| Touchdown PCR扩增多样性小鼠Fab抗体基因 |
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| 引用本文： | 王乃东,何浪,薛立群.Touchdown PCR扩增多样性小鼠Fab抗体基因[J].中国农学通报,2010,26(23):22-25. |
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| 作者姓名： | 王乃东 何浪 薛立群 |
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| 作者单位： | 湖南农业大学动物医学院,长沙410128 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，湖南省教育厅科学研究优秀青年项目 |
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| 摘 要： | 为了扩增多样性Fab抗体基因产物,保证噬菌体抗体库的足够库容。分离C57BL/6鼠的脾脏,并制备脾细胞悬液,提取其总RNA,逆转录为cDNA,利用普通PCR和Touch down(TD)PCR扩增鼠Fab基因产物,通过琼脂糖凝胶电泳验证PCR产物,比较分析2种方法的扩增效果。结果显示:轻链和重链Fd基因的PCR产物大小约为680bp,与理论值相符。电泳结果显示,TD-PCR获得8个重链Fd基因和6个轻链基因条带,普通PCR获得7个重链Fd基因和5个轻链基因条带。在普通PCR产物中,轻链基因引物VkB未能扩增出相应基因,而TD-PCR扩增出该基因。TD-PCR扩增出引物ⅢA和ⅢC的对应基因,而普通PCR却未见对应结果,普通PCR扩增出ⅢB引物的对应基因,TD-PCR未见对应结果。比较分析认为,TD-PCR可以增加抗体基因多样性,有潜力成为保证噬菌体Fab抗体库库容的途径,为Fab抗体基因的扩增及相关研究提供实验参考。
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| 关 键 词： | 有色稻 有色稻 栽插密度 产量 群体质量 |
| 收稿时间： | 2010/4/29 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2010/5/26 0:00:00 |
Amplify mouse Fab antibody gene with diversity by Touchdown PCR |
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| Wang Naidong,He Lang,Xue Liqun.Amplify mouse Fab antibody gene with diversity by Touchdown PCR[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2010,26(23):22-25. |
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| Authors: | Wang Naidong He Lang Xue Liqun |
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| Affiliation: | (College of veterinary medicine,Hunan Agriculture University,Changsha 410128) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mouse phage display technology antibody library |
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