| 弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与Rop38相互作用蛋白的筛选 |
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| 引用本文： | 徐健,马秀英,郑君,贾洪林.弓形虫酵母双杂交cDNA文库构建及与Rop38相互作用蛋白的筛选[J].中国预防兽医学报,2015,37(7). |
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| 作者姓名： | 徐健 马秀英 郑君 贾洪林 |
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| 作者单位： | 中国农科院哈尔滨兽医研究所基础免疫创新团队-密歇根州立大学天然免疫联合实验室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 为筛选与弓形虫棒状体蛋白38基因(Rop38)相互作用的宿主细胞蛋白,本研究利用MatchmakerTM Gold酵母双杂交系统,构建了人成纤维细胞(HFF)和人T细胞(CEM.NKR)的c DNA文库,以构建的p GBKT7-Rop38作为诱饵质粒,采用PEG/Li Ac法转化酵母菌株Y2H,利用表型筛选法检测Rop38的自激活作用并进行酵母双杂交筛选。结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中无毒性和自激活作用,而且通过酵母双杂交筛选共获得29个与Rop38蛋白相互作用的宿主蛋白,其中HFF文库筛选到20个蛋白,CEM.NKR文库筛选到11个蛋白。本实验为进一步研究Rop38调节宿主细胞基因表达的信号通路奠定了基础。
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| 关 键 词： | 弓形虫 Rop38 酵母双杂交 自激活 |
Construction of yeast two-hybrid cDNA library of Toxoplasma gondii and screening of interacting with Rop38 |
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| XU Jian,MA Xiu-ying,ZHENG Jun,JIA Hong-lin.Construction of yeast two-hybrid cDNA library of Toxoplasma gondii and screening of interacting with Rop38[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2015,37(7). |
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| Authors: | XU Jian MA Xiu-ying ZHENG Jun JIA Hong-lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Toxoplasma gondii Rop38 yeast two-hybrid system self-activation |
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