改良结核分枝杆菌L型检测方法在结核病早期诊断中的价值

目的探讨改良结核分枝杆菌L型检测方法在结核病早期诊断中的应用价值。方法选择2012年8月至2014年8月在武汉市第十一医院门诊确诊的120例活动性肺结核患者,分别采用荧光定量聚合酶链反应法(PCR)、MTB-L抗酸染色法、萋-尼抗酸染色法(Ziehl-Nelsen,Z-N)、改良IK抗酸染色法检测MTB-L的阳性感染率,以荧光定量PCR法作为金标准,评价各种检测方法对MTB-L结核病的诊断价值。结果荧光定量PCR法MTB-L阳性检出率为30.0%(36/120),Z-N法阳性检出率为14.2%(17/120),改良IK抗酸染色法阳性检出率为25.8%(27/120),MTB-L抗酸染色法阳性检出率为28.3%(34/120)。以荧光定量PCR法作为金标准,MTB-L抗酸染色法检测特异度为96.4%,灵敏度为86.1%,准确度为93.3%;与荧光定量PCR法结果比较,Z-N法检测Kappa值为0.509,改良IK抗酸染色法Kappa值为0.731,MTB-L抗酸染色法Kappa值为0.839,MTB-L抗酸染色法与荧光定量PCR法一致性最好。结论 MTB-L抗酸染色法检测MTB-L的特异度、准确度较高,与荧光定量PCR法一致性最好,且操作简单,对MTB-L早期诊断具有重要的参考价值。     

盆腔积液改良抗酸染色法的建立与应用价值分析

目的探讨改良抗酸染色法在盆腔积液中检测结核分枝杆菌对于盆腔结核的诊断价值。方法建立改良抗酸染色法,对58例已确诊为盆腔结核病人及58例盆腔肿瘤病人(对照组)的盆腔积液分别利用改良抗酸染色法、离心涂片法、荧光定量PCR法进行检测,比较3种方法的检测灵敏度及特异度。结果改良抗酸染色法、离心涂片法、荧光定量PCR法的灵敏度分别为34.48%(20/58)、1.72%(1/58)和39.66%(23/58)。改良抗酸染色法与离心涂片法灵敏度差异有统计学意义,改良抗酸染色法较高(配对χ~2=19.00,P0.001);改良抗酸染色法和荧光定量PCR法差异无统计学意义(配对χ~2=3.00,P0.05);离心涂片法和荧光定量PCR法差异有统计学意义,荧光定量PCR法较高(配对χ~2=22.00,P0.001)。3种方法特异度分别为100.00%、100.00%和95.08%,差异无统计学意义(配对χ~2=3.00,P0.05)。结论盆腔积液采用改良抗酸染色法进行结核分枝杆菌检测灵敏度高,特异度好,具有较高的临床应用价值。     

高海拔地区结核杆菌抗酸染色的方法改进

目的：在高海拔地区改良结核杆菌常规抗酸染色步骤,提高结核杆菌检出率,扩大常规抗酸染色在高海拔地区基层医院的临床应用。方法采用常规萋纳抗酸染色法和改良抗酸染色法对55例结核活检标本染色处理,比较结核杆菌阳性检出率,并用Q-PCR验证结果。结果常规染色法检测结核杆菌的阳性率为12.7%而改良法检测结核杆菌阳性率达到45.5%,同时改良法显示结核杆菌菌量增多,染色增强,菌体与背景对比清楚,易判读。结论改良的抗酸染色法不需要特殊设备,既经济又简单,结核杆菌阳性率高,更适合高海拔地区基层医院的应用。     

三种结核检测方法临床应用评价

目的评价目前三种检测手段在结核病临床诊断中的应用价值。方法对确诊的280例结核病人进行痰涂片抗酸染色和两种结核抗体检测,并进行比较分析。结果 280例结核病人三种方法联合检测的阳性率为82.85%(232/280)。痰涂片抗酸染色的阳性率为40.00%(112/280),胶体金法(TB-DOT)阳性检出率为74.64%(209/280),免疫层析法(TB-CHECK-1)阳性检出率为50.71%(142/280)。痰涂片抗酸染色的阳性率与TB-DOT、TB-CHECK-1比较,差异均有统计学意义(P<0.05),两种结核抗体检测方法的阳性检出率更高。而TB-DOT和TB-CHECK-1两种方法的阳性率比较差异亦有统计学意义(P<0.05),TB-DOT的阳性检出率更高。结论三种方法联合用于临床结核病检测,可以将痰涂片抗酸染色的阳性率提高1倍。TB-DOT的检测灵敏度最高。     

金胺O荧光染色法辅助诊断结核抗酸杆菌感染的价值分析

目的探讨分析金胺O荧光染色法辅助诊断结核抗酸杆菌感染的价值。方法选择该院2017年6月-2018年6月收治的接受金胺O荧光染色、抗酸染色、痰涂片抗酸染色及血清学结核抗体金标法联合检测的病理组织切片患者195例,统计计算各诊断方法的阳性情况、敏感性及特异性,并进行比较分析。结果临床诊断与病理诊断均符合结核抗酸杆菌感染87例,均不符合结核抗酸杆菌感染80例,病理未确诊而临床诊断为结核抗酸杆菌感染28例。金胺O荧光染色法各方面诊断阳性率比组织抗酸法、痰涂抗酸法、血清学结核抗体金标法阳性率均明显更高(P?0.05);金胺O荧光染色法的特异性与组织抗酸法、痰涂抗酸法、血清学结核抗体金标法比较差异无统计学意义(P?0.05),金胺O荧光染色法的敏感性则比其他方法显著更高(P?0.05)。结论临床诊断结核抗酸杆菌感染采用金胺O荧光染色法辅助诊断可促进阳性率提高,具有较高的敏感性和特异性,值得推广。     

萋-尼氏抗酸染色法和金胺O荧光染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的对比

目的:比较萋-尼氏抗酸染色法（简称Z-N）和金胺O荧光染色法（简称荧光染色）在痰涂片镜检中对结核分枝杆菌的检测效果差异。方法:纳入580份痰标本,挑取相同部位制成两份涂片,分别使用Z-N和荧光染色进行染色镜检,比较两种方法的阳性检出率、阳性分级标准及读片时间上的差异。将涂片后余下的痰标本采用全自动分枝杆菌检测/药敏系统做液体培养。结果:Z-N法阳性检出率为10.8%,荧光染色法为15.3%,两种方法比较差异有统计学意义（P＜0.05）。对两种方法每一级别的结果进行?字2检验,结果表明两种染色方法在各个分级没有统计学差异（P＞0.05）。荧光染色法的读片时间要明显短于Z-N。结论:荧光染色阳性检出率略高于Z-N,证明荧光染色法是一种快速、灵敏的检测方法,对肺结核的临床诊断具有重要意义。     

恒温扩增试纸条法快速检测痰标本中结核分枝杆菌

目的评价恒温扩增试纸条法快速检测痰标本中结核分枝杆菌的试验效果,寻求更简便、快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法,评估结核分枝杆菌恒温扩增试纸条法在基层实验室应用的可行性。方法采用痰涂片抗酸染色法、罗氏培养法和恒温扩增试纸条法对痰标本中的结核分枝杆菌进行检测,对3种方法的检出率进行比较,并采用PNB试验对培养阳性菌株进行菌型鉴定。结果恒温扩增试纸条法检测痰标本中结核分枝杆菌的检出率最高（18．40％）,罗氏培养法次之（14．41％）,痰涂片抗酸染色法的检出率最低（9．09％）;恒温扩增试纸条法与培养法比较的灵敏度为100．00％（65／65）,特异性为99．34％（368／386）;恒温扩增试纸条法检测痰结核分枝杆菌的灵敏度和特异性均为100．00％。结论恒温扩增试纸条法检测痰结核分枝杆菌具有快速、敏感、特异等优点,并可对结核分枝杆菌复合群进行确认,技术操作简便,所需仪器设备简单,适于在基层实验室推广。     

L型结核菌致耳后淋巴结结核16例误诊报告

对 1990～ 1995年经病理诊断为非特异性淋巴结炎的 16例患者淋巴结重新切片复查 ,用经典抗酸染色法 ( Ziehl- Neelsen ZN)、改良抗酸染色法 ( Intensifed kinyoun IK)和免疫组化染色法进行。结果发现 11例牛型结核卡介菌 ( BCG)抗体免疫组化染色阳性 ,13例抗酸染色 L型阳性。对16例患者耳后淋巴结抗酸菌 L型感染的病变特征及误诊的可能原因进行初步探讨     

458份痰抗酸染色涂片和结核杆菌快速培养的结果比较

目的：评价痰抗酸染色和快速结核菌培养检测结核分枝杆菌的临床诊断价值,分析两种方法的优缺点.方法：对458份痰标本同时采用抗酸染色涂片法和快速结核菌培养法进行检测,并对其阳性率进行比较.结果：458例痰标本抗酸染色阳性160例,阳性率34.9％;结核菌培养阳性223例,阳性率48.7％;其中痰抗酸染色涂片与结核菌培养均阳性150例,阳性率32.8％;痰抗酸染色涂片阳性,结核菌培养阴性10例,阳性率2.2％;痰抗酸染色涂片阴性,结核菌培养阳性73例,阳性率15.9％;痰抗酸染色涂片与结核菌培养均阴性225例.结论：痰快速结核菌培养阳性率高于抗酸染色涂片,但不能过分依赖仪器,应对可疑标本做好涂片验证.抗酸染色报告时间短,价格低廉,两种方法在结核病的诊断中相互弥补,缺一不可.     

不同检测方法对痰液标本中结核杆菌检测效果的比较分析

目的比较不同检测方法检测痰液标本结核分支杆菌的检测效果.方法 80份拟诊为肺结核患者的痰液标本分别采用涂片抗酸染色法、快速结核菌培养法和荧光定量PCR技术对痰结核分枝杆菌进行检测,并对其检出率进行比较.结果 RT-PCR法、菌培养法、染色法的检出率分别为93.75%、71.25%、56.25%.RT-PCR检出率高于菌培养法及染色法,菌培养法检出率高于染色法.结论 荧光定量PCR技术能对痰结核分枝杆菌进行简便快速、敏感、特异的检测,值得推广应用.     

结核灶内抗酸菌L型检出方法的研究和意义

本文应用Ｉｔｅｎｆｉｓｅｄ ｋｉｎｙｏｕｎ（ＩＫ）改良抗酸染色，Ｚｉｅｈｌ－Ｎｅｅｌｓｅｎ（ＺＮ）经典抗酸染色和Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｃａｌｍｅｔｔｅ Ｇｕｅｖｉｎ（ＢＣＧ）抗体免疫组化染色等方法对１８１例结核病组织切片进行了结核杆菌的检测。结果ＩＫ抗酸染色法Ｌ型结核菌检出率为６７．４％，ＺＮ法为２９．８％，两者差异有显著性。两种抗酸染色法均证明结核灶内主要（６７．４％、２９．８％）为抗酸菌Ｌ型；杆菌     

改良抗酸染色法检测胸腔积液中结核分枝杆菌对结核性胸膜炎的诊断

目的 评价改良抗酸染色法在结核性胸膜炎的诊断价值.方法 选取2013年10月至2015年02月于西安市胸科医院诊治的胸腔积液患者, 纳入实验组即结核性胸腔积液115例, 对照组恶性胸腔积液36例, 分别应用改良的抗酸染色法、传统的Ziehl-Neelsen染色法、BACTEC-MGIT 960培养检测, 将BACTEC-MGIT 960培养结果作为参考标准, 确定两种染色方法的灵敏度和特异性.结果 以培养结果作为参考标准, 改良染色法的灵敏度, 特异度, 阳性预测值 (PPV) , 和阴性预测值 (NPV) 分别为72.2%, 100%, 100%, 和52.9%;传统染色法分别为0, 100%, 0, 和23.8%.结论 改良抗酸染色法可明显提高结核性胸膜炎的阳性诊断率, 具有简便、快速、准确的优点, 能为结核性胸膜炎的诊断提供病原学依据, 值得临床推广应用.     

4种不同肺结核支气管肺泡灌洗液诊断方法的比较研究

目的 比较不同诊断方法在肺结核患者的支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）检出率及利福平耐药率差异,进而评估不同检测技术在肺结核临床诊断中的应用价值。 方法 回顾分析河北省胸科医院就诊的肺结核患者297例,同一时间分别采用BACTEC MGIT960快速培养系统（培养法）、改良抗酸染色法（染色法）、Gene Xpert MTB/RIF系统（Xpert法）及TB-DNA PCR-荧光探针法（PCR法）对同一患者的BALF样本进行MTB及利福平耐药检测,并分析不同诊断方法的结果差异。 结果 培养法、染色法、Xpert法和PCR法的MTB阳性检出率分别为46.465%（138/297）、30.640%（91/297）、55.556%（165/297）和36.364%（108/297）,差异有统计学意义（χ2=44.336,P＜0.001）。Xpert法MTB阳性检出率显著高于其他3种方法,培养法显著高于染色法及PCR法,差异有统计学意义（Xpert法相对于其他3种的χ2值分别为4.911、37.592和22.023,P＜0.05;培养法相对于另外2种的χ2值分别为15.698、6.245,P＜0.05）,而染色法与PCR法阳性率之间差异无统计学意义（P＞0.05）。培养法、Xpert法和PCR法的利福平耐药检测结果分别为10.145%（14/138）、9.091%（15/165）和10.185%（11/108）,差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 4种检测方法在肺结核患者BALF样本中MTB阳性检出率差异较大,BACTEC MGIT960快速培养系统和Gene Xpert MTB/RIF系统能够较好地应用于肺结核患者BALF中MTB及利福平耐药检测,且Xpert法MTB阳性检出率更高、检测时间更快速,而利福平耐药检出率差异无统计学意义（P＜0.05）。     

L型抗酸菌感染的病理和PCR检测

为了探讨抗酸菌Ｌ型感染的病理和分子生物学检测意义。方法我们采用改良抗酸染色法和聚合酶链反应法对３０例病理学诊断为非特异性淋巴结炎和１５例正常胎儿石蜡包埋组织重新切片进行检测分析。结果对３０例非特慢性淋巴结炎的ＩＫ检测,其中２０例显示抗酸菌Ｌ型感染阳性,ＰＣＲ法检测１８／３０例抗酸菌Ｌ型感染阳性,两种方法间无显著差异;正常胎儿组织均为阴性,两组间（淋巴结炎组和正常胎儿组（Ｐ〈０．０１,有显著性差异。     

改进的抗酸染色技术在提高麻风杆菌检出率中的应用

目的将传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行改进,提高麻风杆菌的阳性检出率。方法对商洛疗养院68例麻风病人和121例疑似病例用传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法和改进的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行实验室检测,病理切片做进一步比较。结果改进的抗酸染色法麻风杆菌阳性检出率明显高于传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法,前者阳性检出率为70.4%,后者为44.4%,差异有统计学意义(χ2=7.07,P0.05)。改进的抗酸染色法麻风杆菌切片着色率高、染色效果佳。结论改进的抗酸染色法优于传统的抗酸染色法,为麻风病的实验室诊断和筛查提供了靶方向。     

比较分析痰涂片及荧光定量PCR在诊断肺结核中的作用

目的探讨建立更快速、准确的痰结核分枝杆菌检测方法。方法采用痰涂片抗酸染色法和荧光定量PCR技术对痰结核分枝杆菌进行检。结果荧光定量PCR技术的阳性检出率是63.7%（571/897）,明显高于抗酸染色法的43.4%（389/897）。2种方法检测对照组的结果均为阴性,特异度为100%（103/103）。结论荧光定量PCR是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,具有重要的应用价值。     

3种方法检测结核分枝杆菌的比较

目的比较荧光定量PCR与抗酸染色、结核抗体检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,及在临床诊断中的应用价值.方法对48例临床确诊的结核病患者和21例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用荧光定量PCR法和痰涂片抗酸染色法检测,并分离患者外周血血清检测结核抗体,对3种检测方法的结果进行分析比较.结果抗酸染色法检测结核杆菌阳性率为22.9%,特异性为100%;血清结核抗体检测阳性率为77.1%,特异性为85.7%;荧光定量PCR检测阳性率为52.1%,特异性为100%.结论荧光定量PCR是一种快速、防污染、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值.     

聚合酶链反应和改良抗酸染色诊断L型结核杆菌感染

目的　探讨 L 型抗酸菌的 IK染色和 PCR检测的临床应用价值 .方法　采用 IK染色和 PCR技术 ,对结核病患者(35例 )、非特异性淋巴结炎患者 (30例 )和正常胎儿 (1 0例 )的石蜡切片进行对比研究 .结果　两种方法 (PCR和 IK染色 )对上述 3组 75例的检测阳性率分别为 80 % ,83% ;6 7% ,6 0 %及 0 % .结论　 PCR技术及 IK染色 ,检测抗酸菌 L 型的阳性率及灵敏度均较高     

三种隐孢子虫卵囊改良抗酸染色的形态学观察

目的观察3种隐孢子虫卵囊改良抗酸染色的形态特点。方法细胞图象分析系统观察改良抗酸染色后的牛隐孢子虫(C.bovis)、安氏隐孢子虫(C.andersoni)、隐孢子虫猪基因型Ⅱ(Cryptosporidium sp.pig genotypeⅡ)三种隐孢子虫卵囊的形态特点,测定卵囊长径和短径,计算卵囊指数。结果卵囊呈玫瑰红色,圆形或卵圆形,囊壁不着色,囊内子孢子的排列不规则且多形态,可见暗黑色颗粒状残留物。三种隐孢子虫卵囊中安氏隐孢子虫卵囊明显较其他两种卵囊大,但油镜下无法区分三种隐孢子虫卵囊形态。标本中常存在有大小不等、染色均匀、无内部结构的非特异性抗酸颗粒。结论改良抗酸染色法是较好的临床隐孢子虫卵囊检测方法,但需要与非特异性抗酸颗粒鉴别。     

荧光PCR熔解曲线法对痰样本结核分枝杆菌耐药性检测价值及耐药特征分析

目的：评估荧光PCR熔解曲线法（熔解曲线法）检测肺结核患者涂阳痰样本结核分枝杆菌（MTB）对一线抗结核药物耐药性价值及耐药特征分析。方法：收集涂阳且培养阳性肺结核患者痰样本和相应MTB菌株各142例,采用熔解曲线法检测痰样本MTB对抗结核药物链霉素（SM）、异烟肼（INH）、利福平（RFP）、乙胺丁醇（EMB）耐药情况,同时采用液体药敏法对相应MTB菌株耐药性检测,对两种检测结果行方法学比较。结果：以液体药敏法为标准,熔解曲线法检测痰样本MTB对4种抗结核药物耐药性结果差异无统计学意义（P>0.05）,熔解曲线法检测SM、INH、RFP、EMB耐药性的敏感度分别为：78.57% (11/14),70.00% (14/20),100.00% (12/12),71.43% (5/7);特异度分别为：92.97%(119/128),96.72%(118/122),97.69%(127/130),100%(135/135);两者符合率分别为：91.55%(130/142),92.96%(132/142),97.89%(139/142),98.59%(140/142);Kappa值分别为：0.601,0.696,0.877,0.826。结论：与传统液体药敏检测相比,熔解曲线法检测痰样本MTB对抗结核药物SM、INH、RFP、EMB的耐药性效能一致,特异度和符合率均较高。该法对结核患者涂阳痰样本MTB耐药性检测有较好临床参考价值。