人 ,3年治疗后 ,ALT的复常率为 5 8 8%。第 1、2和 3年的YMDD变异率分别为 12 1%、4 9 7%和 70 5 %。发生变异后 ,继续服药 ,HBVDNA大多仍抑制 ,少数可回升 ,中位值为 86mEq/ml,仍继续有HBeAg阴转和血清转换 ,分别为 2 0 0 %和 15 1% ,低于非变异组病人。ALT增     

拉米夫定相关性HBV变异对乙型肝炎预后的影响

目的 进一步探讨拉米夫定相关性ＨＢＶ变异对患者临床经过的影响。方法 将接受拉米夫定治疗１００ｍｇ／ｄ的８２例患者在第１０４周按其发生变异程序分为完全变异、部分变异和无变异３组,分别进行肝功能和血清学指标比较。结果 在第１０４周,Ｆ和Ｍ组无１例ＨＢｃＡｇ阴国专,而Ｎ组有１８例ＨＢｅＡｇ阴转 ,１１例ｃＡｇ／抗－ＨＢｅ血清转换;拉米夫定相关性ＨＢＶ变异发生后ＡＬＴ可增高,完全变异组Ｈ ＢＶＤＮＡ水平明     

YMDD变异后HBeAg(+)患者病情进展及处理的临床研究

目的研究经拉米夫定(LAM)治疗出现YMDD变异且HBeAg( )的慢性乙型肝炎患者病情的进展及预后;观察阿德福韦酯(ADV)的临床疗效。方法将60例患者随机分为两组,治疗组采用ADV与LAM联合治疗12周,后单用ADV治疗36周;对照组继续LAM并加强护肝治疗48周。结果YMDD变异后大部分患者HBVDNA的反弹和/或ALT的升高程度低于治疗前水平,少数出现轻度黄疸,临床表现轻微;两组治疗48周后ALT水平下降均显著,ADV组比对照组ALT水平、ALT复常率、HBV DNA转阴率差异显著(P≤0.001);结论ADV治疗YMDD变异,可获得较好的临床疗效。     

YMDD mutations and genotypes of hepatitis B virus in northern China

The objective of this research was to determine the relationship between YMDD mutations and the genotypes of hepatitis B virus (HBV) during lamivudine treatment. HBV genotypes were determined by nested PCR with 6 pairs of HBV genotype-specific primers (A to F) in serum specimens from 142 hepatitis B patients receiving lamivudine antiviral therapy. YMDD mutations were detected by fluorescent hybridization bioprobe PCR and melting curve assay (FH-PCR-MC). Among 142 serum specimens, 13 samples were genotype B (9.2%), 125 samples were genotype C (88%), 4 samples were genotype D (2.8%), and 80 YMDD mutations were found. The YMDD mutation rates were 69.2 and 54.4% in genotype B and genotype C, respectively. There was no significant difference in the YMDD mutation rate between genotypes B and C. Nine genotype B sera with YMDD mutations were found, including 2 YIDD mutations and 7 YVDD (M + V) mutations. Sixty-eight genotype C sera with YMDD mutations were found, including 34 mutations I (M + I) and 17 mutations V (M + V). There was a significant difference in the YMDD mutation types between genotypes B and C. Our results suggested that the YMDD mutation rate was 56.3% in patients treated with lamivudine for 2-4 years. YIDD was the main mutation type. The YMDD mutation rate showed no significant difference between HBV types B and C (P > 0.05), while the YMDD mutation types showed a significant difference between HBV types B and C in Northern China (chi2 test = 4.6, P < 0.05).     

乙型肝炎病毒YMDD变异的治疗对策

目的 探讨慢性乙型肝炎患者发生YMDD病毒变异后的治疗策略. 方法 2005年6月-2007年6月在门诊和住院的经拉米夫定治疗后出现YMDD变异的慢性乙型肝炎患者120例,随机分为4组,A组单用阿德福韦酯10 mg/d,治疗48周;B组采用阿德福韦酯10 mg/d,拉米夫定100 mg/d,联合治疗12周,后单用阿德福韦酯10mg/d治疗36周;C组采用阿德福韦酯10mg/d、拉米夫定100mg/d,联合治疗48周;D组接受恩替卡书1 mg/d,治疗48周.根据资料不同,分别采用方差分析、q检验和χ2检验.结果 4组患者治疗12周内ALT水平进一步反弹升高的患者比例分别为30.0%(9/30)、10.0%(3/30)、6.7%(2/30)、10.0%(3/30)(A组与B组、D组间比较χ2=3.750,P=0.053;A组与C组比较χ2=5.455,P<0.05).A组1例患者出现重型肝炎;治疗12周时4组患者YMDD变异株检测阳性率分别为17.2%、0、0、0;治疗48周时4组患者间ALT水平、HBeAg阳性患者血清转换率比较,差异均无统计学意义.C组、D组患者ALT复常率、HBVDNA达到检测水平以下的百分率与A组患者比较,χ2值分别为7.131、5.516、5.260、6.748,P值均<0.05,差异有统计学意义.4组患者的基因型耐药率分别为6.9%(2/29)、6.7%(2/30)、0、0,A组2例耐药患者测序为rtN236T变异,B组rtA181V和rtN236T变异各1例.结论 YMDD变异后采用阿德福韦酯与拉米夫定联合治疗或恩替卡韦治疗更安全有效.