| 毕赤酵母系统来源的重组人血清白蛋白的制备及初步晶体学分析 |
| |
| 引用本文： | 陈蕴,黄鹏飞,郭瑞庭,金坚. 毕赤酵母系统来源的重组人血清白蛋白的制备及初步晶体学分析[J]. 食品与生物技术学报, 2015, 34(2): 151-157 |
| |
| 作者姓名： | 陈蕴 黄鹏飞 郭瑞庭 金坚 |
| |
| 作者单位： | 江南大学药学院;中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81273437) |
| |
| 摘 要： | 人血清白蛋白(human serum albumin,HSA),为血浆中含量最丰富的蛋白质,具有调控血液中的功能蛋白质、脂肪酸、激素、药物和维持血液渗透压功能。毕赤酵母工程菌Pichia pastoris GSll5/p PIC9K-rHSA经50L发酵罐发酵,发酵液冷冻离心,上清液超滤浓缩后,依次通过Blue Sepharose 6FF亲和层析、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析和SP Sepharose 6FF离子层析纯化,实现rHSA的规模化制备,最终rHSA的纯度可达99.9%以上。通过rHSA的结晶条件筛选实验,筛选出沉淀剂分别为PEG 1500、PEG 3350、PEG 6000、MPEG 2000和MPEG 5000五种结晶条件,结晶环境均为疏水性环境,并且结晶环境不能含有类似DTT的强还原剂。其中沉淀剂为MPEG2000条件下优化出的rHSA和pHSA蛋白晶体经X光衍射分辨率最好,分别为3.4魡和3.1魡,通过分子置换法得到rHSA和pHSA的晶体结构,二者结构大体相似,为rHSA在临床上的应用和HSA融合蛋白的晶体结构研究提供可靠的依据和基础。
|
| 关 键 词： | 人血清白蛋白 纯化 结晶 晶体结构 融合蛋白 |
Preparation and Crystallographic Studies of Recombinant Human Serum Albumin in Pichia pastoris |
| |
| CHEN Yun,HUANG Pengfei,GUO Reiting and JIN Jian. Preparation and Crystallographic Studies of Recombinant Human Serum Albumin in Pichia pastoris[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2015, 34(2): 151-157 |
| |
| Authors: | CHEN Yun HUANG Pengfei GUO Reiting JIN Jian |
| |
| Affiliation: | CHEN Yun;HUANG Pengfei;GUO Reiting;JIN Jian;School of Pharmacy,Jiangnan University;Tianjin Institute of Industrial Biotechnology,Chinese Academy of Sciences; |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | human serum albumin purification crystallization crystal structure fusion protein |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《食品与生物技术学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《食品与生物技术学报》下载免费的PDF全文 |
|
