NF-κB在TNF-α和血管紧张素Ⅱ致内皮细胞凋亡中的作用

目的:了解NF-κB在TNF-α和血管紧张素Ⅱ导致内皮细胞凋亡中的作用。方法:用浓度为10 ng/ml TNF-α和浓度为1μmol/L血管紧张素Ⅱ分别干预内皮细胞,TUNEL法检测细胞的凋亡情况、EMSA检测NF-κB的活性和Western-blot检测IκBα的表达;用浓度检测细胞的凋亡、NF-κB的活性和IκB的表达。结果:TNF-α和血管紧张素Ⅱ显著引起了细胞的凋亡、IκBα蛋白的裂解和NF-κB的激活,用PDTC预处理后,在NF-κB活性减弱的同时抑制了细胞的凋亡。结论:在内皮细胞中,TNF-α和血管紧张素Ⅱ通过裂解胞浆内的IκBα蛋白进而激活NF-κB引起的细胞凋亡。     

电离辐射对EL-4细胞Caspase-3蛋白表达的影响

Caspase-3（cysteinyl aspartic acid protease-3）是人类白细胞介素1β转化酶家族的重要成员之一,是细胞凋亡过程中的重要激酶.在凋亡的执行阶段,Caspase-3负责对全部或部分关键性蛋白的酶切（激活或灭活）.许多凋亡调节因子最终作用于下游效应器Caspase-3,形成凋亡特征性改变[1].电离辐射可诱导多种正常组织和肿瘤组织发生凋亡.笔者采用流式细胞术系统研究了不同剂量X射线对Caspase-3蛋白表达的影响,从而为探讨电离辐射引起细胞凋亡机制提供一定的科学依据.     

As2O3治疗急性早幼粒细胞白血病的作用机制

目的：研究三氧化二砷（As2O3）治疗M3型急性早幼粒细胞白血病（APL）的作用机制。方法：将培养的NB4细胞加入不同浓度（0．5μM,1μM,1．5μM,2μM,3μM）的As203作用48h后,采用MTT比色法观察不同浓度As2O3对NB4细胞活力的影响,用流式细胞术及Caspase-3活性检测试剂盒检测As2O3引起NB4细胞凋亡情况,用westernBlot检测As203对Caspase-3蛋白的作用。结果：MTT比色法结果显示,As2O3明显抑制NB4细胞增殖,且呈浓度依赖性,2μMAs2O3孵育48hNB4细胞活力下降约50％;流式细胞术结果显示,2μMAs2O3作用48h后,NB4细胞凋亡率显著增加,且以早期凋亡率增加为主（P〈0．01）;同时As2O3处理后的NB4细胞Caspase-3活性明显增加,为对照组的2．2倍（P〈0.01）;WesternBlot结果显示,As2O3显著增加Caspase-3总蛋白及其激活型cleaved—Caspase-3（p17）蛋白表达量。结论：As2O3可诱导NB4细胞凋亡,此作用与激活依赖Caspase-3的细胞凋亡通路相关,但是具体是通过何种凋亡通路,以及参与其中的信号分子需要进一步验证。     

胚胎发育的软骨细胞凋亡

细胞凋亡 (apoptosis)是一种独特的细胞死亡模式 ,在形态上表现为胞核染色质固缩、分离及降解 ,胞质凝缩 ,最后细胞裂解 ,但裂解产物被细胞膜包裹形成凋亡小体 ,凋亡小体被周围细胞摄取并在它们的溶酶体内消化 ,所以不会引起炎症反应。凋亡在生物化学上表现为核小体连接处的DNA双链被切断 ,结果形成许多 180bp～ 2 0 0bp及其倍数的寡核苷酸片段 ,电泳时出现梯形DNA条带 (DNAladder)。在生物体的生长发育及正常组织的平衡稳定中起重要作用 ,但它也出现于许多病理状态下 ,参与了许多疾病的发生与发展过程〔1〕。现就软骨胚胎发育及软骨细…     

UVA诱导的细胞凋亡通过神经酰胺和JNK信号通路

目的 探讨神经酰胺和JNK信号通路在UVA诱导的细胞凋亡中的作用。方法 分别用MTT法和DNA梯形条带检测细胞死亡率和细胞凋亡；Western blot分析JNK信号通路的激活情况。结果 UVA照射后，正常的淋巴细胞JY出现明显的细胞凋亡，而MS 1418细胞则没有。MS 1418来自D型Niemann-Pick病人，酸性鞘磷脂水解酶遗传性缺陷，导致神经酰胺产生受阻。给予外源性神经酰胺，两种细胞都出现明显的细胞凋亡，表明UVA诱导的细胞凋亡是通过神经酰胺介导的。UVA激活了JY而不是MS 1418细胞的JNK信号通路；给予外源性神经酰胺，两种细胞的JNK信号通路都被激活，说明神经酰胺位于JNK信号通路的上游。结论 UVA诱导的细胞凋亡依赖神经酰胺和JNK信号通路。     

SIRT1在血管相关性疾病中的研究进展

沉默信息调节因子2相关酶类1（ silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1）是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ nicotinamide-adenine dinucleotide, NAD）的去乙酰化酶,其可对组蛋白和非组蛋白发挥去乙酰化作用从而调节能量代谢、细胞衰老及凋亡等众多生命过程。在多种血管相关性疾病中,SIRT1通过对相关因子去乙酰化增加细胞能量供应、减少细胞凋亡、减轻炎症反应、抵抗氧化应激、改善血管内皮细胞功能,从而在血管相关性疾病中发挥重要作用。该文旨在对SIRT1在缺血性脑卒中、动脉粥样硬化及肿瘤这3种常见血管相关性疾病中的作用的研究进展及相应的信号通路进行综述。     

PB231诱导K562细胞凋亡的初步研究

 目的研究PB231诱导K 562细胞凋亡作用,探讨PB231的抗肿瘤机制.方法采用荧光显微镜观察细胞形态学变化,MTT法测定PB231对K 562细胞生长抑制作用,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA裂解.结果K562细胞经PB31处理后,在倒置光显微镜下可见细胞变形和凋亡小体形成;荧光显微镜下可见染色质凝集.MTT法检测其IC50值为5×10-5M.琼脂糖凝胶电泳呈典型的"DNA Ladder".结论PB231可诱导K562细胞发生凋亡.这可能是其抑制K562细胞生长的作用机理之一.     

染色质结构影响肿瘤细胞辐射敏感性的研究进展

染色质结构修饰在DNA复制、转录、修复和重组的过程中发挥重要作用。近年来研究表明,染色质结构修饰不仅影响电离辐射后的DNA损伤的产生并且还参与多个DNA损伤反应（DDR）的信号通路。本文就染色质结构及其在DNA损伤修复中的作用,特别是特征性染色质结构、组蛋白修饰对肿瘤细胞辐射敏感性的影响进行了综述。     

125I粒子照射诱导人前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨^125I粒子持续低剂量率照射诱导人前列腺癌细胞凋亡的作用机制。方法用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪分析^125I粒子持续低剂量率照射对PC3细胞的凋亡诱导作用，检测天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶Caspase-3活性来观察其对PC3细胞的凋亡诱导途径，并通过间接免疫荧光技术检测其对Bcl-2表达的影响。结果DNA琼脂糖凝胶电泳可观察到清晰的“DNA梯度”，流式细胞仪检测^125I粒子持续低剂量率照射对PC3细胞具有明显的凋亡诱导作用。Caspase-3活性检测表明，Caspase-3活性无明显变化。流式细胞仪分析表明Bcl-2的表达随^125I粒子剂量的增加而下降。结论^125I粒子持续低剂量率照射可诱导PC3细胞凋亡，其诱导凋亡与Bcl-2表达有关，与Caspase-3活性无关。     

PI3K/Akt与胶质瘤辐射抗性

恶性脑胶质瘤的术后治疗是患者预后生存期延长的关键,如何提高肿瘤组织的辐射敏感性,增强正常组织的辐射抗性是当前肿瘤放射生物学及临床放疗研究的热点。研究资料表明,PI3K/Akt抗细胞凋亡通路的激活提高了部分细胞的辐射抗性,特别在表皮细胞受紫外线照射的研究中提示,辐射产生的活性氧可能是该通路激活的原因之一;电离辐射可能诱导相关的细胞因子通过激活PI3K/Akt通路介导胶质瘤细胞的辐射抗性;PI3K及其相关酶可能通过DNA修复途径发挥抗辐射作用。PI3K/Akt通路的研究可为放射治疗胶质瘤提供新型的增敏药。     

粒-巨噬细胞集落刺激因子通过蛋白激酶Cα途径挽救辐射导致的白血病细胞TF-1的凋亡

蛋白激酶C(PKC)作为细胞内的传递介质参与了一系列细胞活动过程。PKC能激活与抗辐射有关的蛋白,这意味着辐射介导的细胞反应中存在着PKC信号通路。细胞凋亡对PKC激活或抑制的不同反应是不同异构体的表达所致。为了证实PKC异构体在凋亡中的作用,对辐射介导细胞凋亡在用与不用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)时,PKC异构体在细胞内的分布和量的变化进行了研究。方法:TF-1细胞用含有20%的胎牛血清常规培养。蛋白定量用Pierce试剂盒。细胞裂解,分离,抽提蛋白。免疫组化分析:蛋白样品变性后经电泳转移到硝酸纤维膜上,与兔抗鼠PKC抗体…     

Gadd45与基因组稳定性

Gadd45基因是生长抑制及DNA损伤诱导基因家族中的一员,是电离辐射效应基因之一,在细胞周期调控、DNA损伤修复及细胞凋亡过程中发挥重要作用,这使它成为维持基因组稳定性的重要基因,在肿瘤细胞存活、凋亡信号通路中发挥错综复杂的作用,从而参与肿瘤的发生和发展.     

醋酸铅对人肾小球系膜细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的探讨醋酸铅对人肾小球系膜细胞(HRMC)凋亡及Caspase-3表达的影响。方法取对数生长期的HRMC,分别采用含0、5、10、20μmol/L醋酸铅的完全培养液培养,于6、12、24、48h后以MTT法检测细胞增殖情况,并于培养24h后采用Hochest33342-PI染色法观测细胞的形态学变化,RT-PCR检测Caspase-3 mRNA的表达,细胞免疫化学法和Western blotting检测Caspase-3蛋白的表达。结果与对照组(0μmol/L)相比,5、10、20μmol/L的醋酸铅可不同程度地抑制HRMC的增殖(P<0.01)。Hochest33342-PI染色显示醋酸铅作用后HRMC呈凋亡形态学改变,细胞数量减少,核染色质凝集,核膜破裂。RT-PCR显示醋酸铅作用后Caspase-3 mRNA表达升高。细胞免疫化学和Western blotting检测显示醋酸铅作用后Caspase-3蛋白表达升高。结论醋酸铅可促进人肾小球系膜细胞凋亡,Caspase-3参与了该过程。     

Caspase-3在翼状胬肉中的表达及临床意义

目的探讨Caspase-3在翼状胬肉中的表达及发病过程中的作用。方法采用免疫组化Elivision法检测20例翼状胬肉、10例正常结膜中Caspase-3的表达。结果20例翼状胬肉中Caspase-3的阳性表达率为45%(9/20),正常结膜中Caspase-3的阳性表达率为90%(9/10)。Caspase-3阳性表达两组间差异有显著意义,P<0.05。结论Caspase-3在翼状胬肉中的低表达,提示细胞凋亡和增殖异常,可能与翼状胬肉的发生、发展有关。     

p53在调节细胞周期阻滞和细胞凋亡中的作用及其机制

p53作为抑癌基因,在各种应激情况下(包括电离辐射所致DNA损伤、核苷酸缺失、低氧或癌基因激活)调控细胞周期进程和细胞凋亡过程。本文综述了p53及其下游分子在细胞周期和细胞凋亡中的作用,在此基础上探讨p53在选择细胞周期阻滞和细胞凋亡中的影响因素。     

细胞凋亡及相关基因

细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)作为一种细胞的死亡方式在近几年越来越得到医学研究者的重视和兴趣。所谓细胞凋亡是指细胞在基因的调控下 ,主要通过激活内源性ＤＮＡ内切酶的活性而发生的细胞自然死亡过程〔1〕,是生物体以一种与细胞有丝分裂相反的方式调节细胞群体相对衡定的主要方式。1　细胞凋亡的形态和生化特征　　凋亡与坏死 (ｎｅｃｒｏｓｉｓ)不同 ,凋亡是一种生理性死亡过程。其特征为细胞首先变圆 ,随即与邻近细胞脱离 ,胞浆收缩 ,内质网扩张呈泡状并与胞膜融合 ;核染色质密度增高聚集在核膜周边 ,呈半月形 ,核仁裂解 ;进而胞膜…     

糖尿病血管钙化中PI3K/AKT GSK信号通路调控机制的研究进展

糖尿病血管钙化是2型糖尿病患者疾病发生、发展过程的一个重要环节，是诱发糖尿病心、脑血管并发症的诱因之一，也是预测糖尿病患者心脑血管并发症发生和死亡的独立危险因素。糖尿病血管钙化是一个主动的、可调控的复杂病理生理过程，类似于骨形成的过程，并伴随着血管平滑肌细胞的表型转换及向成骨分化的生理过程。在血管平滑肌细胞的成骨分化过程中可能伴随着PI3K/AKT GSK-3β的激活，从而导致wnt/β-catenin信号通路的异常激活，这可能在糖尿病血管钙化中扮演着重要作用。     

恶性肿瘤中Yes相关蛋白与p73作用关联的研究进展

Yes相关蛋白(Yes associated protein,YAP)是Hippo信号通路最主要的调控因子,具有促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的作用。在人类乳腺癌、肺癌、结直肠癌、胃癌、卵巢癌等多种肿瘤中YAP表达明显上调。而在另一方面,当DNA损伤时,作为转录辅助激活因子的YAP增强p73相关凋亡基因的转录,具有促进凋亡作用。在细胞内环境的维持与调控过程中,YAP所发挥的作用截然不同。本文主要介绍Hippo信号通路、YAP、p73在恶性肿瘤中的作用,以及YAP与p73在肿瘤细胞中的具体调控机制和作用。     

p53在调节细胞周期阻滞和细胞凋亡中的作用及其机制

p53作为抑癌基因，在各种应激情况下（包括电离辐射所致DNA损伤、核苷酸缺失、低氧或癌基因激活）调控细胞周期进程和细胞凋亡过程。本综述了p53及其下游分子在细胞周期和细胞凋亡中的作用，在此基础上探讨p53在选择细胞周期阻滞和细胞凋亡中的影响因素。     

白介素17A抑制博来霉素诱导的小鼠NIH/3T3细胞凋亡

目的探讨细胞因子白介素17A对于博来霉素诱导的小鼠成纤维细胞NIH/3T3凋亡的影响。方法使用博来霉素诱导细胞凋亡,使用TUNEL荧光染色试剂盒检测细胞凋亡情况,使用Western blot检测Caspase-3以及Bcl-2的蛋白表达情况。结果博来霉素可以促进NIH/3T3细胞DNA发生断裂,促进活性Caspase-3的蛋白表达,降低Bcl-2蛋白含量;白介素17A可以抑制NIH/3T3细胞DNA断裂,抑制活性Caspase-3的蛋白表达,促进Bcl-2的蛋白含量。结论博来霉素可以诱导小鼠NIH/3T3细胞发生凋亡,白介素17A可以抑制博来霉素诱导的细胞凋亡。