针刺对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠大脑皮质14-3-3蛋白表达的影响

目的:探讨针刺对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠大脑皮质中14-3-3及凋亡相关的Bcl-2家族中两大主要成员Bcl-2和Bax的影响。方法:明确预产期的SD雌性妊娠大鼠接受延迟5min剖宫产术,所得新生大鼠随机分为模型组和针刺组;接受正常剖宫产术的大鼠所产新生大鼠为假手术组;代乳雌鼠自然分娩的新生大鼠为正常组。每组8只动物。针刺组新生大鼠饲养至14d时,每天针刺"脑三针""颞三针""智三针",每个穴位刺激20s,不留针,连续7d。各组新生大鼠均于出生后21d断头取脑,用免疫组织化学染色法检测大脑皮质中14-3-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:比较各组新生大鼠大脑皮质14-3-3的表达,假手术组和模型组显著低于正常组和针刺组(P0.05,P0.01);比较各组新生大鼠大脑皮质Bcl-2的表达,模型组略低于正常组(P0.05),针刺组高于模型组(P0.05);比较各组新生大鼠大脑皮质Bax的表达,假手术组、模型组显著高于正常组(P0.01,P0.05),针刺组与模型组间的差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刺可以提高HIBD新生大鼠大脑皮质中14-3-3和Bcl-2的表达水平。     

靳三针对宫内窘迫胎鼠大脑皮质GSH-PX及Bax蛋白的影响

目的:研究靳三针对宫内窘迫胎鼠大脑皮质谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSHPX)及Bax蛋白的影响。方法:将30只以明确预产期的妊娠SD雌性大鼠,在妊娠21天时建立宫内窘迫胎鼠模型,建模成功后随机分为正常组、模型组和针刺组,各10只。针刺组幼鼠使用靳三针治疗,正常组与模型组均不进行针刺治疗。3组胎鼠均于出生后21天后每组选取1只行颈椎脱臼法处死取大脑组织,检测大脑皮质中GSH-PX、Bax蛋白水平。结果:针刺组与模型组逃避潜伏期高于正常组(P 0. 05);针刺组逃避潜伏期低于模型组(P 0. 05);针刺组与模型组穿台次数相对正常组减少(P 0. 05);针刺组穿台次数相对模型组增加(P 0. 05);针刺组与模型组24 h、48 h、72 h细胞凋亡率高于正常组(P 0. 05),细胞增值率低于正常组(P 0. 05);针刺组24 h、48 h、72 h细胞凋亡率低于模型组,细胞增殖率高于模型组(P 0. 05);针刺组大脑皮质细胞SOD、NO以及GSH-PX的水平下降低于模型组(P 0. 05);针刺组Bcl-2、Bax蛋白水平上升高于模型组(P 0. 05)。结论:通过靳三针针刺治疗干预,可有效抑制宫内窘迫幼鼠神经细胞凋亡,对脑组织起到保护作用。     

靳三针对宫内窘迫HIBD大鼠大脑皮质Cyt-c和Caspase-3表达的影响

目的 探讨靳三针对宫内窘迫HIBD大鼠大脑皮质Cyt-c和Caspase-3表达的影响,揭示靳三针对大脑的保护机制。方法 SD雌性大鼠妊娠21 d时剖腹,用止血钳夹闭双侧子宫角血管5 min,剖宫产取出幼鼠经行为学及脑组织切片确认缺氧缺血性脑损伤的为模型大鼠,随机分为模型组、针刺组。模型组不针刺;针刺1组、针刺2组、针刺3组、针刺4组分别于出生后第3、5、7、14天开始针刺,连续7 d;正常对照组自然分娩,不造模不针刺。所有组别大鼠均于出生后21 d断头取脑组织,检测大脑皮质中Cyt-c和Caspase-3的表达。结果 4个针刺组的Cyt-c光密度值都有所下降,其中针刺1组、针刺2组与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。针刺1组Caspase-3的表达被明显下调,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 出生后第3天开始针刺对宫内窘迫HIBD大鼠脑的保护作用与Cyt-c和Caspase-3表达的下调有关。     

促红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤凋亡的研究

目的研究单次注射外源性人重组促红细胞生成素（rhEPO）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）凋亡的影响,探讨rhEPO神经保护作用分子机制。方法新生7d龄Wistar大鼠,随机分为假手术组、HIBD组、rhEPO治疗组。采用Rice等方法建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型（HIBD模型）,rhEPO治疗组于缺氧缺血完成后即刻腹腔内注射rhEPO5000U/Kg1次。各组分别于术后及给药后不同时间点断头取脑组织,HE染色观察神经细胞形态变化、用免疫组化方法检测凋亡相关蛋白：Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果HIBD组神经细胞凋亡增加,与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;rhEPO治疗组神经细胞凋亡减少,与HIBD组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;Bcl-2蛋白在假手术组呈低水平表达,HIBD组表达增高,rhEPO治疗组则较假手术组及HIBD组表达更高;Bax蛋白在假手术组中表达弱,HIBD组表达增高,rhEPO治疗组则HIBD组表达低。结论rhEPO通过减少新生大鼠脑神经细胞坏死和凋亡来发挥其神经保护作用。     

针刺对宫内窘迫大鼠缺氧缺血性脑损伤作用机制初探

目的:观察"靳三针疗法"中的"头针穴组"对宫内窘迫导致的HIBD新生大鼠脑皮质中线粒体氧化应激及能量代谢的影响。方法:给予临产前孕鼠异氟烷吸入麻醉和夹闭双侧子宫动脉10 min的延迟剖宫产术造缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠模型。正常分娩的新生大鼠为正常组;造模成功的HIBD新生大鼠按照随机数字表法分为模型组和针刺组,每组6只幼鼠。针刺干预于大鼠14天鼠龄时进行,每天针刺1次,共干预14 d。针刺干预结束后取各组大鼠的全脑进行指标检测。采用流式细胞术检测大鼠脑皮质中ROS的表达;采用高效液相色谱法检测大鼠脑皮质中ATP/ADP比值。结果:(1)各组大鼠脑皮质重量比较:与正常组相比,针刺组脑皮质重量差异不显著(P0.05),模型组脑皮质重量显著下降(P0.05);与模型组比较,针刺组脑皮质重量明显优于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)各组ROS平均荧光表达比较:模型组ROS平均荧光表达明显高于正常组;与模型组相比,针刺组大鼠的ROS表达明显降低,差异具有显著性(P0.05)。(3)比较各组的ATP/ADP比值:与正常组相比,模型组与针刺组均低于正常组且差异有显著性(P0.05),与模型组相比,针刺组高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:(1)针刺靳三针头针穴组能有效促进缺氧缺血性脑损伤HIBD模型大鼠脑皮质重量增长;(2)针刺组中ROS与ATP/ADP比值表达成负相关趋势,提示针刺靳三针头针穴组促进缺氧缺血性脑损伤HIBD模型大鼠脑功能修复作用机制可能与针刺靳三针头针穴组能有效降低HIBD模型大鼠脑组织中的氧化应激损伤,并能提高HIBD模型大鼠脑组织线粒体能量代谢有关。     

芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制

目的:探讨芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:选择健康雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、芍药苷组及尼莫地平组各20只,建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察各组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积,TUNEL检测大鼠神经细胞凋亡情况,免疫组化法检测大鼠大脑皮层中Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果:假手术组大鼠未表现出神经功能缺失症状,模型组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积高于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组均低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05);假手术组几乎未见神经细胞凋亡,模型组TUNEL阳性细胞明显多于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组细胞凋亡个数及阳性率均低于模型组,其差异具有统计学意义(P0.05);假手术组大鼠大脑皮质中Bcl-2及Bax的灰度值均高于模型组,芍药苷组及尼莫地平组大鼠Bcl-2灰度值较模型组降低,而Bax灰度值较模型组明显升高,2组Bcl-2/Bax灰度值较模型组下降,其差异具有统计学意义(P0.05)。结论:芍药苷可通过抑制Bax的表达,上调Bcl-2的表达来抑制神经细胞凋亡,从而保护神经功能,减轻脑梗死。     

HIF-1α及其抑制剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其抑制剂2-甲氧基雌二醇（2ME2）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响。方法将120只新生7d龄Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham组,n=8）、缺氧缺血模型组（HIBD组,n=56）、2ME2干预组（2ME2组,n=56）,后两组采用Rice法建立模型后,根据断头取脑的时间不同又分为3h、6h、12h、24h、48h、72h和7d7个亚组。应用HE染色观察脑组织的病理变化,免疫组化技术检测HIF-1α、Bax、Bcl-2的表达,TUNEL法计数脑细胞凋亡。结果 HE染色显示2ME2干预后脑组织的损伤减轻;免疫组化显示：HIF-1α在HIBD组于模型制备后3h升高,12h达高峰,之后下降,2ME2组表达趋势和HIBD组相同,表达水平显著下降。与HIBD组比较,2ME2组各时间点的Bcl-2表达显著升高,Bax表达显著降低,TUNEL标记的阳性细胞数明显减少。结论在新生大鼠缺氧缺血急性期使用2ME2抑制HIF-1α的表达,引起Bax/Bcl-2表达量比值降低,凋亡细胞数目减少,改善脑损伤。     

眶内及眶外针刺对兔眼非动脉炎性前部缺血性视神经病变细胞Bax/Bcl-2及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响

目的:观察眶内及眶外针刺对兔眼非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)组织Bax/Bcl-2及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响,探讨针刺抗NAION细胞凋亡的机制,验证选择眶内腧穴治疗的必要性。方法:雌性新西兰大耳白兔随机分为模型组、眶内针刺组、眶外针刺组、眶内+眶外针刺组,每组5只。以右眼为实验眼,光动力法制备兔眼NAION模型,选取模型组5只左眼为正常组。眶内针刺组腧穴选取"睛明""承泣""球后",眶外针刺组腧穴选取"攒竹""鱼腰""窍明",眶内+眶外针刺组腧穴即为以上两组之和。造模成功后次日,3个针刺组开始针刺干预,每次留针30min,每日1次,连续治疗3d。通过TUNEL免疫荧光检测病变视网膜神经节细胞调亡,免疫组织化学染色检测Bax、Bcl-2及Caspase-3的表达。结果:与正常组比较,模型组视网膜神经节的细胞凋亡个数、Bax及Caspase-3阳性表达均显著增加(P0.01,P0.05),Bax/Bcl-2值增高(P0.01),Bcl-2阳性表达显著降低(P0.01)。与模型组比较,眶内针刺组细胞凋亡个数显著降低(P0.01),Caspase-3阳性表达降低(P0.05);眶外针刺组细胞凋亡个数、Bax/Bcl-2值均显著降低(P0.01),Bcl-2阳性表达显著增加(P0.01);眶内+眶外针刺组细胞凋亡个数、Bax/Bcl-2值及Caspase-3阳性表达均显著降低(P0.01),Bcl-2阳性表达显著增加(P0.01)。与眶内针刺组比较,眶外针刺组及眶内+眶外针刺组Bcl-2阳性表达增高(P0.05),Bax/Bcl-2值降低(P0.05)。与眶外针刺组比较,眶内+眶外针刺组Caspase-3阳性表达降低(P0.05)。结论:针刺对NAION组织Bax及Caspase-3表达有一定的抑制作用,对Bcl-2表达有促进作用,以眶内+眶外针刺为优。     

电针对局灶性脑缺血大鼠半暗带神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、c-Fos蛋白表达的影响

目的：研究电针百会、曲鬓、前顶穴对局灶性脑缺血大鼠半暗带内神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、c-Fos蛋白表达的影响。方法：W istar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,各组再随机分出6h、24h、48h、72h、7d时间点5个小组。采用线拴阻塞大鼠右侧大脑中动脉方法复制局灶性脑缺血动物模型。电针组术后立即进行电针刺激,假手术组、模型组术后不给电针处理。各组术后分别在相应时间点取脑检测半暗带神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax、c-Fos蛋白表达情况。细胞凋亡使用原位末端标记法（TUNEL法）检测,检测Bcl-2、Bax、c-Fos蛋白表达使用免疫组织化学法。结果：假手术组各时间点偶见凋亡神经细胞出现。与假手术组比较,模型组6h、24h、48h、72h时间点细胞凋亡明显增加。针刺组24h、48h时间点细胞凋亡与模型组比较明显减少。假手术组Bcl-2、Bax、c-Fos蛋白表达呈低水平。模型组6h、24h、48h时间点Bcl-2、Bax蛋白表达以及模型组6h、24h时间点c-Fos蛋白表达与假手术组比较明显增多。与模型组比较,针刺组6h、24h、48h、72h时间点Bcl-2蛋白表达增多,针刺组6h、24h、48h时间点Bax蛋白表达减少,针刺组6h时间点c-Fos蛋白表达减少、24h时间点c-Fos蛋白表达增多。结论：电针对局灶性脑缺血大鼠半暗带神经细胞凋亡有明显抑制作用,该抑制作用与电针调节Bcl-2、Bax、c-Fos蛋白表达有关。     

蓝布正对大鼠梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡和蛋白表达的影响

目的:观察蓝布正对局灶脑缺血大鼠梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡及蛋白表达的影响,探讨其促脑卒中后神经功能恢复作用及机制。方法:72只SD大鼠采用线栓法建立脑缺血损伤模型(p MCAO),随机分成假手术组,模型组,蓝布正高、中、低剂量组(7.00,3.50,1.75 g·kg-1),银杏叶片组(0.007 g·kg-1),连续ig给药3 d。进行神经功能评分,四氮唑红(TTC)染色观察大鼠的脑梗死范围,苏木素-伊红(HE)染色观察梗死灶周围大脑皮质的病理形态学改变,原位细胞凋亡检测(TUNEL)梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡,免疫组化检测梗死灶周围大脑皮质中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达的情况。结果:模型组一侧大脑中动脉永久性栓塞3 d大鼠神经功能评分增加,脑梗死范围增多,梗死灶周围大脑皮质部分神经元变性,Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白水平升高,与假手术组比较,差异具有统计学意义(P0.01);与模型组比较,蓝布正高、中、低剂量组均能不同程度减少神经功能评分,缩小脑梗死范围,改善梗死灶周围大脑皮质的病理形态学改变;抑制梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡,促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax表达(P0.05)。结论:蓝布正对大鼠脑缺血性损伤具有一定的保护作用,机制可能与其促进梗死灶周围大脑皮质Bcl-2水平增加,抑制Bax活性,提高脑组织抗缺血损伤的能力和抑制神经细胞凋亡有关。     

针刺对脑卒中模型大鼠认知功能障碍影响及其与PI3K/Akt信号转导通路关系

目的:分析针刺对脑卒中模型大鼠认知功能障碍影响及其与磷酸酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路联系。方法:选取SPF级雄性大鼠30只,随机数字表法将大鼠分成3组,分别为针刺组、模型组和正常组,针刺组、模型组大鼠制备大脑中动脉梗塞(MCAO)模型,成功造模后电针仪对针刺组大鼠行针刺治疗,模型组与正常组不进行任何处理。观察大鼠神经功能评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率、脑组织PI3K、Bcl-2、p-Akt、t-Akt、Bax蛋白表达及Bax、Bcl-2及Bc1-2/Bax mRNA表达。结果:和正常组相比,模型组大鼠脑梗死面积增大;和模型组相比,针刺组大鼠脑梗死面积减少,差异有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠凋亡阳性细胞比例升高;和模型组相比,针刺组大鼠凋亡阳性细胞比例降低,差异均有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠Bax蛋白表达升高,PI3K、Bcl-2、p-Akt蛋白表达降低;和模型组相比,针刺组大鼠Bax蛋白表达降低,PI3K、Bcl-2、p-Akt蛋白表达升高,差异有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠Bax mRNA表达升高,Bcl-2及Bc1-2/Bax mRNA表达降低;和模型组相比,针刺组大鼠Bax mRNA表达降低,Bcl-2及Bc1-2/Bax mRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:针刺脑卒中大鼠可显著改善其认知功能障碍,加速神经功能恢复,作用机制可能将PI3K/Akt路径激活,对神经细胞凋亡抑制有联系。     

养血清脑颗粒对阿尔茨海默病模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的:观察养血清脑颗粒对阿尔茨海默病模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法:在双侧海马CA1区缓慢注射Aβ和生理盐水制成模型。对照组在双侧海马各注射生理盐水2μl;模型组在双侧海马各注射Aβ1～42各2μl;给药组在双侧海马各注射Aβ1～42各2μl,术前3 d及术后每天用养血清脑颗粒灌胃24mg/kg/d,共灌胃28d。结果:养血清脑颗粒对Aβ诱导的AD模型大鼠脑海马组织Bcl-2基因的表达影响不大,但对Bax、casepase-3基因表达有影响。结论:养血清脑颗粒主要通过抑制促凋亡基因Bax以及Caspase-3的表达,从而抑制Aβ诱导的AD模型大鼠脑海马的神经细胞凋亡,发挥神经细胞的保护作用,而对凋亡抑制基因Bcl-2表达影响不大。     

藏药70味珍珠丸对脑缺血再灌注大鼠海马神经元凋亡和Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨藏药70味珍珠丸对大鼠脑缺血再灌注损伤海马的保护作用及对Bcl-2和Bax表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠建立大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)动物模型,MCAO/R大鼠分为3组:藏药组、西药组及模型组,另设假手术组做对照.TUNEL法检测神经细胞凋亡;免疫组织化学法检测各组大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax表达的变化.结果 模型组大鼠海马CAl区神经细胞凋亡数、Bcl-2、Bax阳性细胞数显著高于假手术组;Bcl-2/Bax比值显著低于假手术组;藏药组及西药组海马CA1区神经细胞凋亡数、Bax阳性细胞数显著低于模型组,Bcl-2阳性细胞数及Bcl-2/Bax比值显著高于模型组.结论 藏药70味珍珠丸可以抑制脑缺血再灌注时海马神经元凋亡,其作用机制可能与下调促凋亡基因Bax水平,上调抗凋亡基因bcl-2水平,提高Bcl-2/Bax比值有关.     

“醒脑开窍”针刺法调节ATP敏感性钾通道开放对抗脑缺血再灌注损伤的机制研究

目的:观察"醒脑开窍"针刺法调节ATP敏感性钾通道开放对抗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:将84只大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、电针+三磷酸腺苷敏感性钾通道(K_(ATP))阻滞剂组(电针+K_(ATP)阻滞剂组),每组21只。电针+K_(ATP)阻滞剂组大鼠给予K_(ATP)通道阻断剂格列吡嗪(1μmol/5μL)10μL脑室内注入。模型组、电针组、电针+K_(ATP)阻滞剂组采用Zea Longa线栓法复制大脑中动脉缺血再灌注模型,假手术组仅分离颈总动脉及颈外动脉,不插入尼龙线栓。电针组、电针+K_(ATP)阻滞剂组给予针刺"内关""水沟""三阴交"治疗,留针20 min,留针期间将患侧"内关""三阴交"穴分别连接神经穴位刺激仪,施以疏密波,频率2 Hz/15 Hz,电流强度1 mA。首次针刺在动物造模成功90 min后进行,每天10:00、16:00各针刺1次,共3 d。假手术组、模型组大鼠同样抓取,但不予针刺。采用Zausinger六分法评价神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积,流式细胞技术检测海马神经细胞凋亡率,Western-blot技术检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤因子相关X蛋白(Bax)表达。结果:干预后,电针组神经功能评分明显高于模型组(P0.01),脑梗死体积及海马神经细胞总凋亡率明显低于模型组(均P0.05),电针组Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值较模型组均明显升高(P0.05,P0.01),Bax蛋白表达较模型组明显降低(P0.01);与电针组比较,电针+K_(ATP)阻滞剂组大鼠神经功能评分明显降低(P0.05),海马神经细胞总凋亡率明显升高(P0.05),海马组织Bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05),Bax蛋白表达明显升高(P0.05)。结论:"醒脑开窍"针刺法对脑缺血再灌注损伤大鼠有明显的脑保护作用,其机制可能与调节脑组织K_(ATP)通道开放、减轻神经细胞凋亡密切相关。     

失荅剌治丸对脑缺血大鼠再灌注bcl-2和bax蛋白表达的影响

目的:观察失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注后皮质缺血周围区bcl-2和bax蛋白表达的影响。方法:78只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、金纳多组和失荅剌知丸组,后三组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注,术后分12 h、24 h、72 h、7 d组,共13组,每组6只。采用免疫组化法和原位细胞凋亡检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达及凋亡细胞数。结果:与假手术组比较,模型组及各药物组各时间点凋亡细胞数有显著增高(P<0.01),金纳多组各时点凋亡细胞数均明显少于模型组(P<0.01),失荅剌治丸组各时点凋亡细胞数均明显少于金纳多组(P<0.01)。金纳多组各时点Bcl-2蛋白表达均明显高于模型组(P<0.05),失荅剌治丸组各时点Bcl-2蛋白表达均明显高于金纳多组(P<0.05)。金纳多组各时点Bax蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05),失荅剌治丸组各时点Bax蛋白表达均明显低于金纳多组(P<0.05)。结论:失荅剌知丸可促进Bcl-2表达、抑制Bax表达,其发挥脑保护的作用机制可能与减少神经细胞凋亡有关。     

参麦对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的干预作用

[摘要]目的研究参麦注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的干预作用。方法建立新生鼠HIBD模型。免疫组化方法检测缺氧缺血（HI）后2h、12h、24h、3d、7d、14d各时间点新生大鼠右侧大脑海马CAl区Bax、Bcl-2蛋白表达情况。实验各观察点随机分为假手术组（s组）、参麦注射液治疗组（SM组）、生理盐水对照组（c组），每纽9只。结果Hl后2h，SM组、c组右侧大脑海马CAl区Bcl-2蛋白表达及Bax蛋白表达均已有升高，24h达到高峰，14d各组降到与SM组同一水平：SM组、c组在2h、12h、24h、3d、7ct点与s组比较均有显著性差异，在14d与s组比较无显著性差异；SM组在24h、3d、7d与c组比较，Bcl-2蛋白表达较c组高，在2h、12h、14d点与c组比较无显著性差异。SM组在12h、24h、3d、7d与c组比较，Bax蛋白表达较c组降低，在2h、14d与c组比较无显著性差异。结论参麦注射液可以提高抑制凋亡基因Bcl-2的表达及降低促凋亡基因Bax的表达。     

回神颗粒对实验性大鼠局灶性脑缺血缺血区神经细胞凋亡的影响

[目的]观察回神颗粒对大鼠局灶性脑缺血后缺血区神经细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax蛋白的影响。[方法]选用成年雄性Wistar大鼠,应用开颅法烧灼闭塞大脑中动脉,制作局灶性脑缺血损伤动物模型(MACO)。动物随机分为假手术组和缺血组,缺血组又分为模型组和回神颗粒组。大鼠脑缺血7d后取脑并制作冰冻切片,进行原位末端缺口平移标记法(TUNEL)染色和Bax、Bcl-2免疫组织化学染色。[结果]治疗组大鼠脑组织TUNEL、Bax阳性细胞数明显较少,与模型组比存在显著性差异(P<0.01);治疗组大鼠脑组织Bcl-2阳性细胞数明显较多,与模型组比存在显著性差异(P<0.01);治疗组大鼠脑组织Bcl-2/Bax明显升高,与模型组比存在显著性差异(P<0.05)。[结论]回神颗粒具有抑制缺血性脑损伤后神经细胞凋亡的作用;回神颗粒提高MACO模型大鼠Bcl-2表达,抑制Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值,可能是其抑制细胞凋亡,保护脑细胞的机制之一。     

补肾开窍祛痰方对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡基因Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax比例变化的影响

目的观察补肾开窍祛痰方对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2、Bax表达及Bcl-2/Bax比例变化的影响。方法结扎并剪断左侧颈总动脉后缺氧1小时制作缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,随机分组后药物干预6天。检测海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平,计算Bcl-2/Bax比例。结果 (1)Bcl-2阳性表达的比较:与模型组相比,正常组、假手术组、中药大、中、小剂量组Bcl-2的表达均明显增高(P0.05),平均光密度值低剂量组中剂量组高剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)Bax阳性表达的比较:与模型组较,正常组、假手术组、中药大、中、小剂量组Bax的表达均明显降低(P0.05);(3)Bcl-2/Bax比例结果:与模型组相比,正常组、假手术组、中药大、中、小剂量组Bcl-2/Bax比例均升高。结论补肾开窍祛痰方药可促进缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,升高Bcl-2/Bax比例,抑制神经细胞凋亡,这可能是其治疗缺氧缺血性脑损伤的作用机制之一。     

益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠脑细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的：研究益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠脑细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响。方法：将实验大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺组和非穴组。针刺组取膻中、中脘、气海、血海和足三里行针刺法。采用原位TUNEL法检测细胞凋亡情况，免疫组织化学染色ABC法检测Bcl-2、Bax蛋白表达，所测数据进行统计学分析。结果：经检测发现模型大鼠存在较多细胞凋亡现象，针刺组大鼠皮层中Bcl-2表达数目、染色强度及胞浆着色面积较高，而Bax表达相对较低。结论：益气调血扶本培元针刺法对多发梗塞痴呆大鼠能增加Bcl-2表达，抑制Bax表达，从而减少大鼠脑细胞凋亡，并促进其存活。     

电针不同频率对坐骨神经损伤大鼠脊髓Bcl-2、Bax及p53表达的影响

目的观察不同的电针频率对坐骨神经损伤大鼠脊髓Bcl-2、Bax及p53表达的影响;探究周围神经损伤后抑制神经元凋亡的最佳电针频率。方法将48只SD大鼠(雌雄各半)随机分为低频组、高频组、模型组、空白组。制作坐骨神经钳夹损伤模型,造模成功第8天低频组和高频组均针刺"环跳"穴并分别给予2 Hz、100 Hz不同频率的电针干预,20 min/次·d~(-1),连续14 d。检测大鼠坐骨神经功能指数(SFI)、HE染色观察坐骨神经形态学改变、Western Blot及免疫组织化学法测定Bcl-2、Bax及p53的表达。结果坐骨神经功能指数检测,低频组、高频组SFI较模型组升高(P0.01),且低频组优于高频组(P0.01)。HE染色,模型组神经纤维排列紊乱,雪旺细胞增多,髓鞘及轴突发生裂解消失,低频组、高频组神经纤维在数量及排列紊乱程度等方面均有改善,且低频组优于高频组。Western Blot和免疫组织化学检测,模型组、低频组、高频组中Bcl-2、Bax及p53的表达与空白组比较均有统计学意义;与模型组相比,低频组和高频组中Bcl-2显著升高,Bax、p53显著下降;并且低频组Bcl-2表达高于高频组(P0.05),低频组Bax及p53的表达低于高频组(P0.05)。结论电针有抑制或延缓神经细胞凋亡的作用;大鼠周围神经损伤后,2 Hz的治疗频率在抑制神经细胞凋亡的作用中优于100 Hz。