| 钙调蛋白基因缺陷HIS3酵母菌株的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 陈孙孝,廖万清,温海,姚志荣,邓安梅,仲人前.钙调蛋白基因缺陷HIS3酵母菌株的构建和鉴定[J].第二军医大学学报,2001,22(9):827-829. |
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| 作者姓名： | 陈孙孝 廖万清 温海 姚志荣 邓安梅 仲人前 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学长征医院皮肤科
2. 长征医院全军临床免疫中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 39870 0 12 )，杨森科学委员会研究基金 ( JRCC-990 4) |
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| 摘 要： | 目的：构建白念珠菌钙调蛋白基因（CMD1）缺陷HS3酵母菌体，为进一步探讨钙调蛋白基因突变对真菌生长周期及致病性的影响奠定基础。方法：首先将含cmd1::TRP1置换序列的质粒I转化二倍体酵母菌株YPH501(his3trplural），经Soutthern印迹法筛选出含TRP1序列的菌株。其次，将含CMD1序列的质粒Ⅱ转化以上TRP1阳性菌株，进行减数分裂后选择得到TRP1阳性酵母菌株单倍体。最后，将含trp1:HIS3置换序列质粒Ⅲ转化上述TRP1阳性单倍体菌株，用不含His培养基培养得到钙调蛋白基因缺陷HIS3酵母菌株。结果：经Southern印迹法证实cmd1：TRP1基因置换克隆；减数分裂后选择得到了TRP1阳性酵母菌株单倍体；质粒Ⅲ转化单倍体后经不含His培养基培养得到CMD1缺陷HIS3菌株，接种于不含Trp倍养基上未见有菌落生长，说明质粒Ⅲ转化单倍体后已将his3TRP1转换成HIS3trp1。结论：成功构建了钙调蛋白基因缺陷HIS3酵母菌株，基因型为cmd1trp1HIS3。
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| 关 键 词： | 白色念珠菌 钙调蛋白 基因转染 基因缺失 HIS3酵母菌体 |
| 文章编号： | 0258-879(2001)09-0827-03 |
| 修稿时间： | 2000年12月8日 |
Construction and identification of calmodulin gene defective HIS3 yeast cell |
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| CHEN Sun-Xiao,LIAO Wan-Qing,WEN Hai,YAO Zhi-Rong,DENG An-Mei,ZHONG Ren-Qian.Construction and identification of calmodulin gene defective HIS3 yeast cell[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2001,22(9):827-829. |
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| Authors: | CHEN Sun-Xiao LIAO Wan-Qing WEN Hai YAO Zhi-Rong DENG An-Mei ZHONG Ren-Qian |
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| Affiliation: | CHEN Sun-Xiao1,LIAO Wan-Qing1,WEN Hai1,YAO Zhi-Rong1,DENG An-Mei2,ZHONG Ren-Qian2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | candida albians calmodulin transfection gene deletion |
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