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慢病毒载体介导 CDK2 基因沉默对黑素瘤B16-F1细胞生物学行为的影响
引用本文:晋佳路,朱仁书,谢育媛,刘红春. 慢病毒载体介导 CDK2 基因沉默对黑素瘤B16-F1细胞生物学行为的影响[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2016, 23(2): 243-249. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.02.015
作者姓名:晋佳路  朱仁书  谢育媛  刘红春
作者单位:1. 鹤壁职业技术学院医学院,河南鹤壁,458030;2. 湖北省食品药品监督检验研究院,湖北武汉,430064;3. 郑州大学第一附属医院检验科,河南郑州,450052
基金项目:河南省科技计划项目(No.122300410193)和河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(No.2011GGJS-262)
摘    要:目的:探讨由慢病毒载体pUL介导的pUL-CDK2-shRNA3 (CDK2-shRNA)沉默CDK2基因后对小鼠黑素瘤B16-F1细胞恶性生物学行为的影响,初步探索其作用机制.方法:利用重组慢病毒载体CDK2-shRNA转染B16-F1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,DAPI染色、AnnexinV-FITC/PI双染流式术检测细胞凋亡情况,流式术检测细胞周期变化,细胞黏附实验、transweU小室实验分别检测细胞黏附、侵袭和迁移能力变化,Western blotting检测细胞周期信号通路上RB蛋白(成视网膜细胞瘤蛋白)、pRB蛋白、细胞周期相关转录因子E2F1及侵袭迁移相关蛋白基质金属酶-2(MMP-2)、基质金属酶-9(MMP-9)的表达水平.结果:与空白对照组和阴性对照组相比,CDK2-shRNA组细胞相对增殖率、细胞黏附率、细胞侵袭和迁移能力均显著下降(均P<0.05).细胞凋亡率显著增加(均P<0.05);G1期细胞显著增加而S期和G2期显著降低(P<0.05).细胞周期相关蛋白pRB、E2F1明显降低而RB显著升高(P<0.05),细胞侵袭和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9明显降低(P<0.05).结论:慢病毒载体pUL介导的shRNA沉默CDK2基因对B16-F1细胞恶性生物学行为有显著的抑制作用,其机制主要与细胞周期和细胞侵袭迁移相关蛋白表达变化有关.

关 键 词:黑素瘤  B16-F1细胞  CDK2基因  sh-RNA  恶性生物学行为  机制
收稿时间:2015-10-06
修稿时间:2016-02-24

Effects of silenced CDK2 gene mediated by lentiviral vector on biological behavior of melanoma B16-F1 cells
JIN Jialu,ZHU Renshu,XIE Yuyuan and LIU Hongchun. Effects of silenced CDK2 gene mediated by lentiviral vector on biological behavior of melanoma B16-F1 cells[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2016, 23(2): 243-249. DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2016.02.015
Authors:JIN Jialu  ZHU Renshu  XIE Yuyuan  LIU Hongchun
Affiliation:Department of Medicine, Hebi Polytechnic College, Hebi 458030, Henan, China,Department of Medicine, Hebi Polytechnic College, Hebi 458030, Henan, China,Hubei Institute for Food and Drug Control, Wuhan 430064, Hubei, China and Department of Clinical Laboratory, the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, Henan, China
Abstract:
Keywords:melanoma   B16-F1 cell   CDK2 gene   sh-RNA   malignant biological behavior   mechanism
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