利用重组人源靶抗原二联体OP检测M2抗体及临床意义

目的 利用重组抗原检测自身免疫病患者血清中抗OP自身抗体并探讨其临床意义。方法 经Ni-NTA柱纯化表达重组OP融合蛋白作为抗原，分别用免疫印迹法（IBT）和酶链免疫吸附试验（ELISA）检测70份PBC患者血清，80份其它肝病患者血清，80份自身免疫病患者血清和100份正常人血清。结果 70份PBC患者血清中检测出阳性患者62例，阴性8例，阳性率为87．6％。其它肝病患者血清、自身免疫病患者血清和正常人血清均为阴性。重组抗原检测M2抗体有一定的敏感性。结论 利用重组抗原OP检测M2抗体，有较好的敏感性及特异性，有助于PBC的临床诊断。     

用ELISA检测抗丙酮酸脱氢酶复合物E2和E3结合蛋白自身抗体

目的　用重组丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位和E3结合蛋白 (PDC E2 ,PDC E3BP)建立筛查原发性胆汁性肝硬化 (PBC)患者相应自身抗体的ELISA。方法　用本室制备的重组PDC E2和PDC E3BP蛋白包被酶联反应板 ,检测PBC患者、正常人及其他肝病患者血清。结果　组建成筛查PBC患者血清中自身抗体的试剂盒 ,能够准确地检测PBC患者血清中的自身抗体。结论　建立的试剂盒能用于PBC患者血清中丙酮酸脱氢酶复合物自身抗体的检测。     

用重组丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位检测M2抗体及其临床意义

目的用重组表达的丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位（PDC-E2）检测M2抗体，以利于原发性胆汁性肝硬化（PBC）的早期诊断。方法采用重组表达的PDC—E2建立了免疫印迹法（IBT）和酶联免疫吸附试验（ELISA）。检测40例PBC患者血清的M2抗体，以其他肝病患者、自身免疫病患者、健康体检者作对照。结果40例PBC患者血清中检测出抗PDC—E2抗体阳性37例，阴性3例，阳性率为92．5％，而疾病对照组和健康体检者血清中该抗体检测均为阴性。结论用重组表达的人PDC-E2检测抗体有较好的敏感性和特异性，有助于PBC的临床诊断。     

用重组丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位检测M2抗体及其临床意义

目的用重组表达的丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位(PDC-E2)检测M2抗体,以利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期诊断。方法采用重组表达的PDC-E2建立了免疫印迹法(IBT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。检测40例PBC患者血清的M2抗体,以其他肝病患者、自身免疫病患者、健康体检者作对照。结果40例PBC患者血清中检测出抗PDC-E2抗体阳性37例,阴性3例,阳性率为92.5%,而疾病对照组和健康体检者血清中该抗体检测均为阴性。结论用重组表达的人PDC-E2检测抗体有较好的敏感性和特异性,有助于PBC的临床诊断。     

原发性胆汁性肝硬化患者血清相关自身抗体检测及其临床意义

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者血清自身抗体的临床意义。 方法 对248例不明原因的肝功能持续异常患者应用间接免疫荧光法（IIF）进行血清抗核抗体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）检测，应用免疫斑点法（Euroassay）进行抗肝肾微粒体-1（LKM-1）、抗肝溶质抗原-1（LC～1）、抗可溶性肝抗原／抗肝胰抗原（SLA／LP）、抗线粒体M2型（AMA-M2）检测，并结合生化指标及免疫球蛋白指标进行分析。 结果 248例不明原因的肝功能持续异常患者中，PBC51例，占20．5％，其余197例原因不明。PBC患者的AMA-M2抗体均为阳性，ANA阳性32例占62．7％。ANA的主要荧光模式为核膜型和核点型。PBC患者ALP、GGT及免疫球蛋白M高于乙型肝炎肝硬化患者。在51例PBC中，4例表现为自身免疫性肝病重叠综合征，其中1例抗SLA／LP阳性，提示PBC与自身免疫性肝炎（AIH）3型重叠，1例抗LKM-1阳性，提示PBC与自身免疫性肝炎（AIH）2型重叠，2例ANA，SMA抗体阳性，提示PBC为与自身免疫性肝炎（AIH）1型重叠综合症。 结论 自身抗体及肝抗原抗体的检测对PBC诊断有重要意义；PBC患者存在PBC／AIH重叠综合征；对原因不明的肝功能异常的患者进行肝抗原自身抗体的检测有助于临床诊断。     

原发性胆汁性肝硬化血清抗线粒体抗体亚型的检测及诊断价值

目的 探讨抗线粒体亚型（AMA亚型）对原发性胆汁性肝硬化（PBC）的诊断价值。方法 应用酶免疫斑点法检测血清中AMA—M2、M4、M9亚型。8例经临床诊断为PBC患者，47例非PBC肝胆病患者。结果 8例PBC患者M2均阳性、但M4及M9均阴性；47例非PBC肝胭病患者M2、M4、M9均阴性。4例PBC者肝活检Ⅰ期及Ⅳ期各1例、2例为Ⅱ期。结论 血清AMA-M2抗体检测可作为临床诊断PBC的重要血清免疫学诊断指标。     

利用重组抗原检测抗SSA/Ro-52kD自身抗体及其临床意义

目的重组表达SSA/Ro-52kD融合蛋白,并用于检测自身抗体. 方法应用DNA重组技术构建SSA/Ro-52kD工程菌,并表达SSA/Ro-52kD融合蛋白.经谷胱甘肽巯基转移酶(GST)柱层析纯化后,作为抗原,分别用免疫印迹法(IBT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测20份SS患者血清、60份SLE患者血清和30份正常人血清. 结果重组抗原检测抗SSA/Ro-52kD自身抗体敏感性较高,而且抗体滴度与病程相关. 结论利用重组抗原对自身抗体进行定性、定量分析有助于自身免疫病的诊断和监控.     

M2抗体人源靶抗原三联体的克隆表达及其在原发性胆汁性肝硬化中的应用

目的 设计克隆表达抗原蛋白三联体BPO，利用纯化的重组BPO，建立原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)特异性免疫学诊断方法。方法 利用基因工程方法克隆表达M2抗原及其三联体BP0，并加以鉴定。纯化BPO，建立ELISA法。应用ELISA法检测17例PBC患血清M2抗体，以167例非PBC患和1225例健康人作对照。结果 17例临床诊断为PBC的患，M2抗体均为阳性，而对照组M2抗体均为阴性。结论 本法检测M2抗体有较好的敏感性及特异性，为PBC的临床诊断提供了有效手段。     

自身免疫性肝病患者抗肝抗原自身抗体的检测

目的：了解自身免疫性肝病忠者抗肝抗原自身抗体检测的意义。方法：应用间接免疫荧光法检测抗核抗体（ANA）、抗线粒体抗体M2亚型（AMA—M2）、抗平滑肌抗体（SMA）和酶免疫条带技术检测抗肝肾微粒抗体Ⅰ型抗体（LKM-1）、抗可溶性肝抗原／肝胰抗原抗体（SLA／LP）和抗肝细胞溶质Ⅰ型抗体（LC-1）。结果：血清抗肝抗原自身抗体在各组肝病标本中的总检出阳性率分别为89．5％（AIH）（17／19）、95．5％（PBC）（21／22）、60％（PSC）（3／5）、7．9％（CHB）（5／63）、17．8％（CHC）（5／28），正常对照组阳性率为2．8％（1／36），经x^2检验自身免疫性肝病组与其他组间有显著性差异（P〈0．01），自身免疫性肝病组之间无显著性差异。结论：抗肝抗原自身抗体检测在自身免疫性肝病的诊断和分型方面具有重要应用价值。     

云南大理白族231例肝损伤患者AMA-M2检测结果分析

目的探讨临床早期发现和诊断原发性胆汁性肝硬化（PBC）的实验室诊断指标。方法采用免疫印迹法对大理地区非病毒性肝损伤的白族患者血清231例,检测抗线粒体抗体M2亚型抗体（AMA—M2）。结果231例血清中AMA—M2阳性31例,占非病毒性肝病患者的13．4％。男性4例,女性27例,男女之比为1：6．7。结论AMA—M2在大理地区非病毒性肝病白族患者血清中有较高的阳性率,检测AMA—M2可早期诊断、早期治疗PBC,对预防和推迟肝纤维化和肝硬化的发生具有重要的意义。     

原发性胆汁性肝硬化自身抗体谱的检测及临床应用

目的 探讨联合检测多种自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的价值及临床意义.方法 用免疫印迹法分别检测96例PBC患者,100例其他自身免疫性疾病(AID)患者和49名健康体检者血清中的抗线粒体(AMA)-M2亚型抗体、抗3E(BPO)抗体、抗Sp100抗体、抗旱幼粒细胞性白血病(PML)抗体、抗gp210抗体、抗肝肾微粒体-1(LKM-1)抗体、抗肝特异性胞质抗体-1(LC-1)、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(SLA/LP).结果 96例PBC患者中AMA-M2、抗3E(BPO)抗体、抗Sp100抗体、抗PML抗体、抗gp210抗体阳性率分别为76.0%、84.4%、32.3%、28.1%、35.4%,而以上5种自身抗体在其他自身免疫性疾病中的阳性率分别为13.0%、9.0%、3.0%、2.0%、1.0%;AMA-M2对PBC诊断的敏感度达76.0%,特异度达87.0%;抗3E(BPO)抗体对PBC诊断的敏感度达84.4%,特异度达91.0%;抗Sp100抗体对PBC诊断的敏感度达32.3%,特异度达97.0%;抗PML抗体对PBC诊断的敏感度达28.1%,特异度达98.%;抗gp210抗体对PBC诊断的敏感度达35.4%,特异度达99.0%,未检测到抗LKM-1抗体、抗LC-1抗体及抗SLA/LP抗体;抗gp210抗体阳性患者肝功能衰竭的发生率明显高于抗体阴性患者(χ2 =11.17,P<0.01).结论 PBC患者中可检测到多种自身抗体,自身免疫性肝病自身抗体谱检测对PBC诊断、鉴别诊断、治疗及预后判断均有重要意义.     

血清抗线粒体抗体M_2亚型检测在原发性胆汁性肝硬化临床诊断中的价值

目的:探讨抗线粒体抗体(AMA)-M2亚型检测在原发性胆汁性肝硬化(primary billiary cirrhosis,PBC)诊断中的价值。方法:应用酶联免疫吸附试验,检测20名健康对照者、139例其他非PBC疾病患者和42例PBC患者血清中的AMA-M2水平,并采用矩阵图决策法分析血清AMA-M2检测对PBC的诊断效率。结果:健康对照者平均血清AMA-M2水平为(16.51±1.38)RU/mL,非PBC患者的平均血清AMA-M2水平为(24.33±7.29)RU/mL,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。PBC患者的平均AMA-M2水平为(211.51±126.68)RU/mL,与健康对照者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。AMA-M2检测对PBC诊断的灵敏度为95.2%,特异度为97.4%,准确率达95.6%,阴性预测值为98.7%,阳性预测值为90.9%。结论:血清AMA-M2检测有较高的诊断效率,可作为PBC诊断的重要血清免疫学指标。     

重组抗原检测抗干燥综合征A 抗原的自身抗体

目的 建立便捷的检测抗干燥综合征（ＳＳ）Ａ抗原（分子量为６００００的多肽成分）的自身抗体（抗ＳＳＡ）的方法,以利用疾病的早期诊断和病程监控。方法 构建基因工程菌,表达ＳＳＡ－６００００融合蛋白。经ＧＳＴ柱层析法纯化后,分别经免疫印迹（ＩＢＴ）法和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测２０份ＳＳ患者血清、６０份系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清和３０份正常人血清。结果 利用重组抗原检测抗ＳＳＡ自身抗体敏感性     

抗线粒体-M2抗体在原发性胆汁性肝硬化的意义

目的探讨抗线粒体抗体-M2亚型(AMM-M2)对原发性胆汁性肝硬化(PBC)的意义.方法应用酶免疫斑点法(DIBA)检测抗AMA-M2抗体163例,M2抗原包被区出现深蓝或紫色条带为阳性,无颜照色为阴性.结果PBC患者39例,AMA-M2抗体38例阳性,阳性率97.4%;自身免疫性肝炎患者16例,AMA-M2抗体1例阳性,阳性率为6.3%;慢性乙型肝炎、系统性红斑狼疮和正常对照组均阴性.PBC患者AMA-M2抗体阳性率明显高于其它组(P＜0.01).该法灵敏度为97.4%,特异性为98.9%.结论DI-BA检测AMA-M2抗体灵敏度高,特异性强,可作为PBC重要的血清学指标,同时结合临床症状、生化检查、肝组织活检等提高PBC的诊断率.     

Low specificity of anti-tissue transglutaminase antibodies in patients with primary biliary cirrhosis

The association between celiac disease (CD) and primary biliary cirrhosis (PBC) is well documented in medical literature; however, a high frequency of false positive results of the anti-transglutaminase (anti-tTG) test has been reported in patients with PBC. To verify if the positive results for anti-tTG autoantibody are false positives due to cross reactivity with mitochondrial antigens, we studied 105 adult patients affected with PBC, positive for anti-mitochondrial M2 antibodies. Anti-tTG IgA antibodies were studied by using six different immunoenzymatic assays that employ the tTG antigen obtained from different sources (human recombinant, placenta, red blood cells, and guinea pig liver). On the whole, 28 out of 105 PBC subjects tested positive for anti-tTG IgA antibodies, but only two were eventually found to be affected by CD; the other 26 were shown to be false positive. The specificity of the various antigenic substrates ranged from 88.5% of the human erythrocytes tTG to 97.1% of the human recombinant tTG. The results of this study showed that a true association between PBC and CD was present in only 2% of the patients and that, in most cases, the false positive results were attributable to the type of substrate utilized in the assay.     

利用重组抗原检测抗SSA＼Ro—52kD自身抗体及其临床意义

目的 重组表达ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ融合蛋白,并用于检测自身抗体。方法 应用ＤＮＡ重组技术构建ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ工程菌,并表达ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ融合蛋白,经谷胱基肽巯基转移酶（ＧＳＴ）柱层析纯化后,作为抗原,分别用免疫印迹法（ＩＢＴ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测２０份ＳＳ患者血清、６０份ＳＬＥ患者血清和３０份正常人血清。结果 重组抗原检测抗 ＳＳＡ／Ｒｏ－５２ｋＤ自身抗体敏感性较高     

抗巨噬细胞抗体检测在心血管疾病的应用

本文报告201例心血管疾患病者血清抗巨噬细胞抗体(抗 Mφ抗体)检测结果。201例病人抗 Mφ抗体总阳性率51.2%;其中心肌炎、风心病和类风湿关节炎阳性率高,均在80%以上,且显著高于其它各疾病组;冠心病阳性率46.2%;其它疾病阳性很少。结果提示抗 Mφ抗体可能在一些心血管病病程中起一定作用,该检测有助于某些疾病的诊断、鉴别及提供治疗参考。