蔗糖对悬浮培养肉苁蓉细胞的生长及苯乙醇苷合成的影响

通过研究悬浮培养肉苁蓉细胞生长、蔗糖消耗的关系,结果表明蔗糖是限制细胞生长的主要因素.在不同的蔗糖浓度下,比较肉苁蓉细胞干重和主要活性成分苯乙醇苷的合成情况,在30g/L的蔗糖浓度下最有利于肉苁蓉细胞的生长,最大生物量达10.84 g/L,苯乙醇苷最高含量可达干重的16.32%,产量为1296.04mg/L.     

三叶半夏细胞悬浮培养和植株再生的研究

三叶半夏幼嫩叶片在MS+2,4-D2.0mg/L+BA0.5mg/L培养基上一个月内可以诱导出愈伤组织.取颜色鲜黄的愈伤组织进行悬浮振荡培养,经3～4次继代培养得到分散性好的细胞悬浮系.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养12～16d达对数生长期,细胞鲜重在第18d达到最大值.悬浮液pH值的变化在对数生长期同生长曲线一致.将细胞悬浮液过滤得到的小细胞团接种于MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L分化培养基上,40d分化出小植株.     

基于无外源激素下肉苁蓉细胞悬浮培养的研究

设计了不添加外源激素进行肉苁蓉细胞悬浮培养的方案,考察了细胞生长及其次生代谢产物苯乙醇苷、总黄酮和肉苁蓉多糖的变化情况.结果表明:在无外源激素悬浮培养下,肉苁蓉细胞的生长与次生代谢产物的合成与添加外源激素的相类似,细胞仍能快速生长及产生代谢产物,实现了不依赖外源激素的肉苁蓉细胞生长与次生代谢产物的积累,细胞培养成本降低,且安全、可食用.     

胡萝卜愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养研究

分别以胡萝卜子叶、下胚轴和直根形成层为外植体诱导出愈伤组织,并建立细胞悬浮系.实验结果表明:胡萝卜下胚轴是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的理想外植体;诱导松散型愈伤组织的最佳激素浓度配比是1.0mg/L2,4 D+0.5mg/LKT;细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为1.125×104个/mL～2.325×104个/50mL时,7d～9d为对数生长期;继代培养4代～5代时,可得到稳定的悬浮细胞系.     

酵母提取物对水母雪莲悬浮培养合成紫丁香苷的影响

研究了酵母提取物诱导的水母雪莲悬浮培养时紫丁香苷生产和相关次级代谢酶的活性.酵母提取物促进了紫丁香苷的生产,最优的添加方法是在培养15 d时添加1.5%的酵母提取物.最大紫丁香苷产量达671.9 mg/L,是对照实验的3.25倍.诱导子处理后G6DPH、PAL和POD活性显著增加,当处理6 h后酶活性达到最大值.     

诱导子对蜀葵悬浮细胞、不定根培养的影响

为探究诱导子对蜀葵(Alcea rosea)细胞次生代谢产物的影响,分别使用茉莉酸甲酯、水杨酸、酵母提取物3种诱导子处理快速生长期后期的蜀葵悬浮细胞.结果表明:茉莉酸甲酯和水杨酸均会抑制悬浮细胞和不定根的生长,而低浓度的酵母提取物则会促进其生长;茉莉酸甲酯对于悬浮细胞和不定根中的糖醛酸含量没有影响,而水杨酸和酵母提取物均对其糖醛酸含量有促进作用,且酵母提取物效果更好;3种诱导子均能有效提高悬浮细胞和不定根中的总黄酮含量,其中以茉莉酸甲酯效果最好,水杨酸次之.这些结果表明,3种诱导子对蜀葵悬浮细胞和不定根培养物都能产生影响,但综合考虑酵母提取物的效果最为明显,水杨酸次之.     

红豆杉细胞聚集体悬浮培养生产紫杉醇

建立了中国红豆杉(Taxuschinensis)细胞聚集体两步法悬浮培养生产紫杉醇的培养体系.红豆杉细胞于含LH1g/L,NAA0.1mg/L,2,4-D0.5mg/L及6-BA0.8mg/L的细胞聚集体形成的培养基中生长并形成聚集体,10d后转入生产培养,较大细胞聚集体的生物量比和紫杉醇产量分别较对照组提高了53.7%和82.1%;提高细胞聚集体的生物量比能显著增加紫杉醇产量.四种基本培养基中B5最适合诱导细胞聚集体的形成.生长培养12d后细胞悬浮培养物按1∶1(体积比)直接转入生产培养对细胞生长、细胞聚集体和紫杉醇形成最有利.在100μmol/L茉莉酸甲酯作为诱导子下本体系紫杉醇产量较对照组提高了一倍.     

悬浮培养及培养条件对灵菊七细胞中可溶性多糖合成的影响

以灵菊七叶片诱导的愈伤组织为材料进行悬浮培养,研究培养条件对愈伤细胞、细胞内可溶性多糖合成的影响。结果表明,在培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA中悬浮细胞表现出对数生长期最长、可溶性多糖含量最高的特点;离子交换层析纯化结果显示,悬浮细胞中可溶性多糖分了与植株中含有相同的3种主要多糖。培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA,促进可溶性多糖的生物合成,最适于灵菊七愈伤细胞的悬浮培养。本研究初步建立了灵菊七愈伤细胞悬浮培养快速获取可溶多糖的方法,为深入研究灵菊七多糖药理活性奠定了基础。     

生化诱导子对红法夫酵母生长和类胡萝卜素合成的影响

以贝壳状革耳菌(Panus conchatus)、杂色云芝(Coriolus Versicolor)制备真菌诱导子和硝酸铈、氯化镉制备化学诱导子,研究了其对红法夫酵母生长和类胡萝卜素合成的影响.结果表明:真菌诱导子对红法夫酵母菌体生长、总类胡萝卜素和虾青素合成有显著促进作用,对虾青素含量的影响并不显著,化学诱导子对生长略有抑制但能 促进类胡萝卜素尤其虾青素的大量合成.P.conchatus和C.Versicolor诱导子在添加量分别为30 mg/L和10 mg/L时生物量最高,分别比对照提高了69.81%和68.87%,P.conchatus、C.Versicolor、硝酸铈和氯化锅诱导子在添加量分别为30、10、0.16和0.12 mg/L时总类胡萝卜素产量最高,分别比对照提高了47.3%、26.2%和44.9%、52.3%.在最佳浓度(30 mg/L和10 mg/L)下P.conchatus和C.Versicolor诱导子使得虾青素产量分别比对照提高了67.9%和50.1%.对虾青素含量增加并不显著.在最佳浓度(0.16 mg/L和0.12 mg/L)下硝酸铈和氯化镉诱导子使得虾青素产量和含量分别比对照提高了73.8%、60.1%和77.4%、60.6%.     

蔗糖浓度和外源2,4-D与KT浓度对三七幼叶细胞悬浮培养影响的研究

将云南文山三七幼叶诱导出愈伤组织,并采用悬浮震荡培养三七细胞.细胞培养基质中的碳源浓度和激素浓度对培养细胞生长的影响进行研究,实验结果显示:MS+1.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L KT+28 g/L蔗糖,pH为5.8的培养基最适合文山三七幼叶诱导得到的愈伤组织细胞悬浮的培养.     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

中国红豆杉悬浮细胞培养动力学的研究

考察了中国红豆杉悬浮细胞培养中细胞生长的动态变化，培养基中主要营养成分的消耗，细胞的氧消耗速率，以及次级代谢产物紫杉醇的生产状况。实验结果表明，细胞比生长速率为０．１２９／ｄ，紫杉醇的积累与细胞生长呈部分相关在，培养静止期达到高峰。     

不同培养方式的红豆杉细胞悬浮培养比较研究

进行了批式培养与补料批式培养下的细胞生长及紫杉醇合成动力学比较研究，并优化了红豆杉细胞补料批式培养条件。在批式培养过程中紫杉醇合成在24d达到最大，为4.3mg/L。补料批式培养延长了细胞的生长时间，大幅度提高了细胞干重及紫杉醇的含量。培养条件优化后，最高紫杉醇含量达至11.3mg/L。     

云南红豆杉细胞培养和紫杉醇生产

研究了在固体和液体培养条件下云南红豆杉 (Taxusyunnanensis)细胞系TY6生长和紫杉醇积累的动态及培养基中无机氮源形式对其生长的紫杉醇形成的影响 .结果表明 ,在固体和液体培养条件下 ,云南红豆杉细胞的生长和紫杉醇积累动态相似 ,但液体培养时细胞生长周期缩短了 7d,紫杉醇含量降低了 1倍 ;新形成的细胞需要经过一段时间生长后才有较高的紫杉醇合成能力 ;培养基中硝态氮浓度高有利于细胞生长 ,铵态氮浓度高有利于紫杉醇形成 ;在培养第 1 2d时用铵态氮培养基更换硝态氮培养基可使悬浮细胞的紫杉醇产量达到 8.5mg·L- 1 ,比对照高 1 .6倍     

Morphological Transformation of Plant Cells in vitro and Its Effect on Plant Growth

Enhancement of cell growth in suspension cultures is urgently needed in plant cell culture engineering. This study investigates the relationship between morphological transformation and cell growth in callus and suspension cultures of saffron cells belonging to the cell line C96 induced from Crocus safivus L In the suspension culture, an unbalanced osmotic pressure between the intracell and extracell regions induced a large morphological transformation which affected normal division of the saffron cells. An increase in osmotic pressure caused by the addition of sucrose inhibits the vacuolation and shrinkage of cytoplasm in the cells. As the sucrose concentration increases, the total amount of accumulated biomass also increases. Besides the sucrose concentration, increased ionic strength and inoculation ratio also help restrain to a large extent the vacuolation and shrinkage of the cytoplasm in the suspended cells, which results in increased biomass. The conditions for optimal biomass are： Murashige and Skoog＇s （MS） medium with 40 g/L sucrose and 60% （v/v） inoculation ratio.     

杜仲细胞的悬浮培养

杜仲外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ的培养基上可诱导出生长速度快、离散性好、适合于悬浮培养的愈伤组织；愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的液体培养基上进行振荡培养，经３～４次继代，即可建立起悬浮细胞系；悬浮细胞的形状为长形、椭圆形、圆形和“月牙”形。     

巴戟天细胞悬浮培养生产蒽醌类物质的研究

巴戟天细胞在含NAA0．25mg／L，Kt0．025mg／t,的B5培养基中进行悬浮培养，细胞比生长速率为0．140天^-1，倍增时问为118．8小时，蒽醌含量可达151．27mg／L，为细胞干重的0．81％。巴戟天细胞中蒽醌含量是巴戟天根的2．17倍，蒽醌的比生产速率是巴戟天根的79．3倍。在固体培养愈伤组织中其蒽醌含量和比产率则分别是巴戟天根的6．1倍和209倍。