二肽酰肽酶Ⅳ抑制剂灌洗、保存供肺对大鼠移植肺功能的影响

目的 探讨二肽酰肽酶Ⅳ(DPPⅣ酶)抑制剂灌洗、保存供肺对大鼠移植肺功能的影响.方法 将纯系SD大鼠随机分为6组,供、受者均为SD大鼠.对照组1和对照组2的供肺用低钾右旋糖苷液(LPD液)灌洗,并保存18 h,然后行左肺移植,于移植后1 d测定对照组1受者的气道峰压(PIP)、静脉血氧分压(POe)、移植肺湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)含量,对照组2用于观察术后7 d存活率;共设4个实验组(实验组1～实验组4),供肺用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂的LPD液灌洗,并保存18 h,然后行左肺移植,分别于移植后1(实验组1)、3(实验组2)、5(实验组3)和7 d(实验组4)测定受者的各项肺功能指标.结果 对照组2大鼠至术后第7天全部死亡,实验组4的大鼠均存活至术后第7天.与对照组1比较,各实验组的PIP值降低(P<0.05),PO2值升高(P<0.05),W/D值降低(P<0.05),MPO活性及MDA含量降低(P<0.05),差异有统计学意义,并且随着时间的推移,实验组的上述指标不断改善,至术后第7天,各项检测值接近正常.结论 以特异性不可逆DPPⅣ酶活性抑制剂灌洗、保存供肺能显著减轻移植肺的缺血再灌注损伤,有利于移植肺功能的恢复.     

抑制核因子-κB表达对大鼠供肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂氟美松对大鼠供肺缺血-再灌注损伤的保护作用。方法24只大鼠随机分为两组,实验组采用含氟美松的低钾右旋糖酐(LPD)液灌洗和保存供肺,对照组以LPD液灌洗和保存供肺,16h后建立离体肺再灌注模型,循环灌注1h。再灌注期间,每隔15min测定供肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)和气道峰压(PawP);再灌注结束后测定肺组织湿重与干重比(W/D)以及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性、细胞间粘附分子(ICAM-1)和NF-κB的表达。结果再灌注15min后,两个组的PaO2逐渐降低、PawP逐渐升高,但实验组PaO2的降低程度和PawP的升高程度明显低于对照组(P<0.01);再灌注后,实验组的W/D和MPO明显低于对照组(P<0.01),其肺组织中ICAM-1、ICAM-1mRNA、NF-κB及NF-κBmRNA的表达量也明显低于对照组(P<0.01)。结论应用氟美松抑制NF-κB的表达对大鼠供肺缺血-再灌注损伤具有保护作用。     

经左房灌注低钾右旋糖酐液对兔供体肺功能的保护作用

目的通过左房及肺动脉灌注低钾右旋糖酐(LPD)液,比较两种灌注方法对供体肺功能及结构的保护作用.方法取24只新西兰大白兔,随机分为经肺动脉灌注组(AF组,n=6)与经左房逆行灌注组(RF组,n=6),4℃保存16 h;循环灌注过程1 h;循环灌注期间每隔10min测定动脉氧分压(PaO2)、动脉二氧化碳分压(PaCO2);计算肺泡气动脉血氧分压差(A-aDO2);每隔10min记录供体肺动脉压(PaP)、气道峰压(PawP);计算比较两组供体肺顺应性(CL)及含水量的变化;光学显微镜、透射电镜分别观察两组供体肺移植前后的病理改变.结果 RF组供体肺在整个循环灌注过程中能基本保持良好的肺功能,灌注后60 min仍能保持PaO2＞84.96 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa);再灌注20 min后各时段,AF组氧合能力与RF组相比明显降低(P＜0.01);至再灌注50 min后,AF组PaCC2高于RF组(P＜0.05).在移植20 min后各时段,AF组PaP均高于RF组(P＜0.05);移植30 min后各时段,AF组PawP明显高于RF组(P＜0.01);至再灌注末期RF组与AF组相比仍能保持较好的顺应性(P＜0.01);移植后AF组供体肺含水量高于RF组(P＜0.01).光镜、透射电镜观察结果供体肺移植后,RF组肺泡结构完整,基本保持Ⅰ、Ⅱ型肺泡细胞的完整性.结论经左房逆行灌注LPD液,对供体肺的保护效果优于经肺动脉灌注;能在一定程度上减轻缺血-再灌注对供体肺的损伤.     

缓激肽β2受体拮抗剂在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 探讨缓激肽β2受体拮抗剂（HOE-140）对大鼠移植肺功能的影响以及作用.方法 将纯系SD大鼠随机分为3组,即实验组1、实验组2、对照组.对照组的供肺用低钾右旋糖苷液（LPD液）灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,于移植后1d测定对照组的气道峰压（PAP）、静脉血氧分压（PO2）、移植肺湿干重比（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性.实验组1以及实验组2（加HOE-140干预）的供肺用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂（AB192）的LPD液灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,分别于移植后1d测定受者的各项肺功能指标,并取相同受体肺部组织做病理学检查. 结果 与对照组比较,各实验组的PAP值降低（P＜0.05）,PO2值升高（P＜0.05）,W/D值降低（P＜0.05）,MPO活性降低（P＜0.05）,差异有统计学意义,病理学结果显示实验组2（HOE-140组）均优于对照组及实验组1.结论 缓激肽β2 受体拮抗剂HOE-140能有效降低肺移植肺缺血再灌注损伤,从而改善移植肺功能.     

肾上腺髓质素对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察肾上腺髓质素(ADM)在肺缺血再灌注损伤的保护作用.方法 三套管法建立大鼠左肺移植模型,分对照组和静脉ADM给药组(每分钟0.05μ/kg体重),分别进行髓过氧化物酶(MPO)活性测定、移植肺支气管肺泡灌洗液(BAL)中性粒细胞计数、缺血再灌注后血气分析以及移植肺组织湿/干(W/D)重最比测定.结果 再灌注4 h后,对照组的MPO活性(0.45±0.07)显著大于ADM给药组(0.24±0.06),差异有统计学意义(t=2.764,P<0.05).对照组左肺BAL中性粒细胞计数值为(152士23)×105,明显高于ADM给药组的BAL中性粒细胞计数值(87±12)×103,t=2.813,P<0.05.对照组移植肺组织湿/干(W/D)重量比为8.39±0.96,显著高于ADM给药组7.02±0.71(t=3.509,P<0.01).在灌注2 h时,对照组左肺静脉血氧分压为(177.62±23.12)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),显著低于ADM给药组(438.50±45.5)mm Hg(t=3.016,P<0.05);再灌注4 h时,对照组左肺静脉血氧分压为(141.75±19.32)him Hg,显著低于ADM给药组427.75±49.98(t=3.248,P<0.05.此外,对照组在再灌注4 h的左肺静脉血氧分压较再灌注2 h时明显降低(t=2.583,P<0.05);而ADM给药组在再灌注2h和4 h时的左肺静脉血氧分压却无显著变化(t=2.134,P>0.05).结论 ADM能够通过抑制移植肺缺血再灌注过程中炎性损伤的机制发挥其器官保护的功能.     

CD26/二肽酰肽酶Ⅳ底物缓激肽在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的表达

目的 研究CD26/二肽酰肽酶(DDP)Ⅳ底物缓激肽在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的表达.方法 采用改进的三套管左侧大鼠原位肺移植方法构建模型,供、受者均为雄性SD大鼠.受鼠分为两组,每组18只.对照组受鼠接受用低钾右旋糖苷液灌洗并保存18 h的供肺;实验组受鼠接受用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂(AB192,终浓度25 μmol/L)的低钾右旋糖苷液灌洗并保存18 h的供肺.肺移植术后1 d,获取移植肺,部分样本行蛋白质组学分析(二维凝胶电泳),并行质谱分析,鉴定与移植后缺血再灌注损伤相关的蛋白质;另外分别用免疫组化法和蛋白质印迹法检测缓激肽β2受体的表达.结果 样本鉴定分析出差异蛋白质14个,其中对照组缓激肽前体(激肽原1)的表达高于实验组(P<0.05).蛋白质印迹证实,实验组缓激肽β2受体的表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化结果也证实,缓激肽β2受体在组织上呈分泌型表达,通常以呼吸道上皮细胞以及肺泡巨噬细胞周边染色较明显.对照组显色明显较深,缓激肽β2受体表达高于实验组.结论 CD26/DDPⅣ酶活性抑制剂减轻大鼠肺移植术后早期缺血再灌注损伤的机制可能与其抑制激肽类物质的表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the expression of bradykinin as a substrate of CD26/DPP Ⅳ in rats with ischemia/reperfusion injury following lung transplantation (LTx). Methods Thirty-six syngeneic male SD rats were randomly allocated into control group and experimental group (n= 18each), and 36 rats served as donors. In control group and experimental group, the lungs were flushperfused and preserved with LPD and LPD+ CD26/DPP TV catalytic inhibitor (AB192) respectively,and LTx was performed 18 h after cold ischemia Histopathological studies were also done on the same locus of lung specimens and staining for bradykinin. The different proteins were separated by means of immobilized PH gradient-based two-dimensional gel electrophoresis. The differential expression of bradykinin was compared by Western blotting. Results The expression of bradykinin in control group was significantly higher than in experimental group. As compared with experimental group,bradykinin expression was significantly up-regulated in control group (P <0 . 05 ). Conclusion Inhibitor of CD26/DDP Ⅳ enzymatic activity significantly ameliorated ischemia/reperfusion injury in the early stage after LTx, which is probably associated with inhibition of the protein expression of bradykinin.     

硝普钠在预防肺缺血再灌注损伤中的作用及机制

目的探讨硝普钠在预防肺缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法将14头猪随机平均分为对照组和实验组。对照组:在去除肺动脉阻断,恢复自体血流前,给予控制性再灌注[用35℃-37℃再灌注液(去白细胞:改良Buckberg液=4:1),灌注压18 mm Hg,灌注时间10min]。实验组:在去除肺动脉阻断,恢复自体血流前,给予控制性再灌注;后经肺动脉注入硝普钠1.0μg·kg-1·min-1 ×10min。0.5、1和2 h后测两组的血氧分压、肺血管阻力、肺顺应性及肺氧合功能变化;实验结束后,取肺组织测一氧化氮(NO)含量、丙二醛(MDA)含量及肺含水量。结果实验组的左肺氧合功能和肺顺应性明显好于对照组(P<0.05)。肺循环阻力、MDA含量及肺含水量均低于对照组(P <0.01)。实验组和对照组肺组织中NO含量分别为:(114.41±6.77)μmol/L和(56.67±7.42) μmol/L,实验组较对照组明显升高(P<0.01)。结论硝普钠可使肺组织中NO含量显著升高,有效的预防了肺缺血再灌注损伤。     

黄芪提取液对胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨黄芪提取液对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响.方法:以常规的Euro Collins液(EC)为对照组,以EC液添加黄芪提取液为实验组,量约50～60 mL(0～4℃),分别对离体犬胰腺进行低温灌注保存24h,通过光镜、电镜观察胰腺组织结构变化,建立犬胰腺节段自体移植模型,检测移植后第1周血糖、静脉葡萄糖耐量实验(ⅣGTT)、胰液淀粉酶,比较移植物存活率,综合分析.结果:实验组保存的犬胰腺组织超微结构损伤明显轻于对照组.移植胰腺早期功能指标检测,实验组血糖值(93.5±16.0)mg/dl明显低于对照组(197.6±21.3)mg/dl,ⅣGTTK值实验组(1.51±0.36)高于对照组(0.87±0.24),差异均具有显著意义(P＜0.05).实验组移植物存活率(100%)高于对照组(50%).结论:黄芪用于胰腺低温灌注保存中,对缺血再灌注损伤的胰腺有一定保护作用.     

体外循环中有效的肺动脉灌注方式

目的 探索方便、有效的肺动脉灌注模式,以缓解体外循环心脏术后肺损伤.方法 14只健康家犬模拟临床体外循环肺损伤特点建立动物模型,随机平均分为对照组及灌注组.体外循环期间,分别于实验肺缺血之初及再灌注之前,以15～20 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)的灌注压力短时间对灌注组动物实验肺实施改良低钾右旋糖酐保护液灌注;对照组动物无保护液灌注.90 min体外循环肺缺血后,再灌注4 h,行实验肺肺功能变化测定.结果 再灌注后,两组动物实验肺肺功能均有不同程度的恶化.对照组,再灌注后实验肺顺应性及氧合指数均有较大幅度的下降,分别为(30±4)%及(45±5)%,肺血管阻力指数明显上升,幅度为(76±7)%;与对照组比较,灌注组上述指标的变化幅度均明显降低,分别为[(12±2)%,t0.01/2,12=4.885,P＜0.01];[(19±2)%,t0.01/2,12=5.656,P＜0.01];[(28±3)%,t0.01/2,12=6.853,P＜0.01)].结论 应用肺动脉灌注方式可明显减轻体外循环过程中肺组织的损伤,保护肺功能;实验的灌注方式可望方便地应用于临床体外循环心脏手术过程,不会明显干扰既定手术进程.     

乌司他丁减轻无心跳大鼠供肺缺血再灌注损伤的作用及机制

目的 研究乌司他丁(UTI)减轻无心跳大鼠供肺缺血再灌注损伤作用及作用机制.方法 选取雄性SD大鼠作为供、受鼠建立无心跳大鼠左肺移植模型,将受鼠分为对照组和实验组,对照组受鼠接受的供肺经低钾右旋糖酐(LPD)液灌注和保存,实验组受鼠接受的供肺经含乌司他丁(50万U/L)的LPD液灌注和保存.移植过程中监测受鼠的动脉血氧合情况;移植肺再灌注30 min和1h时,取两组受鼠移植肺组织,测量和计算湿干质量比,检测移植肺组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;提取RNA,采用实时定量聚合酶链反应检测移植肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-a)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和白细胞介素10(IL-10) mRNA的相对表达量.结果 再灌注后1h,实验组的氧合指数(PaO2/FiO2)为472.38±31.66,显著高于对照组的429.52±14.83,两组比较,差异有统计学意义(P=0.025).与对照组相比,实验组在再灌注30 min和1h时的水肿情况(湿干质量比)均好于对照组(P=0.005,P=0.006),实验组移植肺组织病理损伤也明显轻于对照组.不论再灌注30 min还是1h,实验组移植肺组织中MDA含量较对照组显著降低(P=0.039,P=0.006),而SOD含量显著升高(P=0.035,P=0.030).再灌注30 min时,实验组TNF-a的表达较对照组显著下降(P=0.000),再灌注1h时下降不明显(P=0.139);再灌注30 min时,ICAM-1水平较对照组下降不明显(P=0.062),再灌注1h则存在明显降低(P=0.001);再灌注30 min和1h时,实验组IL-10 mRNA的表达水平均较对照组显著上调(P=0.004,P=0.000).结论 乌司他丁能够减轻无心跳大鼠供肺的缺血再灌注损伤,对移植肺有保护作用.     

西地那非在犬肺移植缺血再灌注损伤中的作用

目的 观察5型磷酸二酯酶抑制剂西地那非在肺移植缺血再灌注损伤中的作用.方法 12对体重匹配杂种犬随机分为对照组(n=6)和实验组(n=6),利用同种异体犬左单肺移植模型,实验组供肺肺动脉阻断前经主肺动脉注射西地那非1.0 mg/kg体重,移植后持续泵入西地那非每小时0.3 mg/kg体重,对照组给予等容量生理盐水.观察移植前及移植后30、60、120、180min移植肺上叶静脉血氧分压(PO2)变化,于移植后120 min取肺组织,测丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)及组织含水量(H)并观察组织形态学变化.结果 实验组PO2明显高于对照组(293±52比160±45,P＜0.05);供肺组织MDA(0.25±0.09比0.50±0.09)、MPO含量(0.13±0.06比0.25±0.09)及含水量(71.59±4.63比78.04±3.73)明显低于对照组(P＜0.05);组织形态学显示实验组损伤程度较对照组轻.结论 西地那非在供肺保存及再灌注损伤中具有肺保护作用.     

控制性再灌注防止肺再灌注损伤的研究

目的　探讨控制性再灌注在预防肺缺血再灌注 (I/R)损伤中的作用及其机制。方法将猪分为 2组 ,10只猪切取左肺作供体 ,4℃改良的E C液灌洗和保存 ,4h后进行左肺移植。对照组常规操作 ,实验组采用控制性再灌注 :灌注液 (去白细胞血 :改良Buckberg液 =4∶1) ;灌注压 2 0mmHg ;灌注时间 10min。 0 .5、1和 2h后测血氧分压、肺血管阻力、肺顺应性、一氧化氮 (NO)含量、丙二醛 (MDA)含量、肺干 /湿重比。结果　实验组的左肺氧合功能 ,肺顺应性明显好于对照组 ,肺循环阻力、MDA值及肺含水量均低于对照组 (P <0 .0 1) ;实验组肺中NO含量较对照组明显升高 (P <0 .0 1)。结论　控制性再灌注能明显降低肺I/R损伤 ,起到了较好的移植肺保护效果。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠小肠缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞( BMSC)移植对其小肠缺血再灌注损伤的影响.方法 获取健康Wistar大鼠骨髓,体外提取、培养BMSC,收获传代培养的第3代细胞并鉴定其表型.在健康Wistar大鼠肠黏膜下注射皮肤黑色素瘤细胞,并用底物荧光素法示踪细胞.另外制作Wistar大鼠肠道缺血再灌注模型,将模型大鼠分为2组:实验组大鼠在肠黏膜下注射BMSC悬液1 ml(含5×106个细胞);对照组大鼠在肠黏膜下注射等量生理盐水.分别于术后0、2、6、24、72和120h处死大鼠,留取血清和小肠组织样本.采用酶联免疫吸附试验检测血清二胺氧化酶( DAO)、D-乳酸和肿瘤坏死因子α(TNF-α),用光镜和透射电镜观察肠组织,蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测紧密连接蛋白-1(ZO-1).结果 体外成功分离培养出BMSC.经肠黏膜移植后的皮肤黑色素瘤细胞定植在肠道.实验组大鼠小肠病理改变较对照组轻,小肠黏膜屏障更完好.术后6h实验组DAO为(11.36±1.89) IU/ml,对照组为(14.27±2.09) IU/ml(P＜0.05);24 h时实验组DAO为(5.04±1.04)IU/ml,对照组为(7.35±1.46) IU/ml(P＜0.05).术后6 h实验组D-乳酸为(1.57±0.25) mmol/L,对照组为(1.93±0.19)mmol/L(P＜0.05);术后24 h实验组D-乳酸为(1.09±0.13)mmol/L,对照组为(1.41±0.07) mmol/L(P＜0.01).术后6h实验组TNF-α为(266.09±8.84)ng/L,对照组为(286.81±11.54) ng/L (P＜0.01);术后24 h实验组TNF-α为(190.39±4.24) ng/L,对照组为(218.49±15.51 )ng/L(P＜0.01).实验组ZO-1的表达高于对照组.结论 肠黏膜下移植BMSC可以减轻小肠缺血再灌注损伤.     

N-乙酰-L-半胱氨酸对供者肺的保护作用

目的观察在离体肺再灌注期间应用核转录因子κB(NF-κB)抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对大鼠供者肺的保护作用. 方法 24只SD大鼠按完全随机方法分成实验组和对照组.12只大鼠供者肺用低钾右旋糖酐(LPD)液灌洗后于4℃保存16小时,建立离体肺再灌注模型,实验组在灌注期间应用NAC;对照组应用生理盐水,循环灌注1小时.再灌注期间每隔15分钟测定供者肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)、气道峰压(PawP),再灌注后测定肺组织湿干比(W/D),髓过氧化物酶(MPO)活性,分别用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定肺组织NF-κB、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的蛋白和信使核糖核酸(mRNA)的表达. 结果再灌注60分钟后实验组PaO2降低和PawP升高程度明显低于对照组(P<0.01或P<0.05);再灌注后,与对照组比较实验组W/D、MPO明显降低(P<0.01);NF-κB、ICAM-1的蛋白和mRNA表达明显减少(P<0.01或P<0.05). 结论再灌注期间应用NAC 能有效地抑制NF-κB和ICAM-1的表达,明显改善肺的呼吸功能.     

外源性腺苷三磷酸对移植胰腺再灌注损伤保护作用的实验研究

目的　探讨外源性三磷酸腺苷 (ATP)对大鼠移植胰腺再灌注损伤的作用及其机制。方法　应用同系大鼠异位全胰十二指肠移植模型 ,供体胰腺分别用EuroCollin液 (EC)或EC液添加ATP约 12～ 2 0ml(2～ 4℃ )进行低温灌注保存 6 0min ,光镜观察胰腺组织结构变化 ,放射自显影鉴定外源性ATP是否进入胰腺细胞内 ,高压液相色谱法 (HPLC)检测保存后移植物ATP和总腺苷核苷酸(TAN)。移植 2 4h后 ,检测血糖、血清中脂肪酶、淀粉酶 ,测定移植胰腺组织中髓过氧化酶 (MPO)活性 ,并进行组织学观察。结果　实验组保存的胰腺组织结构损伤明显轻于对照组。保存后实验组胰腺组织ATP和TAN水平 [(5 6 6± 0 37) μmol/ g ,(8 6 2± 0 88) μmol/g]明显高于对照组 [(2 82±0 2 4 ) μmol/ g ,(4 34± 0 4 1) μmol/ g],差异具有显著性 (P <0 0 5 )。放射自显影显示外源性 [α 3 2 P]ATP进入胰腺细胞内。移植胰腺早期功能指标检测 ,实验组血糖值 [(9 3± 2 2 )mmol/L]明显低于对照组 [(14 1± 2 9)mmol/L],实验组血清脂肪酶 [(139± 13)U/L]明显低于对照组 [(2 96± 2 5 )U/L],实验组胰腺组织MPO[(1 19± 0 16 )U/ g ]明显低于对照组 [(2 2 5± 0 2 8)U/ g],差异均具有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　外源性ATP用于胰腺     

前列腺素A1对兔供肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨前列腺素A1在兔肺移植中对供肺缺血再灌注肺保护作用及其作用机制。方法将16对健康家兔随机分为两组,对照组肺以改良低钾右旋糖酐(LPD)肺保护液灌注及保存,实验组则将前列腺素A1(80 ng/L)加入改良LPD液灌注及保存,在4℃保存4 h后再灌注1 h,测定移植肺组织的干湿比(W/D);测定肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性、核转录因子-κB(NF-κB)的表达以及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;并观察肺组织病理结构的变化。结果再灌注后,实验组的W/D和MPO也明显低于对照组(P<0.01),其肺组织中NF-κB和ICAM-1的表达也明显低于对照组(P<0.01),肺组织病理变化较对照组轻。结论前列腺素A1能减轻肺的缺血再灌注损伤,有效改善肺功能,对供肺具有明显的保护作用。     

体外持续灌注氧合血对离体猪肺的保护作用

目的 观察氧合血体外持续灌注对离体猪肺的保护作用.方法 将低钾右旋糖酐葡萄糖液(Perfadex液)单次经肺动、静脉灌注后的猪肺分为低温保存组(对照组)与氧合血体外持续灌注组(实验组),保存12 h后,将两组猪肺与体外灌注系统和呼吸机连接,模拟体内正常肺工作6h,检测肺血管阻力(PVR)、肺通气阻力(LR)、左下肺静脉血氧分压(PaO2)及肺含水量等肺功能指标,并观察肺组织损伤,检测肺组织中前炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)的表达量.结果 两组肺PVR、LR及肺含水量随肺工作时间的延长均逐渐上升,PaO2逐渐下降;但相同时间点,实验组PVR及LR显著低于对照组(P＜0.05),PaO2高于对照组(P＜0.05).与正常肺组织比较,实验组和对照肺组织水肿分级的差异均有统计学意义(P＜0.01),实验组肺水肿分级显著低于对照组(P＜0.05);实验组和对照组肺组织中IL-1βmRNA的相对表达量分别为0.422±0.132和0.578±0.163,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 单纯采用氧合血体外持续灌注是可行的供肺保存技术,可减轻低温保存所致供肺的时间依赖性缺血再注损伤,但仍需在完全生理状态下进行更系统的评价.     

L－精氨酸在离体肺保存中的作用

目的：研究一氧化氮前体L－精氨酸（L-Arg)在离体兔肺保存中的保护作用。方法：将14只新西兰兔随机分为2组,对照组以改良的Euro-Collins(ECS)液灌注及保存供肺,实验组以L－精氨酸（3mmol/L)加入改良的ECS液中灌注及保存供肺。冷保存6h。以自体血再灌注1h后,做肺静脉血气分析（PvO2),并测定血及肺组织中一氧化 氮（NO）,超氧化物歧化酶（SOD）,脂质过氧化物（LPO）含量及肺组织的超微结构以评价肺保护的效果。结果：再灌注后,实验组比对照组血氧分压显著提高（P＜0．05）。实验组血及肺组织中NO及SOD含量较对照组高（P＜0．05）,LPO含量较对照组低（P＜0．05）,透射电镜检查实验组损伤轻于对照组,结论：肺保存不超过6h时,在改良的ECS液中加入L-Arg用于离体肺的灌注和保存,能减轻肺损伤。     

曲格列酮保存液对大隐静脉黏附分子和一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)配体-曲格列酮是否能够减轻所保存的大隐静脉血管内皮细胞损伤.方法 9例CABG的大隐静脉移植血管自身配对分为对照组(自体肝素化血液保存组)和实验组(含20 μmol/L曲格列酮自体肝素化血液保存组)室温下保存1 h,采用免疫组织化学和Western免疫印迹法检测黏附分子和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,以及酶化学法测定血管组织中髓过氧化物酶(MPO)活性.结果 在实验组黏附分子ICAM-1、VCAM-1表达分别为(753±132、3731±294)明显低于对照组(7201±934、8292±793,P＜0.01);而实验组eNOS表达(7983±834)明显高于对照组(3989±1008,P＜0.01),血管组织MPO活性明显低于对照组[(1.52±0.42)、(5.04±1.26)U/g,P＜0.01].结论 PPARγ配体-曲格列酮保存液能够减轻大隐静脉内皮细胞激活和减少白细胞黏附,对静脉移植血管具有一定保护作用.     

静脉应用抑肽酶对大鼠肺移植模型缺血再灌注损伤的作用

目的 探讨静脉应用抑肽酶对肺移植后肺缺血再灌注损伤的作用和机制.方法 利用移植肺冷缺血14 h建立的大鼠肺移植缺血再灌注损伤模型,考察抑肽酶对缺血再灌注损伤的影响,并检测细胞因子等指标探讨机制.结果 抑肽酶组较对照组移植肺氧合好、湿干比小,同时支气管肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-2[(113±32)μg/L和(162±43)μg/L,P＜0.05]、血清中IL-8[(7.26±1.01)ng/L和(9.43±0.97)ng/L,P＜0.05]和肿瘤坏死因子(TNF)-α[(152.3±36.4)ng/L和(211.6±52.7)ng/L,P＜0.05]、肺组织中髓过氧化物酶活性[(2.36±0.62)U/g和(3.98±0.36)U/g,P＜0.05]都显著降低.结论 静脉应用抑肽酶能够减轻缺血再灌注损伤,机制可能包括:减少IL-2的释放、抑制TNF-α活化和IL-8产生,抑制中性粒细胞的聚集、激活和脱颗粒.