棕榈酰三肽-5皮肤美白功效及机制研究

采用MTT法检测细胞存活率,利用α-促黑素(α-MSH)诱导的B16小鼠黑色素瘤细胞模型和UVB照射诱导豚鼠皮肤色素沉着模型对棕榈酰三肽-5的美白功效进行评价。研究了其对细胞内酪氨酸酶活性、小眼畸形相关转录因子(MITF)和酪氨酸酶m RNA水平的影响。结果表明,棕榈酰三肽-5能够显著降低上清及细胞内的黑色素水平且无细胞毒性。进一步研究发现,棕榈酰三肽-5通过抑制酪氨酸酶活性,下调MITF和酪氨酸酶的mRNA水平,从而抑制黑色素的生成。在动物模型中,棕榈酰三肽-5能够显著降低UVB照射诱导的豚鼠皮肤色素沉着和黑色素分布区域灰度值(P0.05)。     

三肽D-Trp-Arg-Leu-NH2抑制B16黑色素瘤细胞黑色素合成的机制

为了研究三肽D-Trp-Arg-Leu-NH₂(dWRL)对小鼠B16细胞的酪氨酸酶(TYR)活性、黑色素合成及相关基因和蛋白表达的影响，探讨dWRL抑制黑色素生成的可能机制，我们体外培养小鼠B16细胞，采用MTT法测定细胞增殖情况、L-多巴氧化法测定TYR活性、氢氧化钠裂解法测定细胞黑色素含量、qRT-PCR和Western Blot法分别检测药物作用后B16细胞中小眼畸形相关转录因子(MITF)、TYR的mRNA和蛋白表达水平。结果显示三肽dWRL在试验浓度范围内可明显抑制α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)诱导的B16细胞内TYR活性、黑色素合成量及MITF、TYR基因及蛋白的表达量，且呈浓度依赖性。所以三肽dWRL在体外能抑制B16细胞黑色素的合成，上述变化可能是通过下调MITF和TYR的基因转录和蛋白表达作用来完成。     

珍珠灵芝复配物美白功效与机理初步研究

为研究珍珠灵芝提取物复配在美白类化妆品中开发的优势,采用体外酪氨酸酶活性和小鼠B16黑色素瘤细胞模型实验,分别对黑灵芝提取物、珍珠提取物及其复配物的美白功效进行评价,测定三者对体外酪氨酸酶活性、B16细胞相对黑色素含量、酪氨酸酶(TYR)和酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP1)mRNA表达水平的影响。结果表明,1%黑灵芝提取物、2%珍珠提取物及二者组成的复配物均可显著抑制酪氨酸酶活性(P<0.05)、降低细胞内黑色素含量(P<0.05),其中复配物组对酪氨酸酶活性、细胞内黑色素生成抑制率分别达32.87%、68.27%,均优于单用组(P<0.05);此外,复配物组可显著下调TRP1 mRNA表达水平(P<0.05),而单用组无显著下调TRP1 mRNA表达水平的效果,提示复配物组较单用组有更好地抑制真黑色素生成的功效,具有开发成为化妆品功效添加剂加入美白化妆品的潜力。     

高纯竹叶碳苷黄酮纳米材料的护肤功效

在采用B16黑素瘤细胞体外评价高纯竹叶碳苷黄酮复合纳米材料(H-BLFnp)美白作用的基础上,基于临床医学理论进行人体实验,应用系列皮肤测试仪器,对受试者使用试样前后的皮肤含水量、水分散失量、光泽度、明亮度、黑色素含量、皮肤弹性等生理指标进行了测定,考察H-BLFnp在保湿、美白、延缓衰老方面的功效。结果显示,以β-熊果苷为阳性对照,H-BLFnp对B16细胞增殖、胞内酪氨酸酶活性和黑色素合成均有显著的抑制作用(p0.05),当H-BLFnp质量浓度为100 mg/L时,其抑制率分别达到45.14%、72.55%和54.01%,即其可通过降低酪氨酸酶活性、抑制黑素细胞增殖和黑色素生成达到美白功效;人体实验结果显示:H-BLFnp能显著提高皮肤的水分含量、皮肤弹性、明亮度和光泽度,降低皮肤黑色素含量和经皮水分散失。     

高纯竹叶碳苷黄酮纳米材料的护肤功效（急）

在采用B16黑素瘤细胞体外评价高纯竹叶碳苷黄酮复合纳米材料(H-BLFnp)美白作用的基础上,基于临床医学理论进行人体实验,应用系列皮肤测试仪器,对受试者使用试样前后的皮肤含水量、水分散失量、光泽度、明亮度、黑色素含量、皮肤弹性等生理指标进行了测定,考察H-BLFnp在保湿、美白、延缓衰老方面的功效。结果显示,以β-熊果苷为阳性对照,H-BLFnp对B16细胞增殖、胞内酪氨酸酶活性和黑色素合成均有显著的抑制作用(p<0.05),当H-BLFnp质量浓度为100 mg/L时,其抑制率分别达到45.14%、72.55%和54.01%,即其可通过降低酪氨酸酶活性、抑制黑素细胞增殖和黑色素生成达到美白功效;人体实验结果显示:H-BLFnp能显著提高皮肤的水分含量、皮肤弹性、明亮度和光泽度,降低皮肤黑色素含量和经皮水分散失。     

复方精油对小鼠B16细胞内黑色素生成影响

为探讨一款复方精油抑制酪氨酸酶活性和黑色素含量的效果,采用气相色谱与质谱联用技术(GC-MS)对一款复方精油进行成分分析;以促黑素细胞激素(α-MSH)诱导黑色素高表达的小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞)为模型,利用台盼蓝染色记数细胞、CKK8法测定复方精油对黑色素细胞活力的影响;分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和多巴氧化法测定细胞内的黑色素含量以及酪氨酸酶活性。结果显示,该复方植物精油中含有蒎烯(26.19%)、芳樟醇(12.98%)、檀香醇(9.39%)、乙酸芳樟酯(9.16%)等化合物;当复方精油质量浓度小于0.1 g/L时对B16细胞没有毒性,细胞增殖率高于90%;不同质量浓度的复方精油对α-MSH诱导的B16细胞内的黑色素含量和酪氨酸酶活性均有显著的抑制作用,当质量浓度为0.1 g/L时,对B16细胞内黑色素合成的抑制率为36.03%,对细胞内酪氨酸酶活性的抑制率为51.27%,其抑制黑色素生成效果最佳。综上所述,该复方植物精油能够显著抑制黑色素合成,抑制B16细胞内酪氨酸酶活性。     

葡萄籽提取物对B16细胞内黑色素合成的抑制作用

为探讨葡萄籽提取物(GSE)对细胞内黑色素合成的抑制作用以及可能的作用机制,为GSE作为美白化妆品的天然添加剂提供实验依据,采用高表达黑色素的小鼠黑素瘤细胞(B16)为细胞模型,观察在细胞培养液中添加不同质量浓度的GSE后,黑色素生成量的变化,黑色素生成的关键酶——酪氨酸酶的表达量及活性的变化以及对B16细胞增殖的影响。结果表明,GSE在质量浓度为100 mg·L-1时,对B16细胞内黑色素合成的抑制率为(50.05±0.21)%,对细胞内酪氨酸酶活性的抑制率为(34.89±0.17)%,细胞内酪氨酸酶表达量受到抑制,且均呈质量浓度依赖性抑制作用;在培养过程中,B16细胞的增殖没有受到影响。说明GSE对B16细胞内黑色素的合成具有显著的抑制作用,其抑制机制可能是GSE抑制了酪氨酸酶蛋白的表达以及降低该酶的活性。GSE是一种高效的黑色素合成抑制剂,可作为美白化妆品的天然添加剂。     

基于B16黑素瘤细胞评价体系的竹叶黄酮纳米粒子美白功效

以竹叶黄酮为载药、芫根酸性多糖为包材,以ε-聚赖氨酸为阳离子桥,采用离子交联法获得竹叶黄酮纳米粒子(BLFN)。该纳米粒子的平均粒径约为400 nm,粒径分布均匀,分散性良好。以美白因子β-熊果苷为阳性对照,考察了BLFN对B16小鼠黑素瘤细胞株体外培养过程中美白相关指标的影响。结果显示:BLFN对B16细胞内酪氨酸酶活性、黑色素合成和细胞增殖均表现出质量浓度依赖的抑制作用,当BLFN质量浓度为100 mg/L时,其抑制率分别达到69.68%、62.35%和59.14%,均显著优于β-熊果苷(p0.05,p为表征差异性的统计学指标,p0.05表示具有统计学意义)。B16细胞的体外实验结果表明:BLFN能通过抑制黑素细胞活性、酪氨酸酶活性和黑色素合成起到美白功效,显示出替代β-熊果苷的潜力。同时,由于该纳米粒子的构建成分均为天然物,所以其具有较高的使用安全性。     

壮药菲牛蛭提取物的美白作用及其机制初探

研究壮药菲牛蛭提取物的美白作用及其机制。采用MTT法检测菲牛蛭提取物对黑色素瘤细胞(B16)的增殖抑制作用;采用分光光度法检测菲牛蛭提取物对B16细胞酪氨酸酶(TYR)活力和黑色素合成的影响以及对DPPH、·OH和·O2-三种自由基的清除能力和总抗氧化能力;采用紫外线照射法建立裸鼠皮肤色素沉着模型,Masson-Fontana银染法显示皮肤黑色素分布,并测定血清中TYR、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、α-促黑色素生长激素(α-MSH)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经生长因子(NGF)、白介素(IL-1α)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)的水平。实验结果表明,菲牛蛭提取物能明显抑制B16细胞增殖和TYR活力,降低胞内黑色素含量;具有较强的清除自由基能力;能显著减少裸鼠皮肤中黑色素细胞的数量,提高裸鼠血清中SOD含量,降低MDA、α-MSH、bFGF、NGF、IL-1α、TNF-α和IFN-γ含量及TYR活力。壮药菲牛蛭提取物具有较好的美白作用,其作用机制可能与抑制TYR活性及抗氧化作用有关。     

竹叶发酵液的美白、增强皮肤屏障和抗炎护肤功效研究

为研究竹叶发酵液(FBL)的护肤功效，选取角质形成细胞(HaCaT)和黑色素瘤细胞(B16)作为细胞模型，利用细胞计数试剂(CCK-8)评估竹叶发酵液的细胞毒性；并通过检测黑色素含量、十二烷基硫酸钠(SLS)损伤模型下丝聚蛋白和炎症因子的基因表达，分别考察FBL的美白、增强皮肤屏障和抗炎的护肤功效。结果表明，FBL对上述细胞均没有毒性，同时能够显著降低B16细胞内黑色素的含量(显著性p<0.001)，并能促进丝聚蛋白的基因表达(p<0.001)、抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的基因表达(p<0.001,p<0.01)。因此，FBL具有潜在的护肤功效。     

松茸美白功效研究

采用细胞试验、酪氨酸酶试验和人体临床试验，探讨了松茸的美白功效。细胞试验研究了松茸提取物对小鼠黑色素瘤细胞（B16细胞）增殖及对B16细胞内黑色素含量的影响。酪氨酸酶试验通过抑制酪氨酸酶的活性来评价松茸提取物的美白效果。人体临床试验测试志愿者使用松茸提取物凝露前后皮肤的黑色素指数（melanin index,MI）、个体类型角（individual type angle,ITA°），并用Visia-CR型面部图像分析系统进行面部图像采集。结果显示，当松茸提取物的体积分数为0.25%时，对B16细胞的增殖和黑色素含量均有明显的抑制作用。体积分数为0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、1%的松茸提取物，其酪氨酸酶抑制率分别为44.77%、50.88%、59.25%、70.69%、85.74%。人体临床试验表明在凝露基质中添加质量分数为0.2%的松茸提取物，连续使用28天，志愿者斑区MI值下降了5.69%、ITA°值增加了7.92%。     

4种植物花复合提取液的美白功效及刺激性研究

采用醇提法以洋甘菊、橙花、茉莉花、百合花4种植物花为原料制备得到复合提取液,应用小鼠黑色素瘤细胞(B16)增殖率测定、黑色素生成抑制试验、细胞内酪氨酸酶活性测定、体外酪氨酸酶活性抑制试验以及红细胞溶血试验对其美白功效和刺激性进行评估。结果表明,4种植物花复合提取液能显著抑制B16细胞内的黑色素合成和酪氨酸酶活性,且不影响细胞的增殖生长;依ECVAM刺激性分类标准,其分级为无刺激性。复合提取液既安全又高效,可以作为天然美白剂添加到化妆品中。     

烟酰胺与茶多酚复配对抑制PIG1细胞黑色素的影响

研究了烟酰胺及其与茶多酚复配组分对黑色素生物合成及转运机制的作用,以促黑素细胞激素（α-MSH）诱导黑色素高表达的正常人皮肤黑色素细胞（PIG1细胞）为研究模型,通过NaOH裂解比色法测定PIG1细胞黑色素含量,多巴氧化比色法测定PIG1细胞内酪氨酸酶活性,免疫印迹法（Western blot）检测PIG1细胞内调节黑色素生物合成及转运关键受体酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白2(TRP-2)、黑皮质素受体1(MC1R)及Rab27a蛋白表达情况。结果表明,当2 g/L烟酰胺+0.5 g/L茶多酚、3 g/L烟酰胺+0.3 g/L茶多酚、3 g/L烟酰胺+0.5 g/L茶多酚复配组合时,对α-MSH诱导黑色素高表达的PIG1细胞中黑色素含量、细胞内酪氨酸酶活性、TRP-1、TRP-2、MC1R及Rab27a蛋白均存在极显著的抑制作用,并强于5 g/L烟酰胺,而当烟酰胺质量浓度为2 g/L时仅对细胞内酪氨酸酶活性存在抑制作用,即复配组合具有更显著的抑制PIG1细胞中黑色素生物合成及转移的作用。     

白梅花提取物抗氧化及美白功效评价

采用体外评价方法对白梅花提取物进行抗氧化及美白功效研究。通过测定白梅花提取物对超氧阴离子及羟自由基清除的半数抑制浓度(IC₅₀),以及在H₂O₂诱导人皮肤成纤维细胞株(HFF-1细胞)氧化损伤模型中,考察白梅花提取物对细胞形态学、细胞存活率、丙二醛(MDA)含量、活性氧自由基(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)活力、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)以及基质金属蛋白酶1(MMP-1)含量的影响,评价其抗氧化功效。采用酪氨酸酶活性抑制实验以及小鼠黑色素瘤细胞株(B16-F10细胞)黑色素含量测定实验评价白梅花提取物的美白功效。结果表明白梅花提取物具有自由基清除作用,且白梅花60%醇提物、白梅花90%醇提物可明显提高HFF-1细胞活力、SOD活力、GSH活力以及ColⅠ含量,下调ROS、MDA及MMP-1含量,并明显降低B16-F10细胞中的黑色素含量,表现出明显的抗氧化及美白功效。     

红景天提取物应用于化妆品的生化和细胞学功效评价

通过生物化学和细胞学手段评价红景天提取物的酪氨酸酶抑制、DPPH自由基清除、黑色素抑制、抗衰老等功效。结果表明,红景天提取液体积分数为0.1%、0.5%、1%和5%时,酪氨酸酶抑制率分别为15%、48%、57%和72%;在体积分数为0.125%和0.25%时,红景天提取液的DPPH自由基的清除率达到了71%和86%;倒置显微镜细胞形态观察和黑色素含量检测表明,红景天提取物能够显著地减少小鼠B16和人G361细胞黑色素的生成;同时,红景天提取物能够显著促进1079SK成纤维细胞增殖,提高了18.93%,对皮肤1079SK成纤维细胞UVA光损伤的具有显著的保护作用;0.05 g/L的红景天提取物能够显著促进Ha Cat细胞ATP的形成,ATP相对地增加了19%。这说明,红景天具有美白、抗衰老、抗氧化以及促进皮肤表皮细胞活性等功效,在日用化妆品中有很大的应用和开发价值。     

圣草酚对角质形成细胞和黑色素瘤细胞共培养体系中黑色素合成的促进作用

为了研究圣草酚对角质形成细胞(HaCaT)与黑色素瘤细胞(B16)共培养体系中细胞增殖、酪氨酸酶活性、黑色素含量以及酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸相关蛋白1(TRP-1)、酪氨酸相关蛋白2(TRP-2) mRNA表达的影响,建立了HaCaT细胞与B16细胞体外共培养体系模拟“表皮黑色素形成单位”,分别采用MTT法测定细胞增殖率、多巴氧化速率法测定细胞酪氨酸酶激活率、氢氧化钠裂解法测定细胞黑色素合成率、实时荧光定量PCR法测定TYR、TRP-1、TRP-2的基因相对表达量。结果表明,圣草酚在低浓度下对共培养体系中的细胞无毒性作用,而且有明显的促增殖作用;12.5～50μmol·L^-1圣草酚对共培养体系中细胞酪氨酸酶活性有激活作用(P<0.001),并呈剂量依赖性;12.5～50μmol·L^-1圣草酚能显著提高共培养体系中细胞黑色素合成率(P<0.01或P<0.0001);12.5～50μmol·L^-1圣草酚能显著提高共培养体系中TYR的基因相对表达量(P<0.01或P<0.001),25～50μm...     

4种中草药乙醇提取物体外抗氧化及美白活性研究

采用乙醇浸提法从干燥的芦荟叶、白芷、怀山药和黄芩4种中草药中提取分离得到其乙醇提取物。应用自由基清除活性和总抗氧化活性检测方法评估这4种中草药乙醇提取物的抗氧化活性,应用酪氨酸酶活性抑制实验、黑色素B16细胞增殖抑制和黑色素生成抑制实验对其进行美白活性评估。结果表明:4种中草药的乙醇提取物虽然具有一定的抗氧化活性、清除自由基能力、抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素B16细胞增殖和黑色素形成作用,但与市售护肤品常用的抗氧化美白功效成分BHT(2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚)相比,其活性水平偏低,需要进一步分离纯化,富集活性成分,提高抗氧化美白活性。     

美白化妆品原料体外生化细胞模型建立及应用研究

基于黑色素的合成、分泌等机理,建立体外酪氨酸酶活性抑制试验、B16-F10细胞黑色素合成抑制试验及α-MSH诱导黑色素分泌抑制试验模型。立足于目前常见的美白剂及中草药牡丹皮提取物的功效测试,探讨运用上述体外美白试验模型的可行性。结果表明,上述模型可相互补充应用于产品及原料的美白功效筛选和验证,为美白产品的开发及功效验证提供便捷途径。     

化妆品植物原料（Ⅳ）——抑制黑色素合成信号通路的植物美白原料的研究与开发

人类的皮肤和头发的颜色取决于黑色素的数量、质量和分布。黑色素在保护皮肤免受各种环境的有害影响方面发挥巨大的作用。而黑色素过量合成会导致严重的皮肤问题。因此,研究黑色素生物合成的信号通路调控以及探究相关的经信号通路抑制黑色素合成的植物提取物具有非常重要的意义。本文综述了调控黑色素生物合成的信号通路和调控因子,包括α-MSH诱导的信号通路、PI3K/Akt信号通路、SCF/c-kit介导的MAPK信号通路、Wnt/β-catenin信号通路、NO/cGMP信号通路、以及细胞因子、转录因子PAX3和肝X受体。重点介绍通过调控各种信号通路抑制黑色素合成的植物提取物。这些植物提取物虽然通过不同的信号通路进行调控,但大多下调一种整合上游信号通路和调控下游基因的转录因子MITF的表达,进而降低酪氨酸酶(TYR)的表达,抑制细胞内黑色素的生物合成。     

一种植物提取物组合的美白功效研究

将蔓越莓、薰衣草、卡卡杜李、雪绒花和库拉索芦荟提取物复配为美白植物提取物组合（BIRCRosée美白精粹WT100）,研究该组合通过抗氧化、抗炎、维持皮肤屏障与抑制黑色素生成及转运作用途径相结合的美白功效。通过将美白植物提取物组合的酪氨酸酶活性抑制效果与α-熊果苷进行功效对比,再通过3D黑色素皮肤模型平台对表观色度、表观亮度及黑色素含量下降情况进行分析,评价其综合美白功效,并与曲酸进行功效对比。研究结果表明,美白植物提取物组合（BIRC-Rosée美白精粹WT100）在原浓度时,对酪氨酸酶抑制率高达98.99%,远高于α-熊果苷;在3D黑色素皮肤模型能够有效提升表观色度及亮度,同时可减少皮肤中黑色素总量,显示出显著的美白功效。