龙虾叶状幼体聚缩虫病防治的研究

对防治龙虾叶状幼体聚缩虫病采用多种药物、多种措施进行对比试验，表明投金藻、扁藻、光合细菌和丰年虫幼体，优化培育水体生态环境，改善叶状幼体营养，提高叶状幼体自洁力，加速叶状幼体发育变态，适当调高盐度以恶化聚缩虫诉生存环境，及时清除丰年虫卵壳等污物，能有效地防治龙虾叶状幼体聚缩虫病。     

对感染白斑综合症病毒的亲虾子代的跟踪检测

感染白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV) 的斑节对虾Penaeus monodon 亲虾能产出携带WSSV的卵子，这些卵子可完成胚胎发育过程，孵化出无节幼体，并可以培育出Sou状幼体，糠虾幼体和仔虾，在确认只有亲虾作为WSSV传染源的情况下，培育出的部分幼体和部分仔虾携带WSSV。在相同的条件下，不带WSSV的亲虾产出的卵及幼体，仔虾未检测到WSSV。     

盐度对龙虾叶状幼体发育和存活的影响

多个梯度多个重复的对比试验结果表明龙虾（Ｐａｎｕｌｉｒｕｓ）叶状幼体要求的海水的适宜盐度为３４‰～３５‰。投入金藻（Ｄｉｃｒａｔｅｒｉａｓｐ．）、扁藻（Ｐｌａｔｙｍｏｎａｓｓｐ．）和光合细菌于水体中，养活作为龙虾叶状幼体饵料的丰年虫（Ａｒｔｅｍｉａｓａｌｉｎａ）幼体，可减少换水量，保持养殖水体的盐度稳定。３４‰～３５‰盐度的养殖水体能有效地抑制某些病原体的入侵。     

盐度对龙虾叶状幼体发育和存活的影响

多个梯度多个重复的对比试验结果表明龙虾（Ｐａｎｕｌｉｒｕｓ）叶状幼体要求的海水的适宜盐度为３４‰－３５‰。投入金藻（Ｄｉｃｒａｔｅｒｉａｓｐ．）扁藻（Ｐｌａｔｙｍｏｎａｓ ｓｐ．）和光合细菌于水体中，养活作为龙虾叶状幼体饵料的丰年虫（Ａｒｔｅｍｉａ ｓａｌｉｎａ）幼体，可减少换水量，保持养殖水体的盐度稳定。３４‰－３５‰盐度的养殖水体能有效地抑制某些病原体的入侵。     

中国龙虾亲虾培育试验

在１００ Ｌ水缸中进行中国龙虾［ Ｐａｎｕｌｉｒｕｓｓｔｉｍ ｐｓｏｎｉ（Ｈｏｌｔｈｕｉｓ）］亲虾培育试验。亲虾按２ 雌１ 雄放养, 充气, 投喂虾类、贝类、鱼类等活鲜饵料。结果表明, 中国龙虾嗜好活饵,也食鲜饵, 不食粤海牌对虾料, 最爱吃虾类。致死水温为１１℃以下, １２℃～１３℃冻僵, １４℃～１５℃反应迟钝, １６℃～１７℃恢复摄食, １８℃～３０℃进行正常的生理活动, ３１℃以上易患病死亡。繁殖季节为２ 月～１０ 月。当水温升到１８℃以上, 雌雄拥抱交配, ２０℃以上开始产卵及抱卵, ２６℃以上孵化出叶状幼体。胚胎发育适宜温度为２３℃～３０℃。共培育出６ 尾雌虾产卵并孵化出叶状幼体。其中２ 尾雌虾１ 年繁殖３ 次, ３ 尾１ 年繁殖２ 次, １ 尾１ 年繁殖１ 次。病害是困扰亲虾培育的重要因素     

日本沼虾受精卵的离体培养及其胚胎发育的初步观察

本文报道了日本沼虾的受精卵离体培养实验，并初步描述了其胚胎发育的特征。结果表明：日本沼虾受精卵以及各期胚胎（即卵裂期、囊胚期、原肠期、无节幼体期、后无节幼体期、前蚤状幼体期的胚胎）分别离体培养，均可孵化出蚤状Ｉ期幼体；并且离体受精卵及各发育时期胚胎与亲虾所抱受精卵和相同时期胚胎发育同步。日本沼虾的卵裂方式属于完全卵裂和表面卵裂之间的过渡类型     

斑节对虾人工育苗的初步研究

1984--1985年，我们用越冬培育、切除单侧眼柄诱导成熟的12尾野生雌虾和5尾人工子一代，在水泥池(1．68×1．50×深0．5米)中，进行诱导产卵和幼体培育。本文介绍了人工育苗的基本方法，粗略地叙述了胚胎发育和幼体发育的过程。野生亲虾的交配受精率为58。3％，人工子一代为60％，幼体成活率最高分别为11．7％和18．9％，并对交配受精率和幼体成活率偏低的原因做了初步的分析。     

中国龙虾早期叶状幼体形态发生的观察

本实验通过投喂卤虫无节幼体和贻贝性腺对中国龙虾早期叶状幼体进行培育，早期叶状幼体是指初孵叶状幼体至叶状幼体的第5步足开始形成，共完成了6次蜕皮。第1次蜕皮的叶状幼体没有眼柄，第3颚足及第、、第2步足外肢分别具有3、5、5对羽状刚毛；第2次蜕皮后的叶状幼体开始出现眼柄及第4步足呈乳头状突起，第1、第2步足外肢具有6对羽状刚毛；第3次蜕皮后的叶状幼体第3步足外肢发育比较成熟并产生3对羽状刚毛，第3颚足及第1、第2步足外肢分别具有4、7、7对羽状刚毛；第4次蜕皮后的叶状幼体第1触角亚末端开始出现2根长刚毛，第1鄂足顶部刚毛消失，第3颚足及第1、第2、第3步足外肢分别具有4、8、8、4对羽状刚毛；第5次蜕皮后的叶状幼体第3噪声足及第1、第2、第3步足外肢分别具有5、9、9、5对羽状刚毛；第6次蜕皮的叶状幼体第5步足开始出现乳头状突起，并对叶状幼体1至6次蜕皮后的叶状幼体形态特征进行了详细的描述。     

光合细菌在对虾育苗生产中的应用

１９９５年４月２４日～５月８日，在登高岛盐场育苗场５０ｍ＾３，水体育苗池，进行了用几株光合细菌（ＲｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＳ．Ｐ．）混合菌液作为中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）苗期水质净化剂及辅助饵料，取得了明显效果，育苗池水透明度提高约２０ｃｍ，幼体挂脏率下降５０％，变态提早１ｄ左右，且多产仔虾百万尾。     

中国龙虾叶状幼体培育水质试验

为了探索龙虾叶状幼体培育的新路子,采用经沙-活性炭过滤海水与投扁藻(Platymonas subcordiformis)和金藻(Dicrateria sp.),漂白粉和孔雀石绿消毒海水与投扁藻和金藻,对虾全封闭养殖池水和底泥等多种培育水质,分别于水缸和玻璃缸进行中国龙虾(Panulirus stimpsoni)叶状幼体培育对比试验.投喂卤虫(Artemia salina)和文蛤(Meretrix meretrix)卵巢.5 d投1次25×108 cfu/m光合细菌.用窗帘控制光照度为1 000 lx～1 500 lx.发现采用对虾养殖池水与加铺1 cm厚对虾池底泥的培育水中有种类繁多,生物量丰富的浮游植物、浮游动物、底栖生物.利用光合细菌和调节光照保持浮游植物处于正常生长相,使水中微生物、浮游植物、浮游动物、底栖生物、叶状幼体处于生态平衡并相对稳定状态,取得较好的培育效果.     

海绵Pseudoceratina sp.共栖细菌多样性及其抑制甘蔗鞭黑粉菌活性研究

【目的】探讨广西斜阳岛附近海域海绵共附生细菌的多样性,并筛选对甘蔗鞭黑粉菌有抑制作用的活性物质,为发现潜在的细菌新物种及开发农用生防菌肥奠定基础。【方法】采用稀释涂布法,通过6种复合营养分离培养基,从海绵Pseudoceratina sp.中分离可培养的共附生细菌。采取细菌形态学观察去除冗余,通过PCR扩增菌株的16SrRNA基因序列,并通过构建系统发育树分析物种多样性。采用牛津杯法进行抑制甘蔗鞭黑粉菌活性筛选实验。【结果】从海绵Pseudoceratina sp.中共分离到可培养细菌54株,经16SrRNA基因序列对比后,获得24株细菌,隶属于13科14属。其中,菌株BGMRC 2118与已发表有效菌株的16SrRNA基因序列的最高相似率为96.46%,可能为潜在新种。抑菌筛选实验结果显示,有8株细菌的发酵粗提物对甘蔗鞭黑粉菌具有很强的抑菌活性。【结论】广西斜阳岛附近海域中海绵共附生细菌具有较高的物种多样性,蕴藏着丰富的新物种资源,富含生物活性菌株。     

卵形鲳鲹源创伤弧菌导致宿主细胞凋亡的作用机制

弧菌是自然界菌群中的一部分,作为一种有害菌不仅可以感染常见的水产品,有些弧菌更是对人体有一定的致病性。随着近些年水产养殖的不断扩大,由创伤弧菌(Vibrio vulnificus)引起的鱼病不胜枚举,不仅给养殖行业造成巨大的损失,同时对人类生命安全也存在着巨大威胁。本文对卵形鲳鲹源创伤弧菌感染宿主细胞的机制进行研究,目的是阐明创伤弧菌对宿主细胞的致死机理,为未来研发抗病菌功能产品提供理论依据。本文通过确定创伤弧菌胞外产物(Extracellular products,ECPs)的蛋白浓度,以不同的蛋白浓度为基准,利用光镜观察和细胞活力CCK检测技术测定创伤弧菌ECPs对细胞的毒性。然后使用Hoechst 33342染核观察及DNA ladder来进一步确定其致死机制。根据细胞毒性结果,卵形鲳鲹源创伤弧菌ECPs对宿主细胞有很强的细胞毒性。Hoechst 33342染核结果发现实验组出现了凋亡小体,这与STS处理的阳性对照组中细胞变化相一致。但是ECPs处理后的宿主细胞未出现明显的DNA ladder。卵形鲳鲹源创伤弧菌对宿主细胞具有明显的毒性,再通过理化性质的检测,可以初步确定创伤弧菌导致卵形鲳鲹细胞死亡是通过凋亡途径发生的。未来将针对凋亡途径的具体通路进行深入研究,为控制病菌的感染提供理论依据。     

A newly discovered Gigantopithecus fauna from Sanhe Cave, Chongzuo, Guangxi, South China

Among the most important faunas in the Late Cenozoic, the Gigantopithecus faunas have received a good deal of attention. The Gigantopithecus fauna recently discovered in Sanhe Cave consists of more than 80 mammal species, including cf. Hominidae, Pongo sp., Hylobates sp., Sinomastodon yangziensis, Stegodon preorientalis, Cervavitus fenqii, Dicoryphochoerus ultimus and Sus xiaozhu. It is the southernmost Gigantopithecus fauna found so far in China. Its geological age is estimated to be Early Pleistocene based on the fauna and stratigraphic correlation. The significant increase in the estimated body sizes of Ailuropoda, Gigantopithecus and Tapirus shows that the Sanhe fauna is middle Early Pleistocene, later than those from Wushan and Liucheng (early Early Pleistocene). Paleomagnetic dating of the fossil-bearing strata in Sanhe Cave gives an age of approximately 1.2 Ma. The fauna is characterized by tropical-subtropical forest types, including Pongo sp., Tupaia sp., Ia sp., Typhlomys intermedius, etc., and it lacks Palaearctic types. It is a typical tropical forest fauna, suggesting an environment with a lush forest and a warm and humid climate. The discovery of the Sanhe Gigantopithecus fauna is significant for establishing the chronological stages of the Gigantopithecus faunas in China, and for discussing their origin, evolution and dynamics. Supported by Key Knowledge Innovation Project of the Chinese Academy of Sciences (KZCX2-YW-106) and National Basic Research Program of China (Grant No. 2006CB806400)     

桐花煤污病的病原菌和病害发生特点初步观察

１９９６年至１９９７年在广西沿海调查红树林植物病害时采集到桐花的煤污病病叶标本,用火棉胶贴片法取桐花叶面上的煤污菌斑显微观察,发现附在桐花叶面上的煤污菌有４种：番荔枝煤炱菌（ＣａｐｎｏｄｉｕｍａｎｏｎａＰａｔ．,其无性阶段为狭籽小箭壳孢（ＭｉｃｒｏｘｙｐｈｉｕｍｌｅｐｔｏｓｐｅｒｍｉＦｉｓｃｈｅｒ．）、杜茎山星盾炱（ＡｓｔｅｒｉｎａｍａｅｓａｅＰａｔ．）、撒播烟霉（ＦｕｍａｇｏｖａｇａｎｓＰｅｒｓ．）、盾壳霉（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍｓｐ．）。调查发现煤污病只发生在生长于河口内缘的桐花,其他地方的桐花没找到病株;几种煤污菌常常一起着生在一叶斑上;桐花煤污病具有明显的发病中心。     

萘对铜绿微囊藻和聚球藻生长及叶绿素荧光影响的比较

为探究萘对不同粒径蓝藻的胁迫效应,采用5组不同质量浓度萘(0、0.01 mg/L、0.1 mg/L、1 mg/L、10 mg/L)分别对聚球藻(Synechococcus sp.)和铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa,PCC7806)进行为期7 d的处理,分析不同浓度萘处理下,藻细胞浓度、叶绿素a含量及叶绿素荧光参数的变化,探究不同浓度萘处理对2种藻的生长及生理影响。结果表明:(a)整个处理周期内,聚球藻的生长被显著抑制,其叶绿素a含量减小了3.9%~40.4%;(b)聚球藻的潜在光合作用能力、光合作用速率均有所减弱,但其耐受强光的能力有所增强,说明聚球藻对萘具有较强的敏感性;(c)萘对铜绿微囊藻生长具有显著的促进作用,增强了其潜在光合作用能力,但抑制了其细胞内叶绿素a的合成。     

促进种子萌发的重楼内生菌的筛选

通过比较60株重楼内生细菌发酵液的水相提取液和有机相提取液对冬小麦种子萌发的影响,发现8株细菌的有机相提取物具有促萌发作用.将其中4株细菌的发酵液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,蒸干物用甲醇溶解并稀释成不同浓度处理冬小麦种子.结果表明:肠杆菌属74#菌的石油醚相提取物、不动杆菌属108#菌的氯仿相提取物、芽孢杆菌属138#菌的氯仿相提取物和克雷白氏杆菌属149#菌的乙酸乙酯相提取物的促萌作用较强(p0.05);其中芽孢杆菌属138#菌的氯仿相提取物的1/2稀释液的促萌作用最强(p0.01).     

黄连水提物对卵形鲳鲹源溶藻弧菌的抑菌作用

卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是一种生长快速且肉质鲜美的经济型海水养殖鱼类,但是近些年为满足人们的日常需求,在不断扩大养殖的同时病菌也逐渐泛滥。溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是华南沿海地区海水养殖鱼类细菌性鱼病的主要致病菌之一,给水产养殖业带来巨大损失。本研究对黄连(Coptis chinensis Franch)的抗菌作用进行系统研究,目的是为由溶藻弧菌引起的爆发性细菌性鱼病的高效防治提供科学的用药依据。本研究采用二倍稀释法测定黄连水提物对卵形鲳鲹源溶藻弧菌的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)和半数致死量(LD50),并使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定细菌超声破碎上清液中可溶性蛋白含量。结果表明,黄连水提物对溶藻弧菌具有明显的抑制作用,其对溶藻弧菌的MIC、MBC和LD50的值分别为7.800mg/mL、31.250mg/mL和15.625mg/mL。胞内可溶性蛋白含量变化的结果提示:黄连发挥抑菌作用的机制可能是通过损伤细菌的细胞壁导致细菌内容物的释放并引起菌体裂解死亡。黄连具有发展成为一种高效抗水产病害中草药制剂的潜力。     

Overexpression of rice OsLOL2 gene confers disease resistance in tobacco to Pseudomonas syringae pv. Tabaci

LSD1-related proteins of Arabidopsis with LSDl-like zinc finger domains regulate disease resistance and programmed cell death （PCD）. We cloned a rice OsLOL2 gene, orthologous to LSD1 of Arabidopsis and expressed it in a tobacco plant. Transgenic tobacco lines displayed enhanced disease resistance to a virulent bacterium Pseudomonas syringae pv. tabaci （Pst）. RT-PCR analysis showed that overexpression of OsLOL2 in transgenic tobacco lines resulted in upregulation of two pathogenesis-related （PR） protein genes, PR2 and PR5. Our results suggest that overexpression of OsLOL2 in transgenic tobacco enhances the resistance through the induction of PR proteins and hypersensitive response-like reaction.     

一种水产弧菌快速药敏检测方法的建立

【目的】实现弧菌药物敏感性的现场快速检测。【方法】以副溶血性弧菌、溶藻弧菌及灿烂弧菌3种弧菌为试验菌株,在Mueller-Hinton(MH)培养基基础上通过添加鱼肉蛋白胨及调节无机盐离子浓度,优选弧菌的增菌液。同时利用阿尔玛蓝作为颜色指示剂,选择11种水产常见药物并设置8个倍比稀释的浓度梯度,结合运用海藻糖作为包被保护剂,制备弧菌快速药敏检测微孔板,板内设有药敏检测区、生长对照区及质控区。【结果】利用药敏微孔板法及传统的试管稀释法分别对副溶血性弧菌、溶藻弧菌及灿烂弧菌进行药敏检测,结果显示微孔板法测定的所有药物对3种弧菌的MIC值与试管稀释法完全吻合。【结论】本研究建立的药敏微孔板法能够实现对3种弧菌药敏特性的快速、简便、准确检测,研究结果将为水产病原微生物的现场快速选药技术提供重要参考。     

威灵仙水提物对卵形鲳鲹源溶藻弧菌的抑制作用

近年来水产养殖行业不断扩大,但随之而来的鱼病对养殖行业造成了巨大损失。本研究以卵形鲳鲹(前期发病)上分离出的溶藻弧菌为实验对象,批量筛选多种中草药,选择抑菌效果最好的一种或几种中草药,并探究不同浓度中草药水提物的抑菌效果,确定其杀菌浓度(MBC)及最小抑菌浓度(MIC),再通过生化指标胞内乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)的含量来确定其杀菌机制。对大量中草药水提物的筛选结果表明,威灵仙水提物对溶藻弧菌具有较好的抑制作用;通过二倍稀释法将威灵仙水提物进行逐级稀释后,发现其对溶藻弧菌的致死浓度为500 mg/mL,最小抑菌浓度为250 mg/mL;孵育2 h后,实验组胞内LDH的含量明显比对照组含量低,并且随着时间的推移,对照组含量先升高后降低,而实验组含量逐渐减少,实验组与对照组胞内LDH含量出现显著性的差异。威灵仙水提物致死溶藻弧菌有可能是通过破坏细胞膜,使细胞内容物释放从而引起菌体裂解。