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交联纳米SiO_2固定化蜗牛酶的制备表征及转化淫羊藿苷研究
引用本文:李瑞云,刘聪燕,许婷,杨茹,陈彦. 交联纳米SiO_2固定化蜗牛酶的制备表征及转化淫羊藿苷研究[J]. 中草药, 2019, 50(20): 4904-4910
作者姓名:李瑞云  刘聪燕  许婷  杨茹  陈彦
作者单位:安徽中医药大学, 安徽 合肥 230012;南京中医药大学附属中西医结合医院, 江苏 南京 210028;江苏省中医药研究院, 中药组分与微生态研究中心, 江苏 南京 210028,南京中医药大学附属中西医结合医院, 江苏 南京 210028;江苏省中医药研究院, 中药组分与微生态研究中心, 江苏 南京 210028,南京中医药大学附属中西医结合医院, 江苏 南京 210028;江苏省中医药研究院, 中药组分与微生态研究中心, 江苏 南京 210028,南京中医药大学附属中西医结合医院, 江苏 南京 210028;江苏省中医药研究院, 中药组分与微生态研究中心, 江苏 南京 210028,南京中医药大学附属中西医结合医院, 江苏 南京 210028;江苏省中医药研究院, 中药组分与微生态研究中心, 江苏 南京 210028
基金项目:国家自然科学基金青年基金项目(81703714);江苏省科教强卫医学重点人才项目(ZDRCA2016036)
摘    要:目的制备交联纳米Si O2固定化蜗牛酶,并对其理化性质、酶解淫羊藿苷为宝藿苷I的最适酶解条件及酶学性能进行考察。方法采用共价偶联法将蜗牛酶固定在戊二醛交联纳米Si O2上,以相对酶活力为指标,对固定化条件进行优化;采用透射电镜(TEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)和元素分析法对固定化蜗牛酶的理化性质进行表征;并以淫羊藿苷为底物,以游离酶为对照,考察固定化蜗牛酶的最适酶解条件及酶解动力学参数、重复利用性、热稳定性等酶学性能。结果固定化蜗牛酶制备的最佳酶载比为1∶3,固定化时间为6 h;其转化淫羊藿苷的最适酶解条件为pH 5.0,转化温度60℃,酶与底物质量比1∶2,转化时间12 h。固定化蜗牛酶的酶解动力学参数最大反应速率(Vmax)为0.43μg/min,米氏常数(Km)为0.78 mmol/L,重复使用5次后的相对酶活仍能保持在70%以上。结论制备的交联纳米Si O2固定化蜗牛酶机械强度高、稳定性好,不但可重复使用,还可定向水解淫羊藿苷为活性更强的宝藿苷I,工艺简单易行,转化效率高,适宜于工业化生产。

关 键 词:固定化蜗牛酶  交联纳米SiO2  生物转化  淫羊藿苷  宝藿苷I
收稿时间:2019-06-17

Study on preparation, characterization, and transformation of icariin of immobilized snailase on nano-SiO2
LI Rui-yun,LIU Cong-yan,XU Ting,YANG Ru and CHEN Yan. Study on preparation, characterization, and transformation of icariin of immobilized snailase on nano-SiO2[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2019, 50(20): 4904-4910
Authors:LI Rui-yun  LIU Cong-yan  XU Ting  YANG Ru  CHEN Yan
Affiliation:Anhui University of Chinese Medicine, Hefei 230012, China;Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China;Multi-component of Traditional Chinese Medicine and Microecology Research Center, Jiangsu Provincial Academy of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China,Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China;Multi-component of Traditional Chinese Medicine and Microecology Research Center, Jiangsu Provincial Academy of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China,Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China;Multi-component of Traditional Chinese Medicine and Microecology Research Center, Jiangsu Provincial Academy of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China,Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China;Multi-component of Traditional Chinese Medicine and Microecology Research Center, Jiangsu Provincial Academy of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China and Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China;Multi-component of Traditional Chinese Medicine and Microecology Research Center, Jiangsu Provincial Academy of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China
Abstract:
Keywords:immobilized snailase  cross-linked nano-SiO2  biotransformation  icariin  baohuoside I
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