缓激肽β2受体拮抗剂在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 探讨缓激肽β2受体拮抗剂（HOE-140）对大鼠移植肺功能的影响以及作用.方法 将纯系SD大鼠随机分为3组,即实验组1、实验组2、对照组.对照组的供肺用低钾右旋糖苷液（LPD液）灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,于移植后1d测定对照组的气道峰压（PAP）、静脉血氧分压（PO2）、移植肺湿干重比（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性.实验组1以及实验组2（加HOE-140干预）的供肺用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂（AB192）的LPD液灌洗,并保存18h,然后行左肺移植,分别于移植后1d测定受者的各项肺功能指标,并取相同受体肺部组织做病理学检查. 结果 与对照组比较,各实验组的PAP值降低（P＜0.05）,PO2值升高（P＜0.05）,W/D值降低（P＜0.05）,MPO活性降低（P＜0.05）,差异有统计学意义,病理学结果显示实验组2（HOE-140组）均优于对照组及实验组1.结论 缓激肽β2 受体拮抗剂HOE-140能有效降低肺移植肺缺血再灌注损伤,从而改善移植肺功能.     

抑制CD26/二肽酰肽酶Ⅳ的活性减轻移植肺缺血再灌注损伤

目的 探讨抑制CD26/二肽酰肽酶Ⅳ(DPP Ⅳ)的活性对移植肺缺血再灌注损伤的影响.方法 实验分两组进行,采用简化套管技术进行Lewis大鼠左肺原位移植,实验组的供肺以含特异性不可逆的DPP Ⅳ抑制剂AB192(终浓度为25 μmol/L)的4 ℃低钾右旋糖苷液灌洗及保存,对照组的供肺以4 ℃低钾右旋糖苷液灌洗及保存.供肺保存18 h后进行移植.分别于气管插管后、进入左胸腔、再灌注前以及再灌注后1、5、10、15 min记录受者气道的峰值压力(PawP),其后每15 min记录1次.再灌注2 h末,抽取移植肺静脉血,测定血氧分压(PO2),切取移植肺,测定移植肺组织湿重/干重比值和硫代巴比妥酸反应物(TBARS)的含量.结果 再灌注2 h后,实验组的PO2为(298.4±87.6)mm Hg,明显高于对照组的(120.9±48.0)mm Hg(P＜0.01);实验组移植肺组织湿重/干重比值为6.5±0.8,明显低于对照组的8.6±0.6(P＜0.01);实验组移植肺组织中TBARS的含量为(9.3±2.0)μmol/g,明显低于对照组的(13.8±1.8)μmol/g(P＜0.01).整个再灌注期间(2 h共14个时点),两组间PawP的差异有统计学意义(P＜0.01);再灌注2 h末,实验组的PawP为(11.8±0.9)mm Hg,显著低于对照组的(16.0±1.4)mm Hg(P＜0.01).结论 通过抑制肺组织内CD26/DPP Ⅳ的活性,可以明显减轻移植肺的缺血再灌注损伤.     

抑制核因子-κB表达对大鼠供肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂氟美松对大鼠供肺缺血-再灌注损伤的保护作用。方法24只大鼠随机分为两组,实验组采用含氟美松的低钾右旋糖酐(LPD)液灌洗和保存供肺,对照组以LPD液灌洗和保存供肺,16h后建立离体肺再灌注模型,循环灌注1h。再灌注期间,每隔15min测定供肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)和气道峰压(PawP);再灌注结束后测定肺组织湿重与干重比(W/D)以及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性、细胞间粘附分子(ICAM-1)和NF-κB的表达。结果再灌注15min后,两个组的PaO2逐渐降低、PawP逐渐升高,但实验组PaO2的降低程度和PawP的升高程度明显低于对照组(P<0.01);再灌注后,实验组的W/D和MPO明显低于对照组(P<0.01),其肺组织中ICAM-1、ICAM-1mRNA、NF-κB及NF-κBmRNA的表达量也明显低于对照组(P<0.01)。结论应用氟美松抑制NF-κB的表达对大鼠供肺缺血-再灌注损伤具有保护作用。     

CD26/二肽酰肽酶Ⅳ底物缓激肽在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的表达

目的 研究CD26/二肽酰肽酶(DDP)Ⅳ底物缓激肽在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的表达.方法 采用改进的三套管左侧大鼠原位肺移植方法构建模型,供、受者均为雄性SD大鼠.受鼠分为两组,每组18只.对照组受鼠接受用低钾右旋糖苷液灌洗并保存18 h的供肺;实验组受鼠接受用含特异性不可逆DPPⅣ酶抑制剂(AB192,终浓度25 μmol/L)的低钾右旋糖苷液灌洗并保存18 h的供肺.肺移植术后1 d,获取移植肺,部分样本行蛋白质组学分析(二维凝胶电泳),并行质谱分析,鉴定与移植后缺血再灌注损伤相关的蛋白质;另外分别用免疫组化法和蛋白质印迹法检测缓激肽β2受体的表达.结果 样本鉴定分析出差异蛋白质14个,其中对照组缓激肽前体(激肽原1)的表达高于实验组(P<0.05).蛋白质印迹证实,实验组缓激肽β2受体的表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化结果也证实,缓激肽β2受体在组织上呈分泌型表达,通常以呼吸道上皮细胞以及肺泡巨噬细胞周边染色较明显.对照组显色明显较深,缓激肽β2受体表达高于实验组.结论 CD26/DDPⅣ酶活性抑制剂减轻大鼠肺移植术后早期缺血再灌注损伤的机制可能与其抑制激肽类物质的表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the expression of bradykinin as a substrate of CD26/DPP Ⅳ in rats with ischemia/reperfusion injury following lung transplantation (LTx). Methods Thirty-six syngeneic male SD rats were randomly allocated into control group and experimental group (n= 18each), and 36 rats served as donors. In control group and experimental group, the lungs were flushperfused and preserved with LPD and LPD+ CD26/DPP TV catalytic inhibitor (AB192) respectively,and LTx was performed 18 h after cold ischemia Histopathological studies were also done on the same locus of lung specimens and staining for bradykinin. The different proteins were separated by means of immobilized PH gradient-based two-dimensional gel electrophoresis. The differential expression of bradykinin was compared by Western blotting. Results The expression of bradykinin in control group was significantly higher than in experimental group. As compared with experimental group,bradykinin expression was significantly up-regulated in control group (P <0 . 05 ). Conclusion Inhibitor of CD26/DDP Ⅳ enzymatic activity significantly ameliorated ischemia/reperfusion injury in the early stage after LTx, which is probably associated with inhibition of the protein expression of bradykinin.     

前列腺素A1对兔供肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨前列腺素A1在兔肺移植中对供肺缺血再灌注肺保护作用及其作用机制。方法将16对健康家兔随机分为两组,对照组肺以改良低钾右旋糖酐(LPD)肺保护液灌注及保存,实验组则将前列腺素A1(80 ng/L)加入改良LPD液灌注及保存,在4℃保存4 h后再灌注1 h,测定移植肺组织的干湿比(W/D);测定肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性、核转录因子-κB(NF-κB)的表达以及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;并观察肺组织病理结构的变化。结果再灌注后,实验组的W/D和MPO也明显低于对照组(P<0.01),其肺组织中NF-κB和ICAM-1的表达也明显低于对照组(P<0.01),肺组织病理变化较对照组轻。结论前列腺素A1能减轻肺的缺血再灌注损伤,有效改善肺功能,对供肺具有明显的保护作用。     

N-乙酰-L-半胱氨酸对供者肺的保护作用

目的观察在离体肺再灌注期间应用核转录因子κB(NF-κB)抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对大鼠供者肺的保护作用. 方法 24只SD大鼠按完全随机方法分成实验组和对照组.12只大鼠供者肺用低钾右旋糖酐(LPD)液灌洗后于4℃保存16小时,建立离体肺再灌注模型,实验组在灌注期间应用NAC;对照组应用生理盐水,循环灌注1小时.再灌注期间每隔15分钟测定供者肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)、气道峰压(PawP),再灌注后测定肺组织湿干比(W/D),髓过氧化物酶(MPO)活性,分别用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定肺组织NF-κB、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的蛋白和信使核糖核酸(mRNA)的表达. 结果再灌注60分钟后实验组PaO2降低和PawP升高程度明显低于对照组(P<0.01或P<0.05);再灌注后,与对照组比较实验组W/D、MPO明显降低(P<0.01);NF-κB、ICAM-1的蛋白和mRNA表达明显减少(P<0.01或P<0.05). 结论再灌注期间应用NAC 能有效地抑制NF-κB和ICAM-1的表达,明显改善肺的呼吸功能.     

温度对犬肺灌注保存效果的影响

目的评价不同温度灌注和保存犬肺对肺保存效果的影响。方法将24只犬随机分为实验组和对照组两组,每组供、受体各6只。实验组以23℃低钾右旋糖酐(LPD)液灌注后切取右肺保存于10℃LPD液,对照组以4℃LPD液灌注后切取右肺保存于4℃LPD液,其后两组均行左肺移植术。比较两组供体肺组织不同时间段的髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量及湿/干重量比(W/D),比较两组受体犬移植前后不同时间肺血流动力学参数以及血气分析指标,并比较病理结果。结果与对照组相比,实验组肺组织灌注后各时间段的MPO活性、丙二醛含量及W/D较低(P0.05)。实验组受体犬移植后的肺毛细血管楔压(PCWP)、平均肺动脉压(MPAP)较低,动脉血氧分压(PaO2)较高,差异均有统计学意义(均为P(0.05)。病理学结果显示,实验组肺组织中性粒细胞浸润、肺泡水肿及损伤等病理变化较对照组减轻。结论在本实验条件下,与4℃灌注+4℃保存相比,23℃灌注+10℃保存的温度对犬肺具有较好的保存效果,更适用于实验肺移植。     

硝酸甘油对移植犬肺的保护作用

目的评价硝酸甘油对犬肺的保护作用。方法将24只犬随机分为实验组和对照组两组,每组供、受体各6只。实验组用含硝酸甘油的低钾右旋糖酐(low potassium dextran,LPD)灌注液灌注供肺,对照组仅用LPD灌注液灌注供肺,留取供犬右肺继续于灌注液中保存至4h,修剪左肺作移植肺,两组受体犬均行左肺移植术。比较两组供体肺组织不同时间的髓过氧化酶(myeloperoxi-dase,MPO)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和湿/干重量比(W/D),比较两组受体犬移植前后不同时间肺血流动力学参数以及血气分析指标,并比较病理结果。结果与对照组相比,实验组肺组织灌注后各时间段的MPO活性、丙二醛含量均较低(均为P(0.05),两组W/D差异无统计学意义。实验组受体犬移植后的平均肺动脉压(mean pulmonary arterial pressure,MPAP)低于对照组而动脉血氧分压(PaO2)高于对照组(均为P(0.05)。移植后供肺肺组织的病理学结果显示,实验组肺组织水肿、炎性细胞浸润、损伤等病理变化较对照组减轻。结论在本实验条件下,在灌注液中加入硝酸甘油可以在犬肺移植过程中起到保护肺组织的作用。     

N-乙酰-L-半胱氨酸对供体肺的保护作用

目的　观察核转录因子 (NF κB)抑制剂N 乙酰 L 半胱氨酸 (NAC)对大鼠供体肺在保存期间的保护作用。方法　 2 4只大鼠 ,随机分为离体肺用低钾右旋糖酐 (LPD ,对照组 )液和含NAC的LPD液(实验组 )灌洗后于 4℃保存 16h两组。建立离体肺再灌注模型 ,循环灌注 1h。再灌注期间每隔 15min进行供体肺氧合后动脉血氧分压 (PaO2 )、气道峰压 (PAwP)测定 ;再灌注后进行肺组织湿干比 (W/T) ,髓过氧化物酶 (MPO)活性测定 ;分别用免疫组化和RT PCR方法测定肺组织NF κB、黏附分子 (ICAM 1)蛋白和mRNA的表达。结果　再灌注 6 0min后实验组Pa0 .2 降低和PAwP升高程度明显低于对照组 (P <0. 0 1或 <0 . 0 5 ) ;再灌注后 ,实验组比对照组W /T、MPO明显降低 (P <0 . 0 1) ;NF κB、黏附分子 (ICAM 1)蛋白和mRNA表达明显减少 (P <0 . 0 1或 <0 . 0 5 )。结论　应用NAC进行供体肺保存能有效地抑制NF κB和ICAM 1的表达 ,明显改善肺的呼吸功能。     

热休克蛋白70在大鼠肝移植急性排斥反应中的表达及意义

目的 探讨热休克蛋白70(HSP70)在大鼠肝移植术后的表达规律及对急性排斥反应的早期诊断意义.方法 采用改良"二袖套法"建立大鼠原位肝移植模型.随机将大鼠分为3组,每组供、受者各15只.对照组:供、受者均采用Wistar大鼠;未治疗组:供者为SD大鼠,受者为Wistar大鼠,肝移植后不用任何免疫抑制剂;治疗组:供者为SD大鼠,受者为Wistar大鼠,肝移植术后肌肉注射他克莫司(FK506)2 mg·kg-1·d-1.每组分别于术后第3、5、7天随机各处死5只受者,取移植肝脏观察组织病理学变化,免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测移植肝HSP70的表达,并分析其与急性排斥反应的相互关系.结果 对照组术后无排斥反应发生;未治疗组术后第3天出现典型的排斥反应病理变化,随术后时间推移,排斥反应活动度积分(RAI)逐渐升高(P<0.05);治疗组表现为无排斥反应或交界性排斥反应.对照组移植肝HSP70的表达在术后出现短暂升高后迅速降低(P<0.05),未治疗组移植肝HSP70的表达水平较对照组高,并随术后时间的推移而逐渐升高(P<0.01),与移植肝RAI之间存在着明显的正相关(P<0.01);治疗组移植肝组织HSP70在术后各时间段均呈低表达.结论 移植肝组织中HSP70的表达与急性排斥反应的发生和发展密切相关;HSP70表达升高对早期诊断急性排斥反应有一定的意义.     

乌司他丁减轻无心跳大鼠供肺缺血再灌注损伤的作用及机制

目的 研究乌司他丁(UTI)减轻无心跳大鼠供肺缺血再灌注损伤作用及作用机制.方法 选取雄性SD大鼠作为供、受鼠建立无心跳大鼠左肺移植模型,将受鼠分为对照组和实验组,对照组受鼠接受的供肺经低钾右旋糖酐(LPD)液灌注和保存,实验组受鼠接受的供肺经含乌司他丁(50万U/L)的LPD液灌注和保存.移植过程中监测受鼠的动脉血氧合情况;移植肺再灌注30 min和1h时,取两组受鼠移植肺组织,测量和计算湿干质量比,检测移植肺组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;提取RNA,采用实时定量聚合酶链反应检测移植肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-a)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和白细胞介素10(IL-10) mRNA的相对表达量.结果 再灌注后1h,实验组的氧合指数(PaO2/FiO2)为472.38±31.66,显著高于对照组的429.52±14.83,两组比较,差异有统计学意义(P=0.025).与对照组相比,实验组在再灌注30 min和1h时的水肿情况(湿干质量比)均好于对照组(P=0.005,P=0.006),实验组移植肺组织病理损伤也明显轻于对照组.不论再灌注30 min还是1h,实验组移植肺组织中MDA含量较对照组显著降低(P=0.039,P=0.006),而SOD含量显著升高(P=0.035,P=0.030).再灌注30 min时,实验组TNF-a的表达较对照组显著下降(P=0.000),再灌注1h时下降不明显(P=0.139);再灌注30 min时,ICAM-1水平较对照组下降不明显(P=0.062),再灌注1h则存在明显降低(P=0.001);再灌注30 min和1h时,实验组IL-10 mRNA的表达水平均较对照组显著上调(P=0.004,P=0.000).结论 乌司他丁能够减轻无心跳大鼠供肺的缺血再灌注损伤,对移植肺有保护作用.     

外源性一氧化碳改善供体肺功能的实验研究

目的观察一氧化碳(CO)对长时间低温保存的供体肺的保护作用。方法建立大鼠肺移植离体肺灌注实验模型:SD大鼠24只随机分为空白对照组、实验组(CO组),每组6对作为肺移植的供体鼠和受体鼠。对照组大鼠供肺移植全程吸入100%氧气直至再灌注后1h;CO组移植全程吸入500×10-6CO和O2的混合气,并且供体肺在冷保存的12h内肺内仍充盈着CO和O2的混合气,余同对照组。于供体肺循环灌注l,20,40,60min测定供肺氧合后动脉血氧分压(PaO2)、平均肺动脉压、气道峰压;灌注结束后测定肺组织湿干比、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性、白细胞介素8(IL-8)的含量。结果作为受体的12只(每组6只)进入结果分析:①CO组供体肺的PaO2在再灌注20、40、60min明显高于对照组,平均动脉压、气道峰压分别在再灌注20、40、60min和40、60min明显低于对照组(P<0.05);②与空白对照组比较,CO组供体肺再灌注后湿干比、MDA、MPO、IL-8含量均明显降低(P<0.05)。结论在肺移植的全程吸入低剂量CO可以减轻供肺的缺血再灌注损伤,改善供肺功能。     

Celsior液与UW液对无心跳大鼠供肝保存效果的比较

目的 比较Celsior(CS)液与UW液对大鼠无心跳供者(NHBD)供肝的保存效果.方法 选取健康雄性SD大鼠作为肝移植的供、受者.通过阻断大鼠主动脉和膈上下腔静脉10 min的方法,制备和获取NHBD供肝,并采用不同的器官保存液灌注和冷保存供肝.随机将受者分为4组.CS8 h组:受者采用经CS液灌注和冷保存8 h的供肝移植;UW8 h组:受者采用经UW液灌注和冷保存8 h的供肝移植;CS16 h组:受者采用经CS液灌注和冷保存16 h的供肝移植;UW16 h组:受者采用经UW液灌注和冷保存16 h的供肝移植.受者门静脉开放前、开放后1、3及6 h,取各组受者的静脉血检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、内皮素1(ET-1)、白细胞介素1(IL-1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;观察和比较各组受者的胆汁生成量、移植肝组织病理学改变及术后7 d内的存活率.结果 NHBD供肝经UW液灌注后呈"花斑"状,肝叶边缘灌注不良,经CS液灌注后肝叶边缘灌注良好.CS8 h组和UW8 h组受者的胆汁生成量分别为(0.21±0.01)ml和(0.10±0.02)ml(P<0.05).门静脉开放后1、3及6 h,CS8 h组受者的血清ALT及AST水平明显低于UW8 h组(P<0.05),门静脉开放后1、3h,CS8 h组受者的血清ET-1、IL-1及TNF-α水平均明显低于UW8 h组(P<0.05);CS8 h组受者移植肝肝窦扩张、门静脉充血及炎症细胞浸润等病理学改变明显轻于UW8 h组,CS8 h组和UW8 h组受者术后7 d的存活率分别为58.3%和25.0%(P<0.05).CS16 h组和UW16 h组受者各时点的胆汁分泌量、血清ALT、AST、ET-1、IL-1及TNF-α水平的比较,差异均无统计学意义(P>0.05),两组受者均在术后3 d内死亡,两组受者移植肝组织病理学改变无明显差异.结论 CS液对大鼠NHBD供肝的保存效果优于UW液,这可能与UW液较CS液粘稠及CS液能够减少枯否细胞的激活有关;NHBD供肝的冷保存时间不宜超过16 h.     

大鼠供肾转染Fas配体基因延长移植肾存活时间

目的观察大鼠供肾转染Fas配体(FasL)基因是否能延长肾移植后受者和移植肾的存活时间,研究其对移植肾的保护作用。方法供者为SD大鼠,受者为Wistar大鼠,随机配对分为实验组和对照组。实验组供肾移植前用1ml含重组腺病毒AdV-FasL的HC-A肾脏冷保存液(0~4℃)经肾动脉灌注;对照组用1mlHC-A肾脏冷保存液(0~4℃)灌注。建立同种肾移植模型。应用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)及免疫组织化学方法检测外源FasL基因的表达;透射电镜观察移植肾超微结构的变化;并对肾移植后大鼠的存活率及血肌酐水平进行观察。结果实验组移植肾转基因后FasLmRNA及蛋白均呈阳性表达,FasL蛋白的表达主要分布于小动脉、肾小球及近曲小管。实验组移植肾免疫排斥反应及超微结构变化均较对照组减轻。实验组及对照组肾移植后大鼠的存活时间中位数分别为32.2d和12.1d;术后第7d,实验组血肌酐水平为(315.2±19.2)μmol/L,对照组为(416.2±48.6)μmol/L;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腺病毒载体可成功介导FasL基因对大鼠肾脏的转移,并对移植肾起免疫保护作用、延长移植肾的存活时间。     

棉子糖低钾右旋糖酐液在临床肺移植中的应用

目的 探讨棉子糖低钾右旋糖酐(RLPD)液保存供肺的效果.方法 自2002年9月至2011年12月共完成肺移植131例,其中单肺移植81例,双肺移植50例.供者129例,其中2例供者的左、右肺分别移植给4例受者.供肺获取时先用RLPD液顺行灌注4L,再逆行灌注1L,随后将供肺保存于3L低温RLPD液中.根据供肺冷缺血时间长短及供肺质量决定是否行二次灌注.手术期间严密监测受者动脉血液气体、平均肺动脉压(mPAP)、呼吸力学指标的变化,术后定期复查心脏超声、肺功能、血液气体和胸部影像学等检查.结果 肺移植手术均顺利完成,供肺冷缺血时间为(193±21) min(65～630) min.术后早期肺水肿与供肺冷缺血时间、原发性移植物无功能(PGD)的发生有关(P＜0.05,P＜0.01).供肺开放双肺通气及术后2h所有受者动脉血液气体、氧合指数均明显改善,mPAP、气道阻力和双肺通气气道内吸气峰压明显下降.术后早期(1个月内)死亡率为18.3％(24/131),死亡原因包括严重感染11例,原发性移植物无功能7例,心功能衰竭3例,支气管吻合口漏1例,急性排斥反应1例,肺梗死1例.肺移植术后3个月,用力肺活量、第1秒用力呼气容积,每分钟最大通气量、一氧化碳弥散量较术前明显改善.结论 RLPD液能有效减轻肺缺血再灌注损伤、改善肺功能,提高供肺保存效果.     

改良的大鼠左肺原位移植模型

目的在建立大鼠左肺原位移植模型中采用一种新的缝合方法。方法左肺原位移植模型的供、受者均为SD大鼠。为了使肺静脉张开便于吻合,左肺移植期间持续进行供肺肺动脉低压灌注4℃的低钾右旋糖苷(LPD)液;采用连续外翻褥式缝合法吻合支气管膜部、肺静脉、肺动脉,快速进行左肺原位移植。术后采用环孢素A 霉酚酸酯 甲泼尼龙三联免疫抑制方案。术后4周,开胸阻断11例存活大鼠的右侧肺门,检测阻断前及阻断后的动脉血氧分压和动脉血二氧化碳分压。结果55例SD大鼠左肺移植成功,平均吻合时间为(36.2±9.6)min,手术成功率为91.7%。1周存活率为70.9%;2周存活率为50.9%;4周存活率为21.8%。术后发生肺动脉栓塞1例,于术后第3 d死亡,其余受者均未发现吻合口狭窄及栓塞。阻断右侧肺门前与阻断后15 min动脉血气比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论大鼠左肺原位移植模型中采用新的缝合方法,具有简单有效、实用可靠的优点。     

一氧化氮减轻大鼠移植肺缺血/再灌注损伤的作用及机制

目的探讨供、受者在肺移植前后吸入低浓度一氧化氮（NO）对移植肺缺血／再灌注损伤的影响及其机制。方法取6（）只雄性SD大鼠，随机配对建立左肺移植模型。实验分为2组，NO组：获取供肺前，供者在移植肺灌洗期吸人体积分数为0．001％的NO；肺移植后，受者在移植肺再灌注后10min-2h持续吸入相同浓度的NO。对照组：供、受者肺移植前后不做任何特殊处理，只进行肺移植。供者开胸时及受者再灌注2h后，分别夹闭右肺门5min，进行动脉血气分析检测。受者术前及再灌注后2h时分别检测肺功能和动脉血气分析。再灌注2h后，取移植肺组织测髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）含量、肺湿／干重比（W／D）以及诱生型一氧化氮合酶（iNOS）的活性及其mRNA表达，并观察移植肺的病理学形态。结果移植肺再灌注2h后，NO组动脉血氧分压／吸氧浓度（PaO2／FiO2）值较对照组升高，氧合指数（OI）值、肺内分流（Qs／Qt）值较对照组降低，两组相比，差异有统计学意义（P均〈0．05）。NO组与对照组相比，MPO活性明显降低，MDA含量明显增高，W／D无显著差异。NO组iNOS蛋白活性及其mRNA表达均较对照组显著降低，iNOS主要表达在肺泡上皮细胞、肺泡腔和间质内浸润的炎症细胞。NO组炎症细胞浸润明显较对照组轻。结论供、受者在肺移植前后吸入低浓度NO能改善移植肺的氧合、减轻缺血／再灌注损伤，其机制可能与NO减少肺内分流、下调iNOS表达以及减轻肺内炎症细胞浸润有关。     

肺表面活性物质对兔供肺作用的实验研究

目的　研究肺表面活性物质 (PS)对移植肺的保护作用。方法　将 4 8只健康青紫兰雄兔随机分为 3组 ,每组各 8对供、受者。除对照组外 ,其余两组分别在灌注前 (PS1组 )和保存前 (PS2组 )给予 10 0mg/kgPS。各组移植物低温保存6h后进行移植。采用兔异位心肺移植模型 ,在心肺转为自主功能状态后 ,连续观察 3h。每 30min测定移植肺的顺应性 ;采下肢动脉血进行血气分析 ;实验结束测定肺组织的湿 /干重比 (W /D)、肺组织中丙二醛 (MDA)和髓过氧化物酶 (MPO)的含量。结果　与对照组各相同时间点相比 ,PS1和PS2两组移植肺具有较好的气体交换功能和肺顺应性 (P <0 .0 1) ;其中PS2组各时间点的气体交换功能和肺顺应性高于PS1组 (P <0 .0 5 ) ;术后肺组织MDA、MPO含量和W/D ,PS2组最低 ,对照组最高 (P <0 .0 1)。结论　应用PS可改善移植肺术后功能 ,减轻移植肺的缺血再灌注损伤。保存前给予PS的效果更佳。     

骨化三醇和氨基胍联合应用减轻大鼠肾移植急性排斥反应

目的探讨骨化三醇和氨基胍(AG)联合应用对大鼠肾移植急性排斥反应的作用。方法选取清洁级近交系健康雄性Wistar大鼠和SD大鼠为供、受者。实验随机分为5组,每组10只。Ⅰ组为同基因对照组:Wistar大鼠肾脏移植给Wistar大鼠,术前和术后不做任何处理;其余各组均为异基因移植,Wistar大鼠肾脏移植给SD大鼠,Ⅱ组为排斥对照组:术前和术后不做任何处理;Ⅲ组为氨基胍治疗组:手术当日开始腹腔注射氨基胍200mg/kg,2次/d,至实验结束;Ⅳ组为骨化三醇治疗组:术前1d开始腹腔注射骨化三醇1μg·kg-1·d-1,至实验结束;Ⅴ组为联合治疗组:氨基胍和骨化三醇联合应用,给药方案同Ⅲ、Ⅳ组。观察各组受者生存期和移植后5d肾组织病理学变化,检测血清肌酐、尿素氮、钙、磷以及γ干扰素(IFNγ)含量。结果Ⅰ～Ⅴ组受者存活时间分别为(9.1±1.9)d、(5.3±0.8)d、(9.7±2.1)d、(8.6±1.6)d和(12.9±3.4)d。Ⅴ组较Ⅱ～Ⅳ组生存期延长,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ组受者存活期、移植肾排斥反应程度、肾功能及血清IFNγ表达水平较Ⅱ组明显改善或降低(P<0.01),Ⅴ组又较Ⅲ、Ⅳ效果更佳(P<0.05)。结论同种异体原位肾移植后联合应用用骨化三醇和氨基胍治疗可有效预防急性排斥反应,二者有明显的协同作用。     

肝硬化大鼠原位肝移植模型的制作及术后排斥反应的观察

目的 制备肝硬化大鼠的原位肝移植模型,观察术后排斥反应发生情况,为进行其它研究创建一个平台.方法 以皮下注射CCl4联合饮用苯巴比妥钠和乙醇溶液的方法制备大鼠肝硬化模型,应用改良的"二袖套"法建立大鼠原位肝移植模型,同系移植者的供、受者均为SD大鼠(SD实验组),以接受肝移植的正常SD大鼠为对照(SD对照组);同种移植者的供者为Lewis大鼠,受者为BN大鼠(BN实验组),以接受肝移植的正常BN大鼠为对照(BN对照组).术后观察受者的存活情况以及移植肝的组织学变化.结果 肝硬化大鼠门静脉压力为(182.0±10.7)mm H2O,显著高于正常大鼠的(70.8±5.5)mm H2O(P＜0.01),移植后7 d降至(82.7±10.7)mm H2O.同种移植组术后5～12 d,移植肝组织中均可见中、重度急性排斥反应病理改变.同系移植者存活时间中位数均＞100 d;同种移植者中,BN对照组和BN实验组受者肝移植后存活时间中位数均为10 d.结论 以Lewis大鼠为供者、肝硬化BN大鼠为受者制备的肝移植模型术后排斥反应的发生率较高,可作为肝移植后排斥反应相关研究的平台.