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重组2型腺病毒相关病毒体外基因转导人胚肾293细胞与人颌下腺细胞的研究
引用本文:海波,刘怡,孙其飞,张春梅,王松灵. 重组2型腺病毒相关病毒体外基因转导人胚肾293细胞与人颌下腺细胞的研究[J]. 北京口腔医学, 2006, 14(1): 5-8
作者姓名:海波  刘怡  孙其飞  张春梅  王松灵
作者单位:首都医科大学;100050,北京,首都医科大学口腔医学院基因治疗分子生物学实验室及涎腺疾病中心
摘    要:目的研究重组2型腺病毒相关病毒(recombinant adeno-associated virus serotype 2,rAAV2)介导的β-半乳糖苷酶基因和人红细胞生成素(human erythropoietin,hEPO)基因在人胚肾293(human embryonic cell 293,HEK293)细胞与人颌下腺细胞(human submandibular gland,HSG)的体外表达,为进一步的涎腺基因转导提供研究基础.方法用感染复数(multiplicity of infection,MOI)为105的携带β-半乳糖苷酶基因的腺病毒相关病毒(rAAV2LacZ)转导HEK293细胞和HSG细胞,组织化学方法检测β-半乳糖苷酶基因表达,计数转导效率.用MOI分别为103、104和105的携带hEPO基因的腺病毒相关病毒(rAAV2hEPO)转导HEK293细胞和HSG细胞,ELISA法测定hEPO含量.结果rAAV2介导的β-半乳糖苷酶基因转导HEK293与HSG后组织化学染色显示转导率分别为68.2%和66.3%.rAAV2介导的hEPO基因转导HEK293细胞与HSG细胞后,随MOI值增加和时间的延长,hEPO的浓度增高.MOI=105,转导后72h时,HEK293细胞培养基中的hEPO浓度达到482.54mU/ml,HSG细胞培养基中的hEPO浓度为458.22 mU/ml.结论rAAV2载体在体外可以有效转导涎腺细胞,可以进一步应用于动物体内实验.

关 键 词:β-半乳糖苷酶  人红细胞生成素  基因转导  病毒载体  颌下腺
文章编号:1006-673X(2006)01-0005-04
收稿时间:2005-11-06
修稿时间:2005-11-06

Recombinant adeno-associated virus serotype 2-mediated gene transfer to human embryonic cell 293 and human submandibular gland cells
HAI Bo,LIU Yi,SUN Qi-fei,ZHANG Chun-mei,WANG Song-ling. Recombinant adeno-associated virus serotype 2-mediated gene transfer to human embryonic cell 293 and human submandibular gland cells[J]. Beijing Journal Of Stomatology, 2006, 14(1): 5-8
Authors:HAI Bo  LIU Yi  SUN Qi-fei  ZHANG Chun-mei  WANG Song-ling
Abstract:
Keywords:
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