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| 一个细胞融合实验体系的建立及初步应用 | |
| 引用本文： | 程德春,钟国才,刘彦虹,李宇星,张凤民,凌虹. 一个细胞融合实验体系的建立及初步应用[J]. 中国地方病学杂志, 2007, 26(6): 695-698 |
| 作者姓名： | 程德春 钟国才 刘彦虹 李宇星 张凤民 凌虹 |
| 作者单位： | 1. 哈尔滨医科大学微生物学教研室,150081 2. 哈尔滨医科大学附属第二医院 3. 美国NIH疫苗研究中心 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（30471608）;教育部重点研究项目（206403）;哈尔滨医科大学研究生创新基金 |
| 摘 要： | 目的建立-个细胞融合实验体系，观察凝血酶（thrombin，Th）对I型人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus type I，HIV-1）包膜糖蛋白（envelope glycoproteins，Env）介导的细胞融合的影响。方法采用携带HIV-1 JRFL 株env基因的表达质粒pSV—Ⅲ-JRFL—dCT与携带HIV-1tat基因的表达质粒pcTat共转染293T细胞，检测到细胞膜表面Env表达后，将pSV—Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat分别按1：2、2：3、1：1、2：1、5：1、10：1共转染293T细胞，然后再与Magic5A细胞进行融合实验，计数融合细胞数目并确定最适宜的融合条件，建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。在所建立融合体系基础上利用Th处理Env表达细胞。观察对融合作用的影响。结果pSV—Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat按1：1、2：1共转染293T细胞，可建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。Th能够增强细胞融合，且融合细胞数随着Th浓度增高而逐渐增加。Th处理10min与处理30min比较，融合增强作用更加显著。结论质粒pSV—Ⅲ-JRFL—dCT与pcTat按1：1、2：1共转染293T细胞，与MagieSA细胞进行融合实验可得到稳定的细胞-细胞融合实验体系，111对HIV-1包膜介导的细胞融合有促进作用。 |
| 关 键 词： | Ⅰ型人免疫缺陷病毒 HIV-1 包膜糖蛋白 细胞融合 凝血酶 实验体系 |
| 收稿时间： | 2007-01-22 |
Construction of a cell-cell fusion system and its primary application |
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| CHEN De-chun,ZHONG Guo-cai,LIU Yan-hong,LI Yu-xing,ZHANG Feng-min,LING Hong. Construction of a cell-cell fusion system and its primary application[J]. Chinese Jouranl of Endemiology, 2007, 26(6): 695-698 | |
| Authors: | CHEN De-chun ZHONG Guo-cai LIU Yan-hong LI Yu-xing ZHANG Feng-min LING Hong |
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