MicroRNA-145-3p 在先天性巨结肠中的作用及机制研究

目的 探讨microRNA-145-3p（miR-145-3p）在先天性巨结肠（HD）中的表达及其发挥作用的可能分子机制。方法 选取2013 年2 月—2018 年6 月南方医科大学珠江医院40 例HD 病变段肠管（HD 病变肠管组）及40 例正常肠管（正常肠管组）组织标本。采用qRT-PCR 检测组织标本miR-145-3p 相对表达量。过表达细胞miR-145-3p 后，CCK-8 法检测细胞的增殖情况；Transwell 检测细胞迁移情况；双荧光素酶报告基因实验、Western blotting 及免疫组织化学染色明确miR-145-3p 对靶基因GDNF 的影响。结果 HD 病变肠管组miR-145-3p 相对表达量高于正常肠管组（P <0.05）。过表达细胞miR-145-3p 后，细胞增殖能力下降（P <0.05），细胞迁移能力降低（P <0.05）；靶基因预测软件筛选出GDNF 是miR-145-3p 的潜在靶点；双荧光素酶报告基因实验证实，miR-145-3p 可以与GDNF 的3''-UTR 结合（P <0.05）；Western blotting 检测证实，miR-145-3p 可使SH-SY5Y 细胞的GDNF 蛋白相对表达量降低（P <0.05）；而免疫组织化学染色证实，GDNF在miR-145-3p 高表达的HD 组织标本中存在高频低表达。结论 miR-145-3p 可以抑制神经母细胞的增殖及迁移，是一个重要的HD 分子标志物，其作用机制可能与抑制GDNF 蛋白表达有关。

Role and mechanism of microRNA-145-3pin Hirschsprung disease