19 重组人造血细胞生长因子对正常造血细胞体外生长的影响

作者采用4种重组人造血细胞生长因子,包括白细胞介素3(IL-3)和3种集落刺激因子;粒巨噬细胞CSF(GM-CSF),粒细胞CSF(G-CSF)和巨噬细胞CSF(M-CSk),观察它们对12例正常造血细胞体外增殖和克隆形成的影响,比较各自的作用特点以及对CSF的剂量依赖性,探讨CSF临床应用的意义。结果表明,IL-3和GM-CSF对造血前体细胞都有较强的促增殖作用,使细胞的DNA合成增加,但GM-CSF刺激CFU-GM生长的作用明显大于IL-3,表明GM-CSF在诱导粒巨噬细胞分化方面较强。G-CSF和M-CSF属     

集落刺激因子对造血的调控作用及其检测的临床意义

集落刺激因子(CSF)是指能够刺激多能造血干细胞和不同发育分化阶段的造血干细胞进行增殖、分化,并在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。CSF不仅在造血细胞的增殖和分化中起重要作用,而且也参与对成熟细胞的功能调节,促进炎症反应和抗感染免疫。CSF的研究对血液病的诊断、治疗具有重要意义。现就几个主要CSF对造血的调控作用及其检测的临床意义浅述如下。1CSF对造血的调控作用1.1粒-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)是一种能够刺激红系、粒系、单核系、巨系及嗜酸系祖细胞增殖、分化并形成集落的多集落造血生长因子,其造血调控作用主要是可以刺激骨髓细胞生成由粒系和单核巨噬细胞组成的集落,促进中性粒细胞和单核细胞祖细胞增殖、分化、成熟。1.2粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一种刺激粒细胞集落形成的系列特异性生长因子,对造血调控作用主要是促进粒系祖细胞的增殖和分化形成集落;诱导早期造血干/祖细胞从G0期进入G1-S期;与IL-3、GM-CSF及其他因子协同促进造血细胞的增殖与分化;诱导某些白血病细胞株分化成熟。1.3单核细胞集落刺激因子(M-CSF)又称CSF-1,由单核细胞、巨噬细胞、纤维母细胞、上皮细胞、血管内皮...     

重组人造血生长因子对急性髓细胞性白血病细胞体外增殖的影响

为观察4种重组人类集落刺激因子(rh-CSF)即白细胞介素3(IL-3)、粒巨噬细胞CSF(GM-CSF)、粒细胞CSF(G-CSF)和巨噬细胞CSF(M-CSF)和两种联合时对急性髓细胞性白血病(AML)患者细胞体外增殖的影响,为临床应用提供理论依据,作者对21例AML患者的白血病细胞在体外增殖能力及4种造血生长因子刺激反应进行了研究。结果麦明,4种CSF能诱导或促进2/3患者的AML细胞的增殖,以IL-3刺激作用最强(53％),G-CSF     

昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响

目的 研究昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响.方法 制备并体外培养大鼠骨髓造血干/祖细胞、巨噬细胞;制备昆布多糖作用后的骨髓巨噬细胞条件培养液,测定培养液中造血生长因子促红细胞生成素(EPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)表达及活性;测定昆布多糖条件培养液作用后造血祖细胞的集落产率.结果 经昆布多糖诱导的骨髓巨噬细胞培养上清液可显著提高骨髓造血祖细胞的集落产率;经昆布多糖诱导后,骨髓巨噬细胞的EPO、GM-CSF和IL-3的表达增高.结论 昆布多糖可刺激骨髓巨噬细胞造血因子表达增高,从而促进髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)、红系祖细胞(CFU-E)、粒一单系造血祖细胞(CFU-GM)的增殖分化.     

国内医学新闻

浙江中医学院人事处(310009)(?)锦新报道浙江省中医院等单位的科研人员从人胎肝得到提取液,并用祖细胞培养技术测定提取液中的集落刺激因子(CSF)和红细胞生成素(EPO)活性。 造血生长因子包括粒细胞、单细胞和粒单集落刺激因子(G-CSE、M-CSF和GM-CSF)、白介素-3(IL-3)、EPO等,是调节造血组织增殖和分化不可缺少的细胞因子,可用于治疗再障、骨髓异常增生综合征等疾病。由于基因重组CSF极为困难,     

IL-4抑制骨髓细胞分化产生嗜碱性粒细胞的机制研究

目的探究细胞因子IL-4抑制骨髓细胞分化产生嗜碱性粒细胞的能力及机制。方法采用IL-3诱导培养小鼠骨髓细胞,流式细胞术检测FcεRIα+ckit-CD49b+嗜碱性粒细胞以及FcεRIα+ckit-CD49b-新发现的单阳细胞群,并用Ki67检测其增殖状态。流式细胞术分选单阳细胞群后继续用IL-3诱导培养,以确定其后续分化能力。结果经IL-3诱导培养的骨髓细胞,3~4 d后开始有嗜碱性粒细胞出现,至第9天细胞比例达到高峰,然后开始下降。与野生型相比,IL-4缺陷的骨髓细胞诱导出的嗜碱性粒细胞,无论是在细胞比例或数目还是该细胞表达FcεRIα的平均荧光强度都显著增加。在IL-4缺陷型骨髓细胞诱导过程中加入外源重组IL-4可抑制嗜碱性粒细胞的产生;而在野生型骨髓细胞诱导过程中加入抗IL-4抗体则可增加嗜碱性粒细胞的产生,提示诱导过程中产生的IL-4具有负向调控嗜碱性粒细胞形成的作用。与野生型相比,IL-4缺陷鼠骨髓细胞经诱导可产生更多未曾报道过的表型为FcεRIα+ckit-CD49b-的单阳细胞群,且该细胞群的Ki67阳性率更高。单阳细胞群经IL-3刺激后可继续分化出嗜碱性粒细胞。结论IL-3诱导培养骨髓细胞过程中,内源产生的IL-4可抑制嗜碱性粒细胞的产生及其FcεRIα的表达水平。     

当归多糖对骨髓巨噬细胞的影响及其与造血调控的关系

目的研究当归多糖(APS)对骨髓巨噬细胞(BMMФ)生物活性的影响及其与造血调控的关系，从而阐明当归的活血机制。方法采用骨髓造血祖细胞和巨噬细胞体外培养，造血生长因子生物活性检测，免疫细胞化学，核酸探针原位杂交等技术。结果经APS诱导的BMMФ的培养上清液可提高髓系造血祖细胞的集落产率；经APS诱导后，BMMФ表达促红细胞生成素(EPO)、粒一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6)的蛋白水平有不同程度的提高；EPO mRNA和GM-CSF mRNA的表达水平和强度明显提高。结论APS可以直接和(或)间接地刺激造血诱导微环境中的BMM中，从基因水平和蛋白水平上促进造血调控因子的合成和分泌，进而促进髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)、晚期红系祖细胞(CFU-E)、粒单系造血祖细胞(CFU-GM)的增殖分化。     

rhG-CSF、rhGM-CSF在血液病治疗中的应用

<正>骨髓造血细胞的增殖分化有赖于各种造血因子的作用。其中作用于髓系造血细胞的生长因子主要为CSF(Colony Stimulating Factor,集落刺激因子),它是一组低分子量的酸性糖蛋白,依其作用靶细胞的不同可分为粒-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨核细胞集落刺激因子(M-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)等。利用基因重组技术,目前这类因子已能大量制备,供实验和临床应用。临床应用最多的造血因子包括重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)和重组人粒-单核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)。     

IL-33转基因小鼠骨髓造血干/祖细胞向髓系细胞分化的能力增强

目的利用IL-33转基因小鼠研究IL-33对造血干/祖细胞的增殖和分化影响。方法利用流式细胞仪分析IL-33转基因小鼠及同窝野生对照小鼠的外周血、脾脏、骨髓细胞的免疫表型及造血干细胞分化不同阶段细胞的数量变化;利用体外成克隆实验和细胞周期分析研究IL-33对于造血干细胞增殖能力的影响。结果与野生型小鼠相比,IL-33转基因小鼠B细胞和T细胞在外周血中都明显降低,粒细胞在外周血和骨髓中都有明显增加;IL-33转基因小鼠的骨髓造血干细胞和多能祖细胞数量减少,共同淋系祖细胞数量减少,共同髓系祖细胞和粒单系祖细胞数量增加;IL-33转基因小鼠的造血干细胞处于S-G2-M的细胞增多;体外单克隆实验发现IL-33转基因小鼠造血干细胞形成的集落数增加。结论 IL-33转基因小鼠造血干细胞增殖能力增强,更易向髓系细胞分化。     

重组人白细胞介素3对健康恒河猴造血功能作用的研究

本文研究ｒｈＩＬ－３对健康恒河猴的造血功能作用。体外实验结果表明ｒｈＩＬ－３能有效刺激造血祖细胞的增殖和分化，其中对嗜碱和嗜酸细胞比对中性粒细胞更显著。ｒｈＩＬ－３静脉注入后，使周围血白细胞升高为注射前的２．２倍，嗜碱和嗜酸粒细胞分别为注射前的１７．５倍和９．９倍，中性粒细胞轻度升高为注射前的２．７３倍，对红细胞和血小板无明显影响。注射７天后血清中ｒｈＩＬ－３抗体显著增高，影响其效果。     

当归多糖诱导胎儿胸腺细胞、脾细胞表达GM-CSF、IL-3的实验研究

目的：研究“补血活血”要药当归的主要有效成分-当归多糖（APS）对胎儿胸腺细胞、脾细胞表达造血生长因子GM-CSF、IL-3的影响。方法：采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学、核酸探针原位杂交等实验技术。结果：APS诱导的胸腺细胞、脾细胞培养上清液可促进早期造血祖细胞CFU-Mix增殖分化；APS诱导可促进胸腺细胞、脾细胞表达GM-CSF、IL-3蛋白及mRNA。结论：APS可促进淋巴细胞表达造血生长因子GM-CSF、IL-3，进而促进人早期造血细胞发生。     

小鼠颌下腺组织培养上清液促进粒-单系和巨核系造血的实验研究

目的　证实颌下腺是否合成影响造血的细胞因子 ,并探讨其对粒 -单系和巨核系造血祖细胞增殖分化有何影响 ,为重新认识颌下腺的生理功能提供实验证据。方法　采用造血祖细胞体外培养和流式细胞术检测 CD13膜抗原及细胞周期 ,研究小鼠颌下腺组织培养上清液 (SGCM)对小鼠粒 -单系和巨核系造血发生的影响。结果　 SGCM对粒 -单系祖细胞 (CFU- GM)集落生长有明显促进作用 ,能明显促进巨核系造血祖细胞 (CFU- Meg)集落生成 ,而且雄性 SGCM刺激活性高于雌性 SGCM,IL- 3与雌性 SGCM有叠加作用 ,贫血雄性 SGCM对 CFU-GM和 CFU- Meg的刺激活性高于正常小鼠 ,SGCM能促进小鼠骨髓细胞进入增殖活跃期 (S/G2 )。结论　颌下腺能合成与粒 -单系、巨核系造血相关的造血因子。提示颌下腺与造血调控可能有关     

当归多糖对人红系造血祖细胞增殖的影响及其机理研究

采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术，研究当归多糖（AP）对人红系造血祖细胞（BFU-E，CFU-E）增殖调控的影响及其机理，结果表明，AP能显著促进BFU-E，CFU-E的集落形成/经AP诱导制备的脾细胞，胸腺细胞和骨髓基质细胞培养上清液能提高BFU-E的集落产率；AP能协同IL-3和红细胞生长素（Epo)促进BFU-E生长，研究提示，AP有可能直接刺激BFU-E，CFU-ZE增殖。亦可能通过促进机体产生红系造敌国生长因子和/或协同这些因子的作用等途径。进而促进机体的红系血发生。     

人胎肝造血生长因子对造血祖细胞的刺激增殖作用

将胎肝提取液经超滤后取中分子蛋白(MMWP)和低分子蛋白(LMWP),用祖细胞培养方法检测其造血生长因子活性。结果显示MMWP具有刺激多向祖细胞(CFU-Mix)、粒单祖细胞(CFU-GM)和红系祖细胞(CFU-E)增殖的白介素-3(IL-3)、粒单集落刺激因子(GM-CSF)和红细胞生成素(Epo)活性。以重组的IL-3、GM-CSF和Epo作标准对照,初步测定每毫升MMWP约含12.5μgIL-3、10~5UGM-CSF和500UEpo。而LMWP在祖细胞培养中仅有少数集落生长,但无抑制现象出现。     

重组人白细胞介素3对健康恒河猴造血功能作用的研究

本文研究ｒｈＩＬ－３对健康恒河猴的造血功能作用。体外实验结果表明ｒｈＩＬ－３能有效刺激造血祖细胞的增殖和分化，其中对嗜碱和嗜酸细胞比对中性粒细胞更显著。ｒｈＩＬ－３静脉注入后，使周围血白细胞升高为注射的２．２倍，嗜碱和喊酸粒细胞分别为注射的１７．５倍和９．９倍，中性粒细胞轻度升高为注射前的２．７３倍，对红细胞和血小板无明显影响。注射７天后血清中ｒｈＩＬ－３抗体显著增高，影响其效果。     

白细胞介素3受体系统及转录因子与急性髓系白血病关系的研究进展

造血干细胞的自我更新以及定向分化能力,受多种造血生长因子的调控,白细胞介素(IL)3、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、IL-5在其中发挥重要的作用,这些细胞因子与靶细胞表面受体结合通过激活下游信号通路发挥生物学功能。研究表明急性髓系白血病患者中存在IL-3、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子及其受体的异常表达且常伴有髓系相关的转录因子的突变与功能失调。因此,研究者推测急性髓系白血病分化受阻可能与IL-3受体系统的异常表达有关,而后者又受髓系相关的转录因子的表达调控。     

人GM-CSF cDNA的分离和鉴定

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor,GM-CSF、是由活化T细胞产生的一种淋巴因子,它可刺激中性粒细胞,巨噬细胞和嗜酸性粒细胞的祖细胞增殖和分化,在造血系统中起重要的调节作用。为进行GM-CSF的基因工程,我们对人GM-CSF的cDNA进行     

白细胞介素-4对支气管上皮细胞表达嗜酸性粒细胞趋化因子-3的影响

目的:研究嗜酸性粒细胞趋化因子-3(eotaxin-3)在支气管上皮细胞的表达以及Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)对其表达的调节,探讨支气管上皮细胞和IL-4在气道变态反应性炎症中的作用.方法:以BEAS-2B细胞和NHBE细胞为研究对象,用IL-4刺激细胞24 h,RT-PCR法检测eotaxin-3在mRNA水平的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中eotaxin-3蛋白的表达.结果:未经处理的支气管上皮细胞不表达eotaxin-3,用IL-4刺激细胞24 h后,可见mRNA和蛋白水平的eotaxin-3的明显表达,IL-4的这种诱导作用呈浓度依赖性增强.结论:支气管上皮细胞不仅是一种屏障细胞,也是一种效应细胞,在炎症介质IL-4的刺激下能表达eotaxin-3,可能是其参与支气管哮喘嗜酸性粒细胞炎症的机制之一.     

补肾益髓法对辐射损伤小鼠造血生长因子的影响

目的探讨补肾益髓法的代表药益髓生血颗粒促进骨髓造血的机制。方法 78只雄性昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、益髓生血颗粒高、中、低剂量组,每组13只。采用60Co-γ射线全身一次性照射造成小鼠骨髓急性损伤模型。以益髓生血颗粒高、中、低3个剂量及重组人粒细胞刺激因子分别作用于骨髓急性损伤小鼠14 d后,采用放射免疫法检测外周血及骨髓中干细胞因子(SCF)、白细胞介素-3(IL-3)、粒-单系祖细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒系祖细胞集落刺激因子(G-CSF)的含量。结果与模型组相比,益髓生血颗粒高剂量组血中GM-CSF、骨髓中IL-3和SCF含量明显升高(P0.05),中剂量组血中GM-CSF、骨髓中IL-3含量明显升高(P0.05),低剂量组血及骨髓中GM-CSF、骨髓中IL-3和SCF含量明显升高(P0.05)。结论补肾益髓法可增加辐射损伤小鼠骨髓微环境中造血生长因子GM-CSF、IL-3、SCF的含量,从而有效促进髓系造血。     

重组人干细胞因子与重组人粒细胞集落刺激因子联合用药的猴毒性研究

重组人干细胞因子(rhSCF)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG—CSD是临床常用的造血生长因子(HGF)，实验提示rhSCF和rhG—CSF与IL3、IL-6、粒-巨噬细胞刺激因子、Epo等造血生长因子的各种联合应用有增效作用。rhSCF和重组人粒／单集落刺激因子(rhGM—CSF)均能刺激CFU-GM生成，