连翘绿茶和连翘红茶的特征成分测定及营养成分比较

建立了同时测定连翘叶茶中连翘酯苷A、连翘苷、芦丁和连翘脂素的液相色谱方法。采用70%甲醇在70 ℃恒温水浴回流提取目标物,以0.3%醋酸水溶液-甲醇为流动相,选用Waters sunfire C18色谱柱在277 nm下进行液相色谱分析。该方法线性、精密度和回收率好,检出限和定量限低,适用于连翘叶茶中上述四种活性成分的测定。采用标准方法和自建方法对连翘绿茶（FGT）和连翘红茶（FBT）的营养成分进行了比较分析,其中可溶性糖含量较高（14.15%和15.02%）,利于茶汤甘甜滋味及香气形成;FGT的水浸出物（50.62%）、维生素C（48.63 mg/100 g）、总多酚（11.06%）、黄酮（2.39%）、连翘酯苷A（8.77%）、连翘苷（4.98%）和芦丁含量（2.19%）显著高于FBT（p<0.05）,其中特征成分连翘酯苷A和连翘苷含量远高于传统中药连翘（果）;FBT虽特征成分含量低,但在发酵过程中生成了更易吸收和更强药理活性的连翘脂素（2.88%）,含量远高于FGT（0.10%）。此外,FBT茶汤呈橙黄色,含有11.83 mg/100 g的茶黄素。综上,两种连翘叶茶均具有极高的药用价值,极具市场潜力。     

连翘叶固体饮料的研制及活性成分测定

目的 以连翘叶、木糖醇、柠檬酸、麦芽糊精为主要原料,开发一种连翘叶固体饮料。方法 通过单因素、正交实验,以优、中、差三个质量等级对产品的色泽、气味、滋味、状态四个方面进行感官评判,通过模糊数学法处理数据,得到连翘叶固体饮料最佳配方。根据固体饮料的颗粒状态和溶解速度,选取固体饮料产品颗粒粒径;直接干燥法测定固体饮料的水分含量;以高效液相色谱法测定固体饮料中连翘苷和连翘酯苷A的含量。结果 连翘叶固体饮料最佳配方为连翘叶提取物4g,木糖醇5g,柠檬酸0.2g,麦芽糊精4g;固体饮料产品颗粒粒径为40目;水分含量为6.1%,符合国标要求;固体饮料中连翘苷和连翘酯苷A的含量分别为0.34%和0.27%。结论 得到的连翘叶固体饮料颗粒饱满,溶解迅速,冲调后呈透明的黄色,气味淡雅,酸甜适口,本实验可为连翘叶固体饮料的开发提供支持。     

连翘叶中连翘酯苷A的提取及其抗氧化活性

研究连翘叶中连翘酯苷A的制备及其抗氧化活性。采用有机溶剂提取和柱层析方法制备粗连翘酯苷A,进一步用反相硅胶色谱柱层析得到纯化连翘酯苷A,并用高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）测定其纯度;采用体外抗氧化活性法测定粗连翘酯苷A和纯化连翘酯苷A的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、羟自由基（•OH）清除能力、超氧阴离子自由基（O2－·）清除能力、总还原能力和抗脂质过氧化能力。从连翘叶中分离得到的纯度为62%粗连翘酯苷A和92%纯化连翘酯苷A均具有较强体外抗氧化活性,并且清除DPPH自由基、总还原能力和抗脂质过氧化能力强于阳性对照。连翘叶中连翘酯苷A含量丰富,且具有较强的抗氧化生物活性,是具有良好开发前景的天然抗氧化剂和保健食品及生物药品基料。     

连翘叶中连翘酯苷A、芦丁和连翘苷提取纯化工艺优化

对连翘叶提取液中同时分离连翘酯苷A、芦丁和连翘苷的提取纯化工艺进行优化。以连翘酯苷A、连翘苷和芦丁的质量浓度为指标,采用高效液相色谱法分析检测,比较不同型号的大孔吸附树脂和不同工艺条件对这3种活性成分的分离纯化能力。最佳工艺条件为:以AB-8大孔吸附树脂为吸附剂,药材-树脂比1.5∶1(g/g),上样流速2 BV/h,先用8 BV的水洗脱,再用6 BV的30%乙醇溶液和6 BV的50%乙醇溶液分别洗脱,洗脱流速3 BV/h;进一步采用C_(18)-硅胶柱反相层析法纯化连翘酯苷A,静置沉淀的方法纯化连翘苷和芦丁,纯化后连翘酯苷A和芦丁的纯度可达到97%以上,连翘苷纯度可达到95%以上。此工艺条件能得到高纯度的3种有效成分,为连翘叶资源的充分综合利用和产业化开发提供了参考。     

响应面法优化微波辅助提取连翘叶中连翘苷工艺

通过单因素试验研究乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间、提取功率和提取次数6因素对连翘叶中连翘苷得率的影响.在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken Design(BBD)中心试验设计研究响应值以及最佳变量的组合,得出连翘叶中连翘苷提取的二次回归方程.通过响应面法综合评价提取连翘叶中连翘苷的最佳条件为80％vol乙醇,料液比1∶8,90℃、400W下微波5min,在此条件下的连翘苷得率为0.2904％.     

连翘叶连翘苷提取物对高脂饮食诱导大鼠肥胖的预防作用

目的：研究连翘叶中连翘苷提取物对高脂饮食诱导大鼠肥胖的预防作用。方法：将48 只SD大鼠分为6 组,即空白对照组,模型对照组,连翘苷提取物（本实验室自制,连翘苷质量分数为13.3%）低、中、高剂量组和标准品组。连翘苷提取物低、中、高剂量组分别给予连翘苷提取物0.2、0.4、1.2 g/（kg mb·d）,即连翘苷剂量分别为26.6、53.2、159.6 mg/（kg mb·d）,标准品组给予连翘苷标准品（连翘苷质量分数按98%计）54.3 mg/（kg mb·d）,与中剂量组连翘苷剂量相同。空白对照组给予基础饲料,其余各组给予高脂饲料,连续灌胃6 周,观察连翘苷提取物干预后,肥胖大鼠摄食量、体质量、肥胖指数（Lee’s指数）、脂肪系数和血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、总胆汁酸（total bile acid,TBA）、瘦素（leptin,LP）、游离脂肪酸（free fat acid,FFA）水平以及脂肪组织病理切片。结果：模型对照组的TC、LDL-C、TBA、LP、FFA水平均显著高于空白对照组（P＜0.05）;脂肪组织病理结果显示,模型对照组与空白对照组相比,脂肪细胞数量减少,脂肪充盈,细胞膨大,且脂肪细胞当量直径、周长和面积显著大于空白对照组（P＜0.05）;并且内脏脂肪质量及其系数、Lee’s指数、体质量均显著大于空白对照组（P＜0.05）,表明高脂饮食诱导大鼠肥胖成功。与模型对照组相比,连翘苷提取物能够降低肥胖大鼠的TC、LDL-C、LP、FFA水平;脂肪组织病理结果较模型对照组有所改善,可见脂肪细胞数量增加,脂肪细胞变小,但低剂量组效果不明显,高剂量组效果最显著。与模型对照组相比,低剂量组脂肪细胞的面积显著减小（P＜0.05）,中剂量组脂肪细胞的周长和面积显著减小（P＜0.05）,高剂量组脂肪细胞的当量直径、周长和面积显著减小（P＜0.05）。连翘苷提取物还能降低肥胖大鼠的内脏脂肪质量及其系数、Lee’s指数、体质量,且高剂量组效果更显著,中剂量组与标准品组对肥胖大鼠干预效果相当。结论：连翘苷提取物能够预防高脂饮食诱导的大鼠肥胖,连翘叶中的连翘苷是其功能成分。     

连翘苷快速提取纯化工艺研究

连翘是最广泛使用的传统中药之一,具有抗菌、抗病毒、抗炎和抗氧化活性等重要的药理作用,而连翘苷是连翘的主要生物活性成分。为了从连翘叶中快速简便地提取、分离和纯化得到纯度较高的连翘苷,试验采用无水乙醇和体积浓度85%乙醇回流提取,大孔树脂柱层析和石油醚萃取的方法分离,重结晶法进行纯化,经不同组合试验以确定最佳制备工艺。通过HPLC测定比较所得连翘苷的含量、纯度,最终确定了以无水乙醇回流提取,石油醚萃取分离,重结晶纯化的工艺流程,通过该方法可以得到纯度达90%的连翘苷。     

连翘及连翘叶体外抑菌作用研究*

采用平板培养法和抑菌圈直径比较法，比较青翘、老翘、连翘叶的抑菌活性，寻找连翘的最佳抑菌部位，以及有效抑菌成分。试验结果显示，青翘、老翘和连翘叶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有较好的抑制作用，且连翘叶的抑制菌效果与青翘相当，青翘的抑菌效果强于老翘；青翘、老翘和连翘叶对酿酒酵母、黄曲霉和产黄青霉的抑制作用不强；青翘的体积浓度40%乙醇提取部位为有效抑菌部位。连翘酯苷A可能是主要抑菌活性成分，连翘叶也具有较强的抑菌活性，具有较好的开发前景。     

基于响应面法和熵权法优化连翘叶中连翘酯苷A、连翘苷和芦丁提取工艺

本文优化了连翘叶多指标成分的超声提取工艺。采用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）同时测定连翘叶提取物中连翘酯苷A、连翘苷和芦丁的提取量,以乙醇浓度、液料比、提取温度及提取时间为考察因素,运用熵权法计算权重系数,进行多指标综合评分,并以综合评分为指标,通过Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果表明,连翘叶最佳提取工艺:乙醇浓度50%,液料比28:1 mL/g,提取温度51 ℃,提取时间25 min。验证实验表明在此优化工艺条件下,连翘酯苷A、连翘苷和芦丁的提取量分别为69.69、22.87、22.46 mg/g,综合评分为32.18,RSD均小于3%。该提取工艺稳定、可行,有效成分提取量较高,适用于连翘叶连翘酯苷A、连翘苷和芦丁的提取。     

河南、山西连翘叶黄酮类和三萜酸类 化合物含量比较

为进一步对连翘叶中黄酮类化合物和三萜酸类主要活性成分含量进行分析,分别采用分光光度法和高效液相色谱法测定河南、山西连翘叶中总黄酮、芦丁、金丝桃苷、槲皮素、总三萜酸、齐墩果酸、熊果酸含量。结果表明：河南连翘叶中总黄酮、芦丁、金丝桃苷含量和槲皮素含量高于山西连翘叶中的含量,而山西连翘叶中总三萜酸、齐墩果酸含量和熊果酸含量高于河南连翘叶中的含量。连翘叶中黄酮类和三萜酸类的含量较高,结果为综合利用连翘叶资源提供参考依据。     

黄连、连翘对几种常见食品污染菌的体外协同抑菌效果

测定了黄连、连翘对6种常见食品污染菌的抑制效果并对其协同抑菌配方进行了优化。通过测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度2个指标判定黄连、连翘对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌、汉逊酵母和黑曲霉的抑菌能力大小,并利用FIC值判定黄连、连翘的体外联合抑菌能力。以藤黄微球菌为例,通过配方试验对黄连-连翘体外抑菌协同效应最佳配比进行优化。结果显示,黄连、连翘配伍后对6种菌的抑制能力均有一定的协同或相加效果;对藤黄微球菌的体外联合抑菌配方试验得出黄连、连翘的最佳配比为4.523∶5.477,此时具有最大的协同作用。     

化学改性对连翘不溶性膳食纤维理化性质、结构及乳化稳定性的影响

本试验以连翘为原料,运用双酶法提取连翘中的不溶性膳食纤维（Insoluble Dietary Fiber,IDF）,然后采用羧甲基化（Carboxymethylation,CM）、羟丙基化（Hydroxypropylation,HP）和交联（Cross-linking,CL）改性对提取出的连翘IDF进行化学改性,并对它们的理化性质、结构和乳化特性进行了分析。试验结果表明,改性处理使连翘IDF的持水力降低,持油力显著提高了21%～53%（P<0.05）,CM改性和HP改性使连翘IDF膨胀力提高了约73%。结构表征表明:三种改性处理使连翘IDF颗粒体积明显变小、结构更加疏松、热稳定性提高,且降低了其结晶度。改性对连翘IDF乳液在温度、pH、离子强度稳定性等方面有不同程度的提高,且具有良好的贮藏稳定性,其中经CL改性后的连翘IDF乳液整体稳定性最好。     

山西野生连翘主产地连翘叶中15种稀土元素的调查

目的调查山西野生连翘主产地安泽县、陵川县、平定县、古县的连翘叶中15种稀土元素的含量水平及15种稀土总量、轻稀土总量、重稀土总量的分布特征。方法采集四县2018年5月、6月、7月产野生连翘叶,样品经高压罐消解后,采用电感耦合等离子体质谱仪检测15种稀土元素的含量,用SPSS23对数据进行分析。结果样品中15种天然稀土元素均检出,铈(Ce)、镧(La)、钕(Nd)、钇(Y)共占稀土总量的84.3%～92.3%,Ce含量最高,铥(Tm)、镥(Lu)含量最低。轻稀土总量占稀土总量的76.1%～86.7%,是重稀土总量的3.2～6.5倍。稀土总量、重稀土总量均存在时间差异性(P0.05)。稀土总量、轻稀土总量、重稀土总量均存在地区差异性(P0.05)。结论野生连翘叶中15种稀土总量、轻稀土总量、重稀土总量存在一定的时间差异性和地区差异性。     

HPLC-ELSD法同时测定连翘叶中齐墩果酸和熊果酸

目的：建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(high performance liquid chromatography -evaporative light scattering detector,HPLC-ELSD)法同时测定连翘叶中齐墩果酸和熊果酸。方法：色谱柱：Waters Symmetry C18(4.6mm×250mm,5μm);柱温25℃,流动相：甲醇-0.4%冰醋酸溶液(93:7,V/V),流速0.4mL/min;蒸发光散射检测器检测条件：漂移管温度80℃,气体压力25psi。结果：齐墩果酸在0.107～2.136μg范围内线性关系良好(r=0.9991),熊果酸在0.179～3.584μg范围内线性关系良好(r=0.9993);齐墩果酸和熊果酸的回收率分别为98.67%和98.56%。结论：此方法简便、准确,重现性良好,为评价连翘叶的质量提供可靠的分析方法。     

连翘叶发酵型饮料的研制及抗氧化活性研究

以连翘叶、白砂糖、阿拉伯胶为主要原料,制备连翘叶发酵型饮料。在单因素试验基础上,以感官评分为评价指标,采用二次通用旋转组合试验优化其发酵工艺,并考察其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除能力及还原力。结果表明,连翘叶发酵型饮料的最佳发酵工艺条件为白砂糖添加量5%,复合菌种(克鲁维毕赤酵母∶植物乳杆菌=1∶1)接种量0.04%,连翘叶粉添加量2.0%,阿拉伯胶添加量0.6%,发酵时间18 h。在此优化条件下,连翘叶发酵型饮料感官评分为(86.53±1.03)分,色香味俱佳,口感酸甜,无明显苦味,理化与微生物指标均符合相关国家标准。连翘叶发酵型饮料的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率及还原力(OD_{700 nm}值)分别为(90.57±2.63)%、(79.85±1.74)%、(0.736±0.04),表明其具有良好的抗氧化性。