环介导等温扩增结合免疫层析试纸条快速检测羊肉及其制品中的鸭源成分

为实现肉及肉制品中掺假成分的快速检测,本文将环介导等温扩增技术(loop mediated isothermal amplification,LAMP)与免疫层析试纸条(immunochromatographic test strip,ICTS)相结合,建立了一套可在羊肉及其制品中特异并灵敏地检测出鸭源性成分的方法。根据鸭特异性细胞色素b(cytb)基因的6个特异性区域设计LAMP引物,其中两条内引物FIP和BIP分别使用生物素(biotin)和地高辛(digoxin)标记。使用LAMP扩增技术于65℃下扩增30 min产生生物素和地高辛标记的双链DNA产物,将扩增产生的双链DNA产物(10 μL)与90 μL上样缓冲液(PBS pH=7.4)混合均匀后使用免疫层析试纸条进行可视化检测。本研究所建立的LAMP-ICTS方法能够在40 min内特异性地检测出羊肉及其制品中的鸭源成分,且与其他肉类不存在交叉反应,检出限可达到0.01%(w/w)。市售实际样品检测结果显示,所采集的羊肉片、羊肉串样品中均有鸭源性成分,且此结果与行业标准方法(PCR-电泳)的检测结果一致。LAMP-ICTS方法具有灵敏度高、特异性好、检测速度快、对仪器的依赖低等优点,适用于基层监管部门对羊肉及其制品真伪进行快速检测。     

双拖尾重组聚合酶恒温扩增技术结合核酸杂交侧流条快速检测牛肉中的鸡、鸭、猪源性成分

目的? 建立快速、简便、经济的双拖尾重组聚合酶恒温扩增结合核酸杂交试纸条快速检测牛肉中鸡源、鸭源、猪源性成分的可视化检测技术。方法? 采用多重双拖尾重组聚合酶恒温扩增技术(multiplex recombinase polymerase amplification,mRPA)与核酸杂交试纸条相结合。对鸡、鸭、猪线粒体D环区域设计特异性拖尾RPA引物,扩增出双拖尾的RPA产物。鸡、鸭、猪3个物种RPA产物的拖尾序列分别与红、黄、蓝三种颜色的金纳米探针和试纸条上的检测探针杂交,形成肉眼可见的红、黄、蓝三色条带,整个RPA扩增(15 min)和试纸条检测(5 min)过程在20 min内即可完成。结果? 该方法对牛肉中鸡、鸭、猪肉的检测限达0.01%,且仅对鸡、鸭、猪肉DNA有特异性,与其他10个物种的DNA均无交叉反应。采集50份市售牛肉样品,使用该方法进行真实性检测:10份牛肉干、10份生牛肉、10份酱牛肉中未检测出其他动物源性成分,10份牛肉馅料中检测出1份含猪源性成分,10份牛肉片中检测出1份含鸡源性成分。该方法与PCR结合凝胶电泳的检测结果具有很好的一致性。结论? 双拖尾重组聚合酶恒温扩增技术结合核酸杂交试纸条具有特异性强、灵敏度高,操作简单的优点,可实现牛肉中鸡、鸭、猪源性成分的同时可视化快速检测。     

肉制品中鸭源性成分的实时荧光PCR检测

目的：建立基于实时荧光PCR技术的鸭源性成分的快速检测方法。方法：以鸭线粒体DNA序列为目的基因,设计并筛选了鸭源性特异性引物及探针,进行荧光定量PCR扩增,建立鸭源性成分检测方法。通过特异性、灵敏性、及盲样检测试验,对该体系进行验证。结果：该方法能够快速有效的检测鸭源性成分,具有较强的特异性及灵敏性,灵敏度约为0．01％（质量分数）;通过市售盲样肉制品的检测,表明该体系可用于定性检测加工肉制品中的鸭源性成分。结论：该方法特异性强,灵敏度高,可用于对肉制品中鸭源性成分的掺假鉴别。     

免疫磁珠结合PCR-试纸条法鉴定金枪鱼成分的研究

目的 建立一种快速检测金枪鱼成分的免疫磁珠结合PCR-免疫金标试纸条方法。方法 本研究使用免疫磁珠法提取金枪鱼样品的核酸,针对金枪鱼基因组特异性基因片段设计引物,优化反应体系和反应条件,建立金枪鱼成分PCR产物试纸条检测方法,验证方法的特异性、灵敏度和稳定性,并对市售金枪鱼产品进行检测。结果 免疫磁珠法提取市售金枪鱼样品DNA的纯度高。所建立的PCR-试纸条方法特异性强,仅金枪鱼能扩增出229bp特异性DNA片段,试纸条检测线变红,其他鱼类均无非特异性扩增条带,试纸条检测线未变红色;灵敏度高,达到0.01%;方法快速,PCR产物的试纸条判读时间5分钟。结论 该方法具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、简便环保等优点,适用于金枪鱼成分的快速检测。     

免疫磁珠-PCR试纸条快速检测食品中牛源成分方法的建立

建立食品中牛成分快速检测的免疫磁珠-PCR试纸条方法。免疫磁珠提取食品中核酸,设计牛特异性引物,建立牛成分快速检测的PCR-试纸条方法。验证方法的特异性、灵敏度和稳定性。该方法检测灵敏度0.01%,能够从食品中扩增出561 bp特异性DNA片段。建立的食品中牛成分检测的免疫磁珠-PCR试纸条法特异性好,灵敏度高,简便,快速,是食品中牛成分检测的有效方法。     

肉制品中鸭源性成分TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立与应用

目的 建立TaqMan探针实时荧光PCR法快速检测肉制品中鸭源性成分的分析方法。方法 以鸭生长激素(growth hormone, GH)基因为靶基因, 基于特异性保守序列设计引物和TaqMan探针, 优化反应体系和反应条件, 建立了鸭源性成分实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法。结果 所建立的real-time PCR方法特异性强, 仅对鸭基因组DNA出现特异性扩增曲线, 对牛、羊、猪等其他异源性动物基因组DNA均无扩增曲线; 灵敏性高, 以鸭基因组DNA为模板, 检出限为1.0 pg; 重复性好, 不同浓度基因组DNA测定的Ct值变异系数小于4%。使用建立的real-time PCR方法对200份市售肉制品进行检测, 在11份肉制品中检出鸭源性成分, 同现行行业标准SN/T 3731.5—2013检测结果一致。结论 本研究所建立的real-time PCR方法检测具有特异性强、敏感性高、快速高效等特点, 适用于肉制品中鸭源性成分快速检测。     

交叉引物等温扩增检测猪肉源性成分

肉制品掺假现象已成为我国食品行业重点关注的问题。本研究使用交叉引物恒温扩增技术(Cross priming amplification,CPA)和核酸试纸条检测相结合的方法快速检测肉制品中猪肉成分。对猪线粒体的D-loop基因序列设计特异性的引物和探针,通过优化引物浓度及反应条件,确立最佳反应体系。实验结果表明,CPA扩增系统对猪源性成分的检测特异性良好,对单猪源性成分的检出限为1 ng/μL,对混合肉制品中猪源性成分的检出比例为10%(相当于10 ng/μL)。同时核酸试纸条可以快速检测CPA扩增产物,结果与凝胶电泳系统检测保持一致。本研究建立的CPA-核酸试纸条检测方法是一种特异、高效的肉制品中猪肉成分检测方法,可以为肉制品质量控制提供有效的新手段。     

基于Cyt-B基因鉴定肉制品中鸭源性成分的研究

基于Cyt-B基因设计特异性引物,建立高效快速检测肉制品中鸭源性成分的方法。选取Cyt-B基因作为检测靶标,应用生物信息学技术设计各物种特异性引物,建立聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系检测肉制品中鸭源性成分,并将鸭特异性基因片段进行克隆和测序分析。该检测体系可以对鸭肉含量为1pg的肉制品实现稳定检测,灵敏度髙,特异性好。测序分析结果显示克隆的特异性基因序列与Genbank中相同物种(序列ID:EU755253.1)的核苷酸同源性达100%。该文建立的基于Cyt-B基因的PCR检测方法,可实现对肉制品中鸭源性成分高效快速的检测,既为肉类产品DNA鉴定试剂盒的研发提供试验基础,也有望对肉制品的市场监管和相关执法提供有力的技术保障。     

一种基于多重实时荧光聚合酶链式反应熔解曲线分析的肉及肉制品掺假鉴别方法

为实现肉及肉制品掺假快速鉴别,分别以猪、牛线粒体DNA的COXⅠ,绵羊、山羊、狗、狐狸、貉线粒体DNA的16S rRNA及鸡、鸭线粒体DNA的12S rRNA基因为靶位点,设计扩增产物熔解温度(T_m值)具有显著性差异的特异性引物,建立一种用于快速鉴别肉或肉制品中猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、狗、狐、貉9种源性成分的5重实时荧光聚合酶链式反应熔解曲线分析方法,通过特异性、灵敏度及市售样品的检测,对该方法进行检验和评价。结果表明:方法具有良好的特异性及灵敏度,单物种DNA检出限为0.001~1 ng,多物种混合DNA检出限均为0.1 ng,通过市售样品检测表明该方法可用于实际样品(包括生鲜样品和熟制样品)掺假的快速鉴别。     

微滴数字PCR方法检测畜肉食品中鸭源性成分

目的利用微滴数字PCR技术,建立鸭源性成分的快速、特异、灵敏检测方法。方法根据鸭线粒体基因全序列设计的引物及探针,利用微滴数字PCR进行扩增,建立鸭源性成分检测方法;以市场中常见畜禽肉为参考物种作微滴数字PCR特异性检测;以羊肉为干扰物观察微滴数字PCR的抗干扰性;将鸭肉DNA进行梯度稀释,对方法灵敏度进行检测。结果该方法能够有效对鸭源性成分进行检测,特异性强,灵敏度高,并且其他物种成分的存在对方法灵敏度检测没有影响。结论该方法特异性强,灵敏度高,可以实现畜肉食品中的鸭源性成分检测。     

肉及肉制品保藏技术综述

肉及肉制品因其营养丰富,极易受微生物和周围环境因素的影响而发生腐败变质现象。本文综述了食品保藏的历史,食品保藏的原理及方法分类及引起食品腐败变质的主要因素,并简要介绍了低温保藏、发酵技术、干燥技术、罐藏技术、包装技术、微波技术、辐照技术及管理方法等常见的肉品保藏方法的原理、特点及其在食品保藏中的应用。     

肉及肉制品保藏技术(英文)

Meat and meat products which are nutrient-rich are vulnerable to microbial contamination and influence of surrounding environment. This article summarized the history,principles,methods and influencing factors of food preservation. The common methods such as low-temperature preservation, fermentation technology,drying preservation,pot preservation,packaging technology,microwave technology,irradiation preservation and management technology were also introduced.     

肉及肉制品保藏技术(续)(英文)

Meat and meat products which are nutrient-rich are vulnerable to microbial contamination and influence of surrounding environment.This article summarized the history,principles,methods and influencing factors of food preservation.The common methods such as low-temperature preservation,fermentation technology,drying preservation,pot preservation,packaging technology,microwave technology,irradiation preservation and management technology were also introduced.     

肉及肉制品的包装

详细介绍了肉及肉制品的包装工艺、包装方法和常用包装材料,强调了包装的重要意义.     

冻结肉、热鲜肉、冷鲜肉的营养与卫生

从卫生安全性、营养特性对冻结肉、热鲜肉、冷鲜肉作了简要介绍。     

双汇冷鲜肉开创中国肉类第一品牌

双汇集团是以肉类加工为主的大型食品集团，是国务院批准的全国520家重点企业、农业部等八部委确定的151家农业产业化重点龙头企业之一。十几年来，双汇集团始终坚持围绕“农”字做文章、围绕肉类加工上项目，不断强化食品安全意识，加大科技投入，加强技术创新，实现了企业的快速稳健发展。     

肉及肉制品中的细菌

细菌是个体微小、形态简单的一类原核微生物。在自然界中,数量最多、分布最广,是导致食品腐败变质的主要原因。因此,本文对细菌的基本形态、结构、繁殖方式以及肉及肉制品中常见细菌的特性进行了综述,旨在为肉及肉制品中细菌的控制及防范,提供一定的理论依据。     

肉类产品的环境足迹:环境影响的评价方法和重要性

肉类产品在整个农业环境影响中占有核心位置。它对土地资源利用、生物多样性、水资源利用和温室气体排放的总体影响都很突出。在农业产品,特别是类肉产品的环境影响评价中,应用生命周期评价方法,改变了人们对农业产品环境影响的认识,为肉类生产体系的良性运行,提供了更为视角全面和多准则的评估方法。尽管畜牧生产过程对环境的影响问题已经有了广泛认识,但评价方法还有待标准化。为了更好地评价肉类产品消费的环境影响,还需要建立肉类产品生产链的通用评价方法和数据库。     

Biogenic Amines in Meat and Meat Products

It has been recognized for some time that biogenic amines occur in a wide range of foods, among them meat and meat products. Meat is an important component of the diet in developed countries. The presence of these amines in food is of interest for two reasons: firstly, for toxicological reasons, in the sense that high levels of dietary biogenic amines can be toxic for certain consumers, and secondly, for their role as possible quality indicators. Based on these two premises, the present article offers a new analysis on aspects of toxicology and on the use of biogenic amines as a quality control method, as well as on their presence in meat and meat products. The article focuses particularly on factors affecting the production of biogenic amines, with reference to various parameters relating to microorganisms, meat raw materials, and processing conditions. A better understanding of the factors determining their formation (i.e., microorganisms, raw materials used, and technological processes applied) and their effects could lead to ways of controlling their production, limiting their presence in the end product, and hence, rendering them less toxic.     

肉类微生物学(八)肉类腐败菌

鲜肉和大多数的肉制品都极易变质。一般来说,在动物屠宰放血之后,从由肌肉向肉的转化阶段开始,肉就受到各种微生物、化学和物理因素的作用,进入腐败变质过程。其中以微生物引起的腐败最为普遍,尤其是细菌。因此,本文重点介绍了导致肉类腐败变质的细菌的种类、特性以及各种食品中的腐败细菌。