人端粒酶催化亚单位hTERT启动子的研究进展

近几年来随着对端粒酶及其调控机制的研究不断深入，逐渐认识到hTERT仅仅在端粒酶阳性的肿瘤细胞中高表达，在端粒酶阴性的细胞中不表达。近年又有研究表明hTERT是调节端粒酶活性的关键性因素，而hTERT核心启动子的激活是hTERT异常表达的前提。因此hTERT启动子调控机制的研究又为肿瘤的发生、发展、诊治开辟了一片新的研究领域，本文就该领域的研究进展进行综述。     

胃癌中抑癌基因PTEN甲基化状态的检测

胃癌发生涉及多种抑癌基因、癌基因的异常表达。PTEN作为一种广泛的抑癌基因，在多种肿瘤中存在失活现象。其失活原因除突变、缺失外，DNA异常甲基化可能是其失活的第三条途径。本研究采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测胃癌细胞和组织中PTEN基因甲基化状态，探讨其甲基化改变特点与临床病理特征的关系，为胃癌的发生机制提供分子生物学依据。     

胃癌组织中hTERT基因表达及意义

目的探讨hTERT基因在胃癌发生、发展中的作用及机制。方法采用免疫组化SP法及核酸原位杂交法检测胃黏膜肠化生、异型增生及胃癌组织中hTERT蛋白及hTERT mRNA表达情况。结果胃黏膜肠化生、异型增生及胃癌组织中hTERT蛋白及hTERTmRNA阳性表达率均显著高于正常胃黏膜（P〈0.05）。hTERT蛋白表达阳性者hTERTmRNA表达阳性率显著高于hTERT蛋白表达阴性者（P〈0.01）。结论 hTERT基因与癌前病变及胃癌的发生有关,可能是胃癌的生物学标志之一。     

胃癌中抑癌基因PTEN研究进展

本综述了抑癌基因PTEN在胃癌中的最新研究进展。阐述了其与抑癌功能相关的主要结构特点，胃癌中PTEN的基因改变和蛋白异常表达情况及胃癌中PTEN基因的启动子异常甲基化情况。     

胃癌组织中PTEN与Survivin基因表达及临床意义

目的探讨PTEN、Survivin基因在胃癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化sP法检测80例胃癌患者癌组织（观察组）中PTEN及Survivin基因表达，并与20份正常胃组织（对照组）比较。结果观察组PTEN蛋白表达阳性率明显低于对照组，其中42例表达明显降低或缺失；PTEN表达与胃癌TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）；Survivin阳性率为70．0％（P〈0．05），与胃癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期显著相关（尸〈0．05）。结论抑癌基因PTEN与凋亡抑制基因Survivin可能存在相互作用，共同参与了胃癌的发展、转移及浸润。     

胃癌组织中抑癌基因PTEN的表达及其意义

胃癌的发生、发展是个多步骤、多因素共同参与的复杂过程 ,癌基因的激活和抑癌基因的失活是该过程中的重要分子机制之一。与细胞支架蛋白 tensin同源在 1 0号染色体有缺失的磷酸酯酶 ( PTEN)是人类新发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因 ,能通过脱磷酸化作用调控细胞内信号传导通路 ,从而调节细胞正常的生长、发育及抑制肿瘤细胞增殖、粘附、转移。近年研究发现 ,PTEN基因突变、缺失及蛋白表达异常与人类多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关 [1]。但有关 PTEN基因与胃癌的关系研究尚少 ,我们应用免疫组化技术 ,对 5 7例胃癌及邻近正常…     

胃癌细胞PTEN基因启动子区甲基化与蛋白表达的关系及意义

目的探讨胃癌细胞中抑癌基因PTEN5’启动子区CpG岛甲基化状态与其蛋白表达的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）方法检测不同分化程度的胃癌细胞（HGC-27，MGC-803，BGC-823，SGC-7901）中PTEN基因启动子区域甲基化状态。并通过Western blot法检测该4种细胞中PTEN蛋白的表达。结果除SGC-7901外，其他三种胃癌细胞PTEN基因都有不同程度的甲基化，并随着胃癌细胞分化程度的降低。PTEN启动子区甲基化逐渐增强（P〈0．01）；PTEN蛋白表达逐渐减弱（P〈0．01）。PTEN蛋白表达与其启动子区高甲基化之间呈负相关。结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因失活，使其蛋白表达减少甚至缺失，这可能是导致胃癌发生、发展的重要机制之一。     

PTEN在胃癌中的研究进展

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一,也是最致命的恶性肿瘤之一,占癌症相关死亡的第二位.胃癌的发生发展是一个多因素、多基因、多步骤参与的癌变过程,而抑癌基因的失活和癌基因的活化在其中发挥了重要的作用.近年来的研究表明,第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶基因（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN）作为迄今发现的第一个具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因[1],在胃癌的发生、发展、浸润、转移中起着重要作用.现就近年来PTEN基因在胃癌中的最新研究进展综述如下.     

p73、PTEN 在胃癌中的表达

目的 检测肿瘤相关基因p73、肿瘤抑制基因PTEN（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosometen）在胃癌组织中的表达，并研究其临床病理意义。方法 采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测p73、PTEN在40例胃癌中的表达。结果 ①PTNM（pathological tumor-node-metastasis）分期Ⅰ、Ⅱ期胃癌与对照组正常胃黏膜组织间p73、PTEN的表达均有非常显著性差异（P〈0．01）；PTNM分期Ⅲ、Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ期胃癌p73、PTEN的表达均有非常显著性差异（P〈0．05）；②p73在高、中分化胃腺癌组与低分化腺癌组阳性率表达无显著性差异（P〉0．05）；而PTEN在高、中分化腺癌和低分化腺癌阳性率表达差异具有显著性（P〈0．05）。③p73、PTEN在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组检出阳性率差异具有显著性（P〈0．05）。结论 p73、PTEN的表达与胃癌临床病理特征和生物学行为存在密切关系，p73、PTEN基因是胃癌细胞增生活跃的重要影响因素。     

Ezrin和PTEN在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨Ezrin和PTEN在胃癌组织中的表达及意义.方法 选择65例胃癌患者,取胃癌组织作为观察组,癌旁组织作为对照组,通过免疫组化方法检测两组Ezrin和PTEN的表达,并分析不同临床特点胃癌患者Ezrin和PTEN表达的差异.结果 观察组Ezrin阳性38例（阳性率58.5％）,对照组为3例（阳性率5.0％）;观察组PTEN阳性14例（阳性率21.5％）,对照组为65例（阳性率100％）;两组比较,Ezrin和PTEN的表达阳性率均有统计学差异（P均＜0.05）.胃癌组织中Ezrin和PTEN的表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况密切相关（P均＜0.05）.结论 胃癌组织中存在Ezrin、PTEN的异常表达,且Ezrin、PTEN的表达与胃癌预后有关.     

hTERT、P53在胃癌及癌前病变中的表达及相关性研究

目的探讨端粒酶逆转录酶（hTERT）基因、p53蛋白在胃癌（GC）及癌前病变中的表达及相关性。方法采用免疫组化和原位杂交方法分别检测130例GC及癌前病变组织标本中p53和hTERT mRNA的表达。结果p53蛋白在慢性表浅性胃炎（CSG）、慢性萎缩性胃炎（CAG）、非典型增生（DYS）、GC中的表达率分别为5％、25％、50％、62．5％，其中GC与CSG、CAG比较有统计学差异：hTERT mRNA在CSG、CAG、DYS及GC中的表达率分别是0、10％、30％、78．75％，GC与CSG、CAG、DYS比较有统计学差异。p53阳性的GC组织中hTERT表达均为阳性，p53阴性的GC组织中hTERT阳性表达率为66．7％。结论hTERT是一个比p53更好的恶性肿瘤标记物；p53基因突变可导致端粒酶活化，但端粒酶激活可能不完全依赖于p53基因的调控。     

PTEN和p27的表达与胃癌发生及分化的关系

目的探讨PTEN和p27两种抑癌基因的表达与胃黏膜癌变及癌细胞分化程度的关系。方法采用免疫组织化学方法对胃癌组织、癌前病变和对照组正常胃黏膜进行PTEN和p27表达的检测。结果胃癌组PTEN阳性率为53.3%,较正常组和癌前病变组明显下降（P〈0.01）;低分化组PTEN阳性率为36.0%,显著低于胃癌高中分化组（P〈0.01）;高中分化组PTEN阳性率与癌前病变组无差异;胃癌组p27阳性率为35.6%,明显低于正常组（P〈0.05）,但与癌前病变组无差异;胃癌高中分化组p27表达率与低分化组无差异;胃癌组织中PTEN和p27表达呈正相关,但相关度较低（P〈0.05,列联系数C=0.312 2）。结论PTEN与胃癌的分化程度密切相关,可作为判断胃癌恶性程度的指标;p27表达异常可能是胃黏膜癌变过程中的早期分子事件,与胃癌分化程度无关;二者在胃癌组织中的表达无明显相关关系。     

利用组织芯片技术研究PTEN和VEGF在胃癌中的表达及意义

目的研究PTEN和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在胃癌中的表达及临床意义。方法应用组织微阵列仪制作97孔胃癌组织芯片（tissue microarray）。用免疫组织化学S—P法检测PTEN、VEGF在72例胃癌和25例正常胃黏膜中的表达。结果胃癌组织中PTEN蛋白阳性表达率显著低于正常胃黏膜（45．8％ VS 100％，P〈0．01）；VEGF的阳性表达率显著高于正常胃黏膜（75％VSl2％，P〈0．01），PTEN在胃癌中的表达与VEGF呈负相关（P〈0．01）。PTEN、VEGF的表达在中高分化腺癌分别为68．8％、62．5％（P〉0．05），在低分化及未分化腺癌分别为27．5％、85．0％（P〈0．05）；伴淋巴结转移者分别为31．6％、86．9％（P〈0．05），无淋巴结转移者分别为61．8％、61。8％（P〉0．05）；临床病理分期Ⅰ＋Ⅱ期分别为57．1％、61．9％（P〉0．05），Ⅲ＋Ⅳ期分别为30．0％、93．3％（P〈0．05）；与性别、年龄、肿瘤大小和组织分型无显著差异（P〉0．05）。结论PTEN失活或蛋白表达降低、VEGF的高表达与胃癌临床病理特征和生物学行为有密切关系。PTEN在低分化或未分化以及伴淋巴结转移和临床Ⅲ＋Ⅳ期胃癌中的表达与VEGF呈负相关。联合检测PTEN、VEGF对胃癌的恶性程度及预后判断具有一定的临床参考意义。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的，具有快速、准确、方便经济的特点。     

Htert、CD133和c-myc在胃癌中的表达

目的探讨肿瘤干细胞及其Wnt信号通路表达在胃癌患者中的作用机制。方法利用免疫组化技术分析c-myc基因蛋白、hTERT及CD133在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎(伴肠化生或异型增生)、早期胃癌患者非炎症区组织中的表达,并对其进行比较。结果在早期胃癌组与慢性萎缩性胃炎组,c-myc基因蛋白、hTERT及CD133的表达均明显高于慢性非萎缩性胃炎组(P0.05);但早期胃癌组与慢性萎缩性胃炎组相比,c-myc基因蛋白、hTERT及CD133的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论胃癌和胃癌前病变与c-myc基因蛋白、hTERT及CD133的过表达密切相关,在胃癌发病中具有重要意义。     

hTERT和CDw75在胃癌癌组织中的表达及意义

采用免疫组化S-P法检测端粒酶逆转录酶（hTERT）和CDw75在65例胃癌组织和癌旁非癌组织中的表达，计算阳性细胞百分率。结果胃癌组织中hTERT和CDw75阳性表达率显著高于相应癌旁组织（P〈0．01）。二者表达均与浸润深度、淋巴结转移及PTNM分期显著相关（P均〈0．05）。认为hTERT和CDw75阳性表达可作为胃黏膜恶性转化的一个生物学标志物，用于评价胃癌生物恶性度的有用指标；二者联合检测有助于判断胃癌的发生、浸润、转移和临床分期。     

胃癌组织中Survivin、PTEN、P53基因的表达及意义

目的　探讨凋亡抑制基因 Survivin和抑癌基因 PTEN、P53在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法　应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测 Survivin、PTEN和 P53基因在 6 5例胃癌、2 6例不典型增生胃黏膜、10例浅表性胃炎和 30例正常胃黏膜组织中的表达。结果　胃癌组织中Survivin、PTEN、突变型 P53基因的阳性表达率分别为 70 %、4 8%、6 5 % ,不典型增生胃黏膜中分别为 4 2 %、85 %、31% ,Survivin和突变型 P53基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中不表达 ,PTEN基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中全部呈阳性表达。胃癌组织中 PTEN基因的表达与正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,胃癌组织、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜中 Survivin和突变型 P53基因的表达差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。随临床分期增加、胃癌分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移 ,突变型 P53基因的阳性表达率逐渐上升 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因的阳性表达率逐渐降低 (P<0 .0 5 )。在胃癌组织中 Survivin与突变型 P53基因的表达呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,与 PTEN基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因与突变型 P53基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 )。结论　 Survivin、PTEN和 P53     

胃癌及其区域淋巴结中PTEN、IGF-1/IGF-1R mRNA的表达

目的探讨胃癌及其区域淋巴结中MMAC1基因（PTEN）,胰岛素样生长因子1（IGF-1）/胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）mRNA的表达及其在胃癌发生和淋巴结转移中的作用。方法RT-PCR方法检测胃癌组织、正常胃黏膜、胃癌区域淋巴结中PTEN,IGF-1/IGF-1R mRNA的表达。结果胃癌组织中PTEN mRNA表达降低,IGF-1/IGF-1R mRNA表达增高,PTEN/IGF的表达与年龄,性别无关,与肿瘤的分期、分化程度及淋巴结转移明显相关。转移淋巴结中PTEN/IGF表达失衡,并且比原发灶中的失衡更加严重。结论PTEN mRNA表达降低,IGF-1/IGF-1R mRNA表达增高对胃癌的发生和转移起着重要作用。     

胃黏膜癌变过程中hTERT和相关基因表达的变化及其临床意义

目的探讨端粒酶逆转录酶（hTERT）、c-myc、bcl-2、NF-κB蛋白在正常胃黏膜（normal mucosa，NM）、肠化（intestinal metaplasia，IM）、异型增生（dysplasia，DYS）、早期胃癌（early gastric cancer，EGC）和进展期胃癌（advanced gastric cancer，AGC）中的表达水平、相互联系及其临床意义。方法经手术或胃镜病理证实的不同病变胃黏膜组织132例为研究对象（其中NM20例、IM30例、DYS15例、EGC24例、AGC43例），采用免疫组化SP法分别检测其hTERT、c-myc、bcl-2、NF-κB的表达水平，并对各指标阳性表达率、相关性及临床病理联系进行比较分析。结果在胃黏膜癌变过程中，除bcl-2外，hTERT、c-myc、NF-κB的表达随着胃黏膜病变程度的加重而逐渐增加，各组间比较差异显著；进一步分析表明hTERT与c-myc在IN、DYS、AGC等3组中具有显著的相关性（P〈0．05），而hTERT与bcl-2、NF-κB在IM、DYS、EGC、AGC等各组中均无显著的相关性（P〉0．05）；临床病理分析表明，hTERT在低分化及未分化中的表达显著高于高、中等程度分化（P〈0．05），而与性别、年龄、肿瘤大小等无关。结论hTERT随着胃黏膜病变程度的加重，其阳性表达率逐渐增高，提示hTERT可能在胃黏膜癌变过程中具有重要意义，是胃黏膜癌变的早期事件；c-myc过表达可能是激活hTERT过表达的重要调节因素；hTERT不仅可以作为胃黏膜癌变的早期诊断指标，而且有可能成为胃癌或其他肿瘤基因治疗或免疫治疗的良好靶位。