酶联免疫法与液相色谱-串联质谱法检测猪肉中沙丁胺醇

运用酶联免疫法（ELISA）与液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）对猪肉中沙丁胺醇残留进行测定,并比较了二者在灵敏度、准确性和重现性等方面的差异。结果显示,ELISA法和LC-MS/MS法在猪肉样品中的检测限可达到0.5 μg/kg和0.25 μg/kg,分别向猪肉样品中添加3个质量浓度水平（1.0 μg/kg、2.0 μg/kg、4.0 μg/kg）的沙丁胺醇时,回收率分别为83.7%～90.9%和86.6%～93.5%,变异系数（CV）分别为5.4%～10.3%和6.0%～8.3%。用酶联免疫法实际样品进行检测,筛选出2个阳性样品,经液相色谱-串联质谱法确证亦为阳性,测定结果一致。研究表明,酶联免疫法重复性较好、准确度较高,适用于进行猪肉样品中沙丁胺醇的快速筛选,液相色谱-串联质谱法适用于阳性样品的确证和精确定量。     

酶联免疫法与LC-MS/MS法测定水产品中呋喃唑酮代谢物

运用酶联免疫法和LC-MS/MS法对水产品中呋喃唑酮代谢物残留进行测定.样品经2-硝基苯甲醛衍生化并用乙酸乙酯提取.向样品中分别添加0.60、2.00、6.00μ g/kg三个浓度水平的呋喃唑酮代谢物时,酶联免疫法平均回收率分别为99.2%、96.0%和100.0%,变异系数(RSD)为1.8%～12.6%,最低检测限为0.3μg/kg.LC-MS/MS法平均回收率分别为90.8%、94.3%和86.3%,RSD为6.2%～14.3%,最低检测限为0.1μg/kg.用酶联免疫法对150个样品进行检测,筛选出3个阳性样品,经LC-MS/MS确证为阳性,未发现假阳性样品,且测定结果基本一致.研究表明酶联免疫法重复性较好、准确度较高,是一种水产品中呋喃唑酮代谢物残留的快速筛选方法;液- 质/质联用法灵敏度高,适用于阳性样品的确证和精确定量.     

呋喃西林代谢物酶联免疫吸附测定方法的建立及性能测定

建立动物源性食品中呋喃西林代谢物酶联免疫吸附测定方法。采用自制的呋喃西林代谢物抗原、抗体为基础原料,通过优化反应条件,建立间接竞争酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测方法,并对方法的性能进行测定。结果表明:建立的检测方法在0.03μg/L^2.43μg/L范围内呈线性,检测灵敏度为0.03μg/kg,鱼肉组织样本、虾肉组织样本的检测限分别为0.236、0.229μg/kg,回收率均在75%~120%之间,批内、批间变异系数均在15%以下,通过与标准方法液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-mass spectrum/mass spectrum,LC-MS/MS)对比验证,两种方法用于鱼肉样本的检测呈现较好的相关性,相关系数R2为0.9944。建立的呋喃西林代谢物酶联免疫吸附测定方法的灵敏度、准确度和精密度等参数均符合我国动物源性食品中兽药残留检测方法的规定。     

液质法测定猪肉中十种β-兴奋剂残留

建立猪肉中β-兴奋剂多残留的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。样品经酸性乙腈提取,固相萃取柱净化后采用LC-MS/MS进行检测分析,对样品前处理条件和质谱参数进行研究。结果表明:这些激素的物质的线性范围均为0.5～100μg/kg;低、中、高3种加标水平回收率为72%～87%;最低检出限为0.1～1μg/kg。本方法快速简便、灵敏度高、选择性好,测定结果令人满意,可在各食品检测机构推广应用。     

牛血液前处理方式对ELISA法检测克仑特罗结果的影响

采用单因素实验和正交实验探讨牛血液样品前处理方式对酶联免疫法(ELISA)检测克仑特罗残留结果的影响.结果表明:通过控制牛血液离心前放置时间、离心后放置时间、抗凝剂添加比例,可以有效提高血清样品的质量,最大程度的减少EHSA法检测牛血样中克仑特罗残留假阳性的结果.牛血液样品前处理的各因素对克仑特罗残留检测结果的影响顺序为:离心前放置时间＞抗凝剂添加比例＞离心后放置时间.牛血液样品最佳前处理条件为离心前放置30min、抗凝剂添加比例为1:9、离心后放置时间0min.按照牛血液样品最佳前处理条件,用ELISA法检测30份样品,筛选出2份阳性样品,经液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)确证为阳性,两种方法检测结果一致.在1.0～8.1 μg/L线性范围内,ELISA法检测克仑特罗残留结果假阳性率为0％.     

液质法测定猪肉中八种糖皮质激素残留

建立猪肉中糖皮质激素多残留的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。样品经甲醇提取,固相萃取柱净化后采用LC-MS/MS 进行检测分析。对样品前处理条件和质谱参数进行研究,这些激素的物质的线性范围均为0.5～100μg/kg。低、中、高3 种质量浓度加标回收率均为78%～101%;最低检出限为0.2～2μg/kg。该方法快速简便,灵敏度高,选择性好,测定结果令人满意,可在各食品检测机构推广应用。     

竞争化学发光酶免疫测定技术检测盐酸克伦特罗

目的建立一种检测盐酸克伦特罗(clenbuterol,CLB)的竞争化学发光酶免疫测定法(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA)。方法基于CLB的竞争酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),通过优化反应温度、反应时间和缓冲体系p H建立了CLB的CLEIA测定法。用CLB小鼠中毒模型评价CLEIA检测法对实际样本的检测效果,并将CLEIA与LC-MS法的相关性进行了比较。结果 CLEIA法测定CLB的检测范围为0.0433~42.5363μg/L,检测限为0.0178μg/L,变异系数小于10%,回收率为95%~110%,对莱克多巴胺和沙丁胺醇仅有极低的交叉反应性。所建立的CLEIA法与LC-MS法在检测实际样本时具有较高的相关性。结论本研究建立的CLEIA法操作简便,检测限、灵敏度、准确度、特异性均符合检测要求,可用于实际样品的检测。     

高效液相色谱- 串联质谱法测定猪肉中10 种类固醇类激素残留

建立猪肉中类固醇类激素残留高效液相色谱- 串联质谱(LC-MS/MS)分析方法。样品经甲醇提取,固相萃取柱净化后采用LC-MS/MS 进行检测分析;并对样品前处理条件和质谱参数进行研究。结果表明：这些激素物质的线性范围均为0.5～100μg/kg;低、中、高3 种加标水平的加标回收率为71%～89%;最低检出限为0.2～2μg/kg。本方法快速简便、灵敏度高、选择性好、测定结果令人满意,可在各食品检测机构推广应用。     

毒死蜱残留检测间接竞争ELISA 试剂盒的研制

在多克隆抗体的基础上研制一种适用于检测样品中毒死蜱残留的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。结果表明,研制的试剂盒最低检测限为0.5μg/L,线性检测范围为1.8～1000μg/L,供试样品检测结果的批内、批间变异系数均低于8%,回收率均高于85%。试剂盒在4℃或－ 20℃条件下至少可保存6 个月。     

食品中爱德万甜检测方法比较研究

目的建立准确、适用食品中爱德万甜的检测方法并比较。方法研究检测食品中爱德万甜的高效液相色谱-二级管阵列(HPLC-DAD)法、高效液相色谱-荧光(HPLC-FLD)法和液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法的准确度和精密度,并对3种方法的检出限进行比较。结果 HPLC-DAD法定量限较高(0.8 mg/kg),不满足食品中爱德万甜限量值检测需求;HPLC-FLD和LC-MS/MS法的定量限分别为80.0和0.8μg/kg,满足食品中爱德万甜检测需求。HPLC-FLD和LC-MS/MS法在检测浓度范围内线性关系良好,在方法相应的1倍定量限、2倍定量限及常用限量值水平下的加标回收率在85.0%～103.1%,相对标准偏差为2.5%～9.5%。结论 HPLC-FLD和LC-MS/MS法准确度高、精密度好,能够满足对食品中爱德万甜快速准确的检测要求。     

酶联免疫法检测猪肉中呋喃唑酮代谢物残留

通过检测猪肉中呋喃唑酮代谢物的残留以评价试剂盒的性能,采用酶联免疫法对猪肉中的呋喃唑酮代谢物残留量进行测定。结果表明:该方法的线性检测范围为0.025～2.025μg/L,最低检测限为0.1μg/kg,样本添加回收率为78.2%～100.3%,变异系数为4.7%～10.3%,与呋喃唑酮的交叉反应率为16.3%,与其他药物的交叉反应率均小于1%,且对实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法基本一致。该法灵敏准确、重复性好、特异性高,适用于猪肉中呋喃唑酮代谢物残留的检测。     

固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定市售卤肉制品中5种杂环胺含量

建立了LC-MS/MS快速检测卤肉制品中MeIQ、MeIQx、4,8-DiMeIQx、7,8-DiMeIQx和PhIP 5种杂环胺的方法。样品经40 g/L NaOH-甲醇溶液超声提取,用聚苯乙烯二乙烯苯固相萃取小柱(Poly-Sery PSD)净化,在电喷雾离子源正离子(ESI+)多反应监测(MRM)模式下进行测定。5种杂环胺化合物在0.1~10 μg/L范围内线性关系良好,决定系数R2在0.9976~0.9997之间,在空白样品中的平均添加回收率为76.9%~127.7%,日内相对标准偏差(RSD)为1.0%~9.5%,日间相对标准偏差(RSD)为2.1%~8.7%。在信噪比(S/N)分别为3和10时各化合物的LODs在0.01~0.1 μg/kg,LOQs在0.025~0.25 μg/kg。该方法分析时间短,准确度高,精密度好,可满足卤肉中多种杂环胺同时检测的要求。     

固相微萃取与气相色谱-质谱联用测定肉产品中的克伦特罗

建立了固相微萃取与气相色谱-质谱联用测定肉中克伦特罗的方法。在一定线性范围内,本方法相关系数0.999 3,回收率96%~104%,检出限0.48μg/kg,相对标准偏差7.1%。方法快速、准确,具有良好的实际应用价值。     

同位素稀释电感耦合等离子体质谱法测定食品中的碘

采用同位素稀释法结合密封玻璃管的提取技术,建立了准确、灵敏的食品样品中碘的电感耦合等离子体质谱法（ID-ICP-MS）分析方法。样品中添加碲（128Te）同位素内标,以四甲基氢氧化铵（TMAH）为提取液,采用烧结玻璃试管密封,水浴振荡浸提样品中的碘,电感耦合等离子体质谱法测定,同位素稀释内标法定量。结果表明,碘在0.025 μg/L-50 μg/L范围内线性线性关系良好,相关系数为0.9999,线性方程为y=1.0506 x＋1.2511;当取样质量为0.1 g时,方法的检出限为1.8 μg/kg;在2.50、5.00和10.00 mg/kg 3个低、中、高添加水平,加标回收率在80.29%-104.70%之间,方法相对偏差小于5.0%;通过对海带标准物质GBW08517的测定,表明测定值与标准值之间无显著性差异。本方法简便、准确、灵敏度高,适用于多类食品中碘含量的测定。     

QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定牛蛙肉中酰胺醇类抗生素及其代谢物

采用QuEChERS技术提取氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺,建立液相色谱-串联质谱法（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）同时测定牛蛙肉中酰胺醇类抗生素及其代谢物的检测方法。结果表明：在0.1～50.0 ng/mL范围内,酰胺醇类抗生素及其代谢物质量浓度与其质谱响应值呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 1;检出限为0.007 5～0.003 0 μg/kg,定量限为0.025～0.100 μg/kg;加标回收率为94.3%～97.9%,相对标准偏差为0.8%～3.7%。     

Immunoaffinity chromatography purification and ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry determination of four β-agonists in beef

A highly selective and sensitive method was developed for the simultaneous determination of four β-agonists (clenbuterol, salbutamol, ractopamine and terbutaline) in beef by immunoaffinity chromatography purification coupled to ultra-high-performance LC-MS/MS. The MS/MS conditions, ultra-high-performance LC mobile phase, injection solution, sample purification process and matrix effect were studied to optimise the operation conditions. The limits of detection (LODs) of the instrument for the studied β-agonists ranged from 0.20 to 0.25 μg l(-1), and the LODs of the method for the studied β-agonists ranged from 0.20 to 3.00 μg kg(-1) for beef. Calibration curves were constructed using a standard solution diluted with blank beef matrix. The linear ranges of the calibration curves ranged from 5 to 100 μg kg(-1) and the coefficients of determination were >0.9942 (n = 10) for all four β-agonists. Samples spiked at 5, 10 and 50 μg kg(-1) showed recoveries >72% and RSDs <6.6%. The method is suitable for the simultaneous detection of four β-agonists at trace levels in beef.     

探索用液质串联联用法测定牛肉中的瘦肉精

目的:探索用液质串联联用法测定抽查牛肉中的瘦肉精含量。方法:酶解后的样品溶液,加入氘代克伦特罗与沙丁胺醇作为混合内标,过C18固相萃取小柱,用OasisMCX小柱收集,以3%的氨水甲醇溶液对MCX小柱进行洗脱后吹干,残余物溶于0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液(95:5),以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为梯度流动相,上液质串联联用仪测定。结果:各β受体激动剂在0.5～5.0μg/kg浓度范围良好线性关系,平均回收率90.47%～102.58%,仪器定量限0.0543～0.2978μg/kg。结论:此方法极大排除了其他成分干扰,重现性好,专属性强,灵敏准确,可作检测牛肉中的瘦肉精残留量参考。     

GC-MS和LC-MS/MS分析麦粉中烷基间苯二酚同系物组成

建立气相色谱-质谱（gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）联用法和液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）法测定麦粉中烷基间苯二酚组成。样品经乙酸乙酯超声提取,在GC-MS中,硅烷化衍生处理,采用选择离子监测模式进行测定,以外标法进行定量;在LC-MS/MS中,经固相萃取富集净化,以C18色谱柱分离,采用电喷雾负离子模式扫描、多反应监测模式检测,以外标法进行定量。结果表明,GC-MS和LC-MS/MS均在0.001～5 μg/mL质量浓度范围内有良好的线性关系（R2＞0.98）,GC-MS法的检出限为2.0～6.1 μg/g,加标回收率在94.17%～99.15%之间,相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）在2.94%～4.87%之间;LC-MS/MS法的检出限为2.0～8.4 μg/g,加标回收率在89.05%～99.06%之间,RSD在2.21%～4.17%之间。本研究建立了2 种线性关系良好、低检测限、高灵敏度的检测方法,均可适用于市售麦粉产品中烷基间苯二酚同系物定性定量分析,将为麦类全谷物产品品质控制与检测提供技术指导。