过敏性紫癜患儿Th17、Treg 细胞及IL-17、IL-23 水平的测定

目的:观察过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)患儿急性期及恢复期Th17、Treg 细胞及IL-17、IL-23水平变化,以便更好地认识HSP 的免疫学发病机制,为HSP 的治疗提供帮助。方法:采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测HSP 患儿65 例和健康对照组儿童30 例外周血中Th17 细胞和Treg 细胞比例;采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定其血浆中IL-17、IL-23 水平。结果:HSP 急性期组Th17、Th17/ Treg 细胞及IL-17、IL-23 水平高于正常对照组(P<0.05),恢复期组较急性期组降低(P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.05)。HSP 急性期组Treg 水平低于正常对照组(P<0.01),恢复期组较急性期组升高(P<0.01),但是仍低于正常对照组(P<0.01)。单纯型、腹型和其他类型HSP 患儿Th17、Treg、Th17/ Treg 及IL-17、IL-23 水平相同(P>0.05)。HSP 急性期患儿Th17 细胞比例与IL-17 水平呈正相关(r =0.880,P<0.01);HSP 急性期患儿IL-23 水平与Th17 细胞比例、IL-17 水平呈正相关(r =0.838 或r =0.877,P<0.01)。结论:Th17、Treg、Th17/ Treg、IL-17 和IL-23 共同参与HSP 的发病,但在单纯型、腹型和其他类型中的水平无明显差异,值得深入研究。     

Th17/Treg在中性粒细胞哮喘发病中的作用及临床意义

目的:分析Th17/Treg在中性粒细胞哮喘发病中的作用及临床意义.方法:选择2021年3月至2022年3月于医院治疗的支气管中性粒细胞哮喘患者50例,记为观察组.另选择同期于本院进行体检的健康志愿者50例,记为对照组.检测支气管哮喘患者缓解期、急性期及对照组Th17细胞、Treg细胞及其相关细胞因子白细胞介素(IL)-22、IL-21、IL-17、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,并计算Th17/Treg.比较两组患者Treg细胞、Th17细胞、Th17/Treg及其相关细胞因子水平.比较支气管哮喘患者缓解期、急性期Treg细胞、Th17细胞、Th17/Treg及其相关细胞因子水平.评估观察组哮喘控制情况(ACQ),分析中性粒细胞哮喘患者ACQ评分与Treg细胞、Th17细胞、Th17/Treg的相关性.结果:观察组Th17细胞、Th17/Treg、IL-22、IL-21、IL-17水平显著高于对照组(P<0.05),观察组Treg细胞、IL-10、TGF-β1水平显著低于对照组(P<0.05).支气管哮喘患者急性期Th17细胞、Th17/Treg、IL-22、IL-21、IL-17水平显著高于缓解期(P<0.05),支气管哮喘患者急性期Treg细胞、IL-10、TGF-β1水平显著低于缓解期(P<0.05).支气管哮喘患者ACQ评分与Th17细胞、Th17/Treg呈正相关(P<0.05),与Treg细胞呈负相关(P<0.05).结论:在健康人群、中性粒细胞哮喘急性期及缓解期中Treg细胞、Th17细胞、Th17/Treg及其相关细胞因子存在差异,可作为中性粒细胞哮喘诊断、病情判断指标,为临床诊疗提供参考.     

血清25-羟基维生素D、Th17/Treg细胞失衡与新生儿缺氧缺血性脑病预后的相关性研究

目的:探究缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血清25-羟基维生素D[25(OH)D]及Th17/Treg细胞水平的变化及其与患儿预后的关系。方法:选取2019-01-2021-01本院收治的79例HIE患儿(HIE组),根据临床分度分为中度组(46例)和重度组(33例);根据HIE组患儿神经发育随访情况将其分为神经发育正常组(52例)和不良神经发育组(27例)。选取同时期本院健康新生儿79例为对照组。利用流式细胞术检测外周血中Treg细胞比率、Th17细胞比率并计算Th1/Th17细胞比率;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中25(OH)D、白细胞介素(IL)-17、IL-23及IL-10和转化生长因子-β(TGF-β)水平。Cox风险比例回归模型评估HIE患儿预后不良的影响因素;采用Pearson法分析Th17/Treg与25(OH)D之间的相关性。结果:与对照组相比,HIE组血清中IL-17、IL-23水平、Th17细胞比率及Th17/Treg细胞比率较高(P<0.05),25(OH)D、IL-10、TGF-β水平、Treg细胞比率较低(P<0.05);与中度组相比,重...     

Th17/Treg及其相关细胞因子在结肠癌中的表达并与肿瘤分期的相关性

研究结肠癌患者肿瘤组织中Th17细胞、Treg细胞及患者外周血中相关细胞因子的表达水平,探讨其表达与肿瘤分期的相关性及可能机制。运用流式细胞分析(FACS)技术检测30例结肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中Th17细胞及Treg细胞的比例;采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测20例结肠癌患者外周血中Th17、Treg相关细胞因子IL-23和IL-10的表达水平。结果显示结肠癌肿瘤组织中Th17细胞和Treg细胞的比例明显高于癌旁正常组织(P<0.05),进展期肿瘤组织中Treg细胞的比例高于早期(P<0.05),而Th17细胞的比例较早期无明显差异(P>0.05),进展期肿瘤组织中Th17/Treg细胞的比例比早期偏低(P<0.05)。结肠癌患者外周血中IL-23、IL-10的mRNA水平升高,与健康对照组差异明显(P<0.05),且进展期与早期结肠癌IL-10mRNA的表达水平差异显著(P<0.05),而IL-23mRNA在两组间无明显差异(P>0.05)。随着结肠癌病程的进展,肿瘤组织内Th17细胞及Treg细胞的比例逐渐升高,且Treg细胞比Th17细胞升高更加明显。相关细胞因子IL-23和IL-10在患者外周血中的变化趋势和Th17、Treg细胞在肿瘤组织中的变化趋势相一致,提示Th17、Treg细胞在结肠癌的表达可能与肿瘤免疫微环境中相关的细胞因子调节有关。     

原发性肾病综合征患儿外周血Th17与CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的水平

目的:观察原发性肾病综合征(PNS)患儿外周血Th17细胞和CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)及其相关因子的水平和功能,初步探讨其在儿童PNS发病中的作用。方法:PNS患儿分为单纯型肾病(SNS)20例、肾炎性肾病(NNS)15例;同时以20例健康体检儿童作为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞和Treg细胞比例;Real-time PCR法检测PBMC中RORC、IL-23p19和Foxp3 mRNA的表达;ELISA分别检测血清中IL-1β、IL-6、TGF-β1的水平。结果:SNS、NNS组患儿Th17细胞及RORC、IL-23p19 mRNA、IL-1β、IL-6的水平均明显高于正常组(P0.05),且NNS组患儿以上指标明显高于SNS组(P0.05);SNS、NNS组患儿Treg细胞、Foxp3 mRNA和TGF-β1水平的表达明显低于正常组(P0.05),其中两组疾病患儿血清TGF-β1的水平无统计学意义(P0.05),其余指标NNS患儿均明显低于SNS组(P0.05)。结论:Th17/Treg细胞功能失衡可能在儿童PNS的发病中起到重要作用,其失调程度可能与PNS的临床表现、对激素的敏感性、病理类型、及预后有关。     

慢阻肺急性加重期患者血清IL-37水平与免疫失衡的相关性

目的 观察血清白细胞介素-37(IL-37)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中表达情况,分析IL-37与患者免疫失衡的关系.方法 选取2019年1月至2020年12月本院收治的67例AECOPD患者,设为AECOPD组;另选取同期医院接收的67例慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者,设为COPD稳定期组;调查员询问并记录患者基线资料,于患者入院时检测血清IL-37水平及免疫失衡评估相关指标[辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)、CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞水平等],分析AECOPD患者血清IL-37水平与免疫失衡的关系.结果 AECOPD组患者血清IL-37水平高于COPD稳定期组,差异有统计学意义(P<0.05);AECOPD组患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞水平、Treg水平低于COPD稳定期组,CD8+T淋巴细胞水平、Th17、Th17/Treg高于COPD稳定期组,差异有统计学意义(P<0.05);相关性检验发现,AECOPD患者血清IL-37水平与CD3+、CD4+、Treg水平呈负相关(r<0,P<0.05),与CD8+、Th17、Th17/Treg水平呈正相关(r>0,P<0.05).结论 血清IL-37在AECOPD患者中过表达,IL-37过表达与患者免疫失衡存在一定联系.     

川崎病急性期患者Th17细胞检测及意义

目的:探讨川崎病患者急性期Th17细胞的水平及意义。方法:急性期川崎病(KD)患儿43例,正常同年龄对照41例,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞占CD4+细胞的比例。荧光定量PCR(Real-time-PCR)检测RORγt和IL-23p19mRNA的表达。双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-6水平。结果:急性期KD患儿外周血Th17细胞比例及其特异性转录因子RORγt的mRNA表达分别为:(1.285±0.625)%、(M:5.62,Q:7.16),显著高于同龄对照组(0.584±0.407)%、(M:1.79,Q:2.55),(P0.01)。KD患儿血清IL-6水平显著增高[病人:(M:36.42,Q:129.77)、对照:(M:2.39,Q:1.15)](P0.01),且与Th17细胞比例成正相关(r=0.88,P0.01)。IL-23p19的mRNA表达与正常对照比较无显著差异[病人:(M:2.12,Q:3.05)、对照:(M:1.73,Q:2.79)](P0.05)。结论:急性期川崎病患者Th17细胞数量、血清IL-6水平升高;Th17可能作为急性炎症的启动因素,参与川崎病免疫发病过程。     

Treg/Th17平衡在巨细胞病毒感染发病机制中的作用

目的:研究调节性T细胞(Treg/Th17)细胞失衡在巨细胞病毒感染(CMV)免疫调节机制中的作用。方法:将CMV感染患儿按诊断标准分为激活感染组与潜伏感染组,同时设立正常对照组,采用流式细胞术(FCM)分析各组外周血Treg、Th17的百分比,并计算Treg/Th17比值;同时采用ELISA和RT-PCR法检测Treg主要相关因子(IL-10、Foxp3)和Th17主要相关因子(TGF-β、IL-17、IL-6、IL-23及ROR-γt)表达水平。结果:与对照组比较,CMV感染后Treg细胞百分率降低,Th17细胞升高,致Treg/Th17比值下降(P<0.05);CMV感染后两组间比较,激活感染组Treg/Th17比值和Treg主要相关因子表达水平下降更明显,而Th17主要相关因子表达水平显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Treg/Th17平衡参与了CMV感染发病免疫机制,并可能与病毒潜伏-激活状态相关。     

急性期川崎病Th17细胞变化初探

目的 探讨Th17细胞在川崎病(Kawasaki disease,KD)免疫发病机制中的作用.方法 急性期KD患儿60例,正常同年龄对照组32例,KD患儿分别于静脉丙种球蛋白(IVIG)治疗前后直接取血备检.采用荧光定量PCR(real-time PCR)检测CD4+T细胞IL-17A/F、转录因子ROR-γt、Foxp3及PBMC IL-6、TGF-β、IL-23p19、IL-27p28、IL-27EBI3、IFN-γ等mRNA表达;酶联免疫吸附试验检测血浆中IL-6、TGF-β、IL-23、IL-27、IFN-γ的蛋白浓度;流式细胞术检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)的比例.结果 急性期KD患儿CD4+T细胞高表达IL-17A及IL-17F(P<0.01),IVIG治疗后明显降低(P<0.01);急性期KD患儿IL-17A/IL-17F与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、白细胞数目(WBC)呈正相关(IL-17A:0.70,0.85,0.80,P<0.01;IL-17F:0.63,0.65,0.69,P<0.01);急性期KD患儿Th17细胞转录因子ROR-γt及前炎症细胞因子IL-6转录水平明显高于对照组(P<0.01),IVIG治疗后显著降低(P<0.01);TGF-β、IL-23p19、IL-27p28、IL-27EBI3 mRNA水平及血浆蛋白浓度与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);血浆IFN-γ浓度显著升高,mRNA水平无变化;急性期KD患儿CD4+ CD25+ Tr细胞比例明显低于正常对照组(P<0.01),其转录因子Foxp3表达亦明显降低(P<0.01).结论 急性期KD患儿Th17细胞过度活化可能参与了KD免疫发病机制.     

Th17/Treg失衡在肺炎支原体肺炎患儿中的作用及其机制

目的：探讨Th17/Treg失衡在肺炎支原体肺炎患儿中的作用及其机制。方法：纳入2013年6月至2015年1月我院收治的60例肺炎支原体肺炎急性期患儿和30例同期体检的健康儿童为研究对象。流式细胞术分析两组儿童外周血Th17和Treg的百分率,ELISA分析Th17和Treg特异性细胞因子IL-17和IL-10的分泌水平,定量PCR测定Th17和Treg特异性转录因子RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平,以及Notch信号分子(Notch1,Hes1和Hey1)的表达水平。结果：与健康儿童相比,肺炎支原体肺炎急性期患儿外周血的Th17的百分率,IL-17分泌水平以及特异性转录因子RORγt的表达水平均明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05),而急性期患儿外周血的Treg的百分率,IL-10分泌水平以及特异性转录因子Foxp3的表达水平均较健康儿童明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。进一步分析显示急性期患儿Notch1、Hes1和Hey1的表达水平均明显高于健康儿童,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：Th17/Treg失衡参与儿童支原体肺炎的发生发展,Notch信号通路可能通过调节免疫细胞分化和细胞因子分泌参与Th17/Treg失衡。     

急性缺血性脑卒中大鼠脑组织中Th17/Treg的变化

目的:免疫炎症反应在急性缺血性脑卒中的病理生理过程中发挥着重要的作用。具有促炎作用的辅助性T细胞17(Th17)及维持免疫耐受的调节性T细胞(Treg)是体内重要的2种免疫细胞。Th17/Treg细胞平衡是机体维持正常免疫的基础。本研究探讨急性缺血性脑卒中大鼠脑组织中Th17/Treg的变化。方法:采用线栓法制备SD大鼠急性大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,以假手术组作为对照组。在MCAO术后3 d利用TTC染色观察各组大鼠脑梗死体积;采用ELISA测定脑组织中白细胞介素17A(IL-17A)和IL-10蛋白的含量;采用RT-qPCR测定脑组织中IL-17、IL-10、Foxp3和RORγt的mRNA表达水平;采用流式细胞术测定脑组织中Th17细胞和Treg细胞的比例变化。结果:与假手术组相比,MCAO组大鼠脑组织中IL-17A的含量增加,IL-10的含量减少(P0.05);RORγt和IL-17的mRNA表达水平上调(P0.05),Foxp3和IL-10的mRNA表达水平下调(P0.05);脑组织Th17细胞增多,Treg细胞明显减少(P0.05),Th17/Treg比值升高(P0.05)。结论:急性缺血性脑卒中大鼠脑组织Th17细胞增多,Treg细胞减少,表明脑梗死后大鼠脑组织中Th17/Treg的平衡被破坏,免疫炎症反应被激活。     

维生素D3对自然流产模型小鼠胚胎丢失率及外周血免疫细胞的影响

目的 探讨维生素D3（VitD₃）对自然流产模型小鼠胚胎丢失率及外周血免疫细胞的影响。 方法 采用CBA/J×BALB/c建立正常妊娠小鼠模型,采用CBA/J×DBA/2建立自然流产小鼠模型,实验动物分5组：正常组、自然流产组、VitD3低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组15只。VitD₃各组自妊娠第1天开始腹腔注射VitD₃溶液,单次VitD₃给药剂量分别为1μg、4μg、16μg。记录和观察各组小鼠胚胎丢失情况,检测各组血清调节性T细胞（Treg）细胞因子：白细胞介素-10（IL-10）,辅助性T细胞17（Th17）细胞因子：白细胞介素-17A（IL-17A）以及各组外周血Treg、Th17。 结果 与正常组相比,自然流产组胚胎丢失率显著升高（χ2=16.045,P＜0.05）;与自然流产组比较,VitD₃低剂量组、中剂量组和高剂量组胚胎丢失率显著降低（χ2=5.881、13.704、15.663,P＜0.05）。与正常组相比,自然流产组Treg、IL-10、Treg/Th17、IL-10/IL-17A显著降低,Th17、IL-17A显著升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与自然流产组比较,VitD₃低剂量组、中剂量组和高剂量组Treg、IL-10、Treg/Th17、IL-10/IL-17A显著升高,Th17、IL-17A显著降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论 VitD₃能够降低自然流产模型小鼠胚胎丢失率,可能与调节Treg/Th17平衡有关。     

胸腺肽α1对重症肺炎患者Th17／Treg平衡的影响及其分子机制研究

目的：既往研究显示Th17／Treg的免疫失衡,参与了哮喘和COPD等疾病的发展,但其在重症肺炎中的作用目前并不清楚。胸腺肽α1免疫治疗能够提高重症肺炎患者的治疗效果和临床预后,但具体作用机制有待阐明。本研究旨在进一步研究胸腺肽α1免疫治疗对重症肺炎患者Th17／Treg平衡的影响及其分子机制。方法2012年9月～2014年9月我科收治的重症肺炎患者200例,将其随机分为治疗组100例和对照组100例,对照组给予抗炎,支持常规治疗,治疗组在常规治疗基础上联合使用胸腺肽α1免疫治疗。比较两组患者的临床疗效、分析两组患者在治疗前后外周血Th17和Treg的比例、以及相应细胞因子IL－17、 IL－10和特异性转录因子RORγt、 FoxP3的表达水平,并进一步研究Notch信号分子（ Notch1、 Hes1和Hey1）的表达水平。结果治疗组的治疗效率明显高于对照组。治疗前,两组患者Th17和Treg细胞的比例以及相应细胞因子、转录因子和Notch信号分子的表达水平无显著性差异,治疗后,两组患者Th17细胞比例、细胞因子IL－17和转录因子RORγt的表达水平均较治疗前明显降低,且治疗组明显低于对照组,其差异均具有统计学意义（ P＜0．05）。而Treg细胞比例、细胞因子IL－10和转录因子FoxP3的表达水平均较治疗前明显升高,且治疗组高于对照组,其差异均具有统计学意义（ P＜0．05）。 Notch信号分子分析显示两组Notch1, Hes1和Hey1的表达水平均较治疗前明显降低,且治疗组明显低于对照组,其差异均具有统计学意义（ P＜0．05）。结论胸腺肽α1治疗可能通过Notch信号通路调节Th17和Treg细胞分化和细胞因子分泌,减轻重症肺炎患者体内炎性反应,改善细胞免疫失衡状态,从而提高临床治疗效果。