| 含N-乙酰化肝素寡糖的制备及序列分析 |
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| 引用本文： | 林江慧,张建伟,肖晓毛,高建平,张惠芳,魏峥.含N-乙酰化肝素寡糖的制备及序列分析[J].分析化学,2015,43(5). |
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| 作者姓名： | 林江慧 张建伟 肖晓毛 高建平 张惠芳 魏峥 |
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| 作者单位： | 福州大学糖生物化学研究所,福州,350002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家基础科学人才培养基金项目(No.1103303)资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China，the National Science Foundation for Fostering Talents in Basic Research of the National Natural Science Foundation of China |
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| 摘 要： | 建立了含N-乙酰化肝素寡糖的分离提纯及其序列结构分析方法.首先应用肝素酶Ⅰ深度酶解低分子量肝素来富集含N-乙酰化结构寡糖,通过Bio-Gel P10凝胶色谱法分离制备了包括二糖至十四糖的系列肝素寡糖粗样品,ProPac PA-1强阴离子高效液相色谱(SAX-HPLC)等方法对粗样品进一步分离,提纯得到4种六糖和3种八糖片段.其次应用肝素酶Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ复合酶解与HPLC法分析各纯化寡糖的二糖组分,并结合肝素酶Ⅰ底物特异性,初步推断4种六糖和3种八糖的序列结构.在寡糖的糖链两端均含有N-硫酸化二糖,而N-乙酰化二糖分布在糖链当中.应用电喷雾离子阱-飞行时间质谱(ESI-IT-TOF-MS)在负离子模式下进一步表征寡糖并分析其裂解规律.结果表明,各寡糖中均出现大量因SO32-丢失形成的碎片离子峰,六糖中主要有双电荷和三电荷碎片离子峰;在八糖中出现了一系列从双电荷至五电荷的离子峰.各寡糖的双电荷离子峰质荷比进一步确定了上述寡糖的序列结构.六糖的裂解规律表明,裂解主要存在于糖苷键,N-乙酰葡糖胺和糖醛酸上的裂解方式分别为0,2X和0,2Z.本研究提供了切实有效的分离、分析未知结构肝素寡糖序列的新方法.
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| 关 键 词： | 肝素寡糖 飞行时间质谱 肝素酶 序列测定 |
Preparation and Sequencing of N-acetylated Heparin Oligosaccharides |
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| LIN Jiang-Hui,ZHANG Jian-Wei,XIAO Xiao-Mao,GAO Jian-Ping,ZHANG Hui-Fang,WEI Zheng.Preparation and Sequencing of N-acetylated Heparin Oligosaccharides[J].Chinese Journal of Analytical Chemistry,2015,43(5). |
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| Authors: | LIN Jiang-Hui ZHANG Jian-Wei XIAO Xiao-Mao GAO Jian-Ping ZHANG Hui-Fang WEI Zheng |
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| Keywords: | Heparin oligosaccharide Time-of-flight mass spectrometry Heparinase Sequence analysis |
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