| 辣根过氧化物酶基因真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 曾家豫,王宇仙,廖世奇,袁红霞,刘芙蓉,张渭波,刘雄雄. 辣根过氧化物酶基因真核表达载体的构建[J]. 食品工业科技, 2011, 0(1): 162-165,168 |
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| 作者姓名： | 曾家豫 王宇仙 廖世奇 袁红霞 刘芙蓉 张渭波 刘雄雄 |
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| 作者单位： | 1. 西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州,730070
2. 甘肃省医学科学研究院,甘肃兰州,730050 |
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| 基金项目： | 甘肃省教育厅科研项目(0601-28,0501B-16); 甘肃省高分子材料重点实验室开放基金课题(KF-06-01) |
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| 摘 要： | 从辣根侧根中提取总RNA,以OligodT(18)为引物,通过反转录获得了辣根总mRNA的cDNA。以获得的cDNA为模板,利用设计的一对特异寡核苷酸引物P1和P2进行PCR扩增,得到了辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP,EC1.11.1.7)同功酶C2的结构基因(hrpC2)。将hrpC2与真核表达质粒载体pPICZα-A分别用限制性内切酶EcoRI和Xbal双酶切后连接,构建了重组质粒表达载体pPICZα-A-hrpC2。将pPICZα-A-hrpC2转化大肠杆菌筛选阳性克隆并测序。测序结果显示,pPICZα-A-hrpC2重组质粒构建成功。利用BlastN程序进行DNA序列分析,显示该序列为目的ORF框,无移码突变;与Fujiyama.K,Takemura.H等报道的hrpC2序列[D90115.1]有95%的同源性。
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| 关 键 词： | 辣根过氧化物酶 pPICZα-A 基因表达 |
Construction of prokaryotic expression vector of horseradish peroxidase gene |
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| ZENG Jia-yu,WANG Yu-xian,LIAO Shi-qi,YUAN Hong-xia,LIU Fu-rong,ZHANG Wei-bo,LIU Xiong-xiong. Construction of prokaryotic expression vector of horseradish peroxidase gene[J]. Science and Technology of Food Industry, 2011, 0(1): 162-165,168 |
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| Authors: | ZENG Jia-yu WANG Yu-xian LIAO Shi-qi YUAN Hong-xia LIU Fu-rong ZHANG Wei-bo LIU Xiong-xiong |
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| Affiliation: | ZENG Jia-yu1,WANG Yu-xian1,LIAO Shi-qi2,YUAN Hong-xia2,LIU Fu-rong1,ZHANG Wei-bo1,LIU Xiong-xiong1(1. College of Life Science,Northwest Normal University,Lanzhou 730070,China,2. Gansu Province Institute of Medical Sciences,Lanzhou 730050,China) |
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| Abstract: | |
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