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| 酵母双杂交诱饵蛋白日本血吸虫抱雌沟蛋白重组质粒的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 吴启进,金亚美,李勉,刘金明,王小波,石火英,林矫矫.酵母双杂交诱饵蛋白日本血吸虫抱雌沟蛋白重组质粒的构建及鉴定[J].中国兽医寄生虫病,2010,18(3):51-55. |
| 作者姓名： | 吴启进 金亚美 李勉 刘金明 王小波 石火英 林矫矫 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200241;扬州大学兽医学院,扬州,225009 2. 中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200241 3. 河南农业大学动物医学学院,郑州,450002 4. 扬州大学兽医学院,扬州,225009 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，上海市浦江人才计划 |
| 摘 要： | 为筛选与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的因子,本研究以抱雌沟蛋白（gynecophoral canal protein ofSchistosoma japonicum,SjGCP）为诱饵蛋白构建了用于酵母双杂交筛选系统的重组质粒。根据日本血吸虫抱雌沟蛋白的基因序列设计引物,经过PCR扩增、酶切回收,与经相应酶切的线性化载体pBGKT7-BD连接构建重组质粒。随后将重组质粒pGBKT7-BD-SjGCP转化酵母菌株,测定融合蛋白BD-SjGCP在酵母菌中的自激活活性、对酵母菌生长的影响及在酵母中的表达情况。结果显示构建的重组诱饵蛋白质粒pGBKT7-BD-SjGCP能够在酵母细胞内正确表达,没有独自激活报告基因表达的活性,且其表达对酵母细胞没有毒性,不影响酵母细胞的生长。可见,重组质粒pGBKT7-BD-SjGCP可用于筛选与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的物质。 |
| 关 键 词： | 酵母双杂交技术 抱雌沟蛋白 自激活 |
CONSTRUCTION OF DNA-BD VECTOR WITH SJGCP FOR YEAST TWO-HYBRID SYSTEM |
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| WU Qi-jin,JIN Ya-mei,LI Mian,LIU Jin-ming,WANG Xiao-bo,SHI Huo-ying,LIN Jiao-jiao.CONSTRUCTION OF DNA-BD VECTOR WITH SJGCP FOR YEAST TWO-HYBRID SYSTEM[J].Chinese Journal of Veterinary Parasitology,2010,18(3):51-55. | |
| Authors: | WU Qi-jin JIN Ya-mei LI Mian LIU Jin-ming WANG Xiao-bo SHI Huo-ying LIN Jiao-jiao |
| Affiliation: | 1.Key Laboratory of Animal Parasitology of Ministry of Agriculture,National Key Laboratory of Animal Schistosomiasis Control,Shanghai Veterinary Research Institute,CAAS,Shanghai 200232,China;2.College of Veterinary Medicine,Yangzhou University,Yangzhou225009,China;3.College of Veterinary Medicine,Henan Agricultural University,Zhengzhou450002,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Yeast two-hybrid system gynecophoral canal protein of Schistosoma japonicum（SjGCP） autoactiviation |
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