| 高粱抗病基因SbSGT1的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 陈美晴,陈俊,蒋君梅,王营锴,屈志广,方远鹏,任明见,谢鑫. 高粱抗病基因SbSGT1的克隆及原核表达[J]. 核农学报, 2020, 34(9): 1933-1942. DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2020.09.1933 |
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| 作者姓名： | 陈美晴 陈俊 蒋君梅 王营锴 屈志广 方远鹏 任明见 谢鑫 |
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| 作者单位： | 1贵州大学农学院,贵州 贵阳 550025; 2国家小麦改良中心贵州分中心,贵州 贵阳 550025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;贵州大学大学生创新创业训练计划;贵州省高层次留学人才创新创业择优资助项目;贵州省科技厅农业科技攻关计划 |
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| 摘 要： | 为探究高粱抗病基因SbSGT1的功能,以高粱BTx623为材料,利用RNA反转录得cDNA,以cDNA为模板扩增出全长SbSGT1基因,并对其进行生物信息学分析。进一步构建pET-28a-SbSGT1重组质粒进行原核表达,并分别对表达菌株、诱导温度以及异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导浓度进行了优化。结果表明,SbSGT1全长1 095 bp,编码364个氨基酸,蛋白理论分子大小约为40.45 kDa,蛋白质等电点为5.0。进化树分析表明,SbSGT1与玉米和水稻的亲缘性较高;蛋白质序列分析表明,SbSGT1蛋白为亲水性蛋白,定位在细胞质中;二级结构预测发现其α螺旋和无规则卷曲占比最高,分别达到43.41%和45.88%。原核表达结果表明,SbSGT1最佳表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3),最佳诱导温度和IPTG浓度分别为25℃和0.8 mmol·L-1。本研究为进一步探究SbSGT1基因在高粱抗病机理中所发挥的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 高粱 SGT1 基因克隆 原核表达 |
| 收稿时间： | 2019-07-03 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Disease-Resistant Gene SbSGT1 in Sorghum |
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| CHEN Meiqing,CHEN Jun,JIANG Junmei,WANG Yingkai,QU Zhiguang,FANG Yuanpeng,REN Mingjian,XIE Xin. Cloning and Prokaryotic Expression of Disease-Resistant Gene SbSGT1 in Sorghum[J]. Acta Agriculturae Nucleatae Sinica, 2020, 34(9): 1933-1942. DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2020.09.1933 |
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| Authors: | CHEN Meiqing CHEN Jun JIANG Junmei WANG Yingkai QU Zhiguang FANG Yuanpeng REN Mingjian XIE Xin |
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| Affiliation: | 1College of Agricultural, Guizhou University, Guiyang, Guizhou 550025; 2Guizhou Sub-Center of National Wheat Improvement Center, Guiyang, Guizhou 550025 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sorghum SGT1 gene cloning prokaryotic expression |
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