森林脑炎病毒滴度检测蚀斑法的建立及验证 |
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引用本文: | 陈娜娜,陈诗阳,王颖,杜翔宇,苗会,拱小棠,刘双军,李景良.森林脑炎病毒滴度检测蚀斑法的建立及验证[J].粉末涂料与涂装,2023(2):207-210+216. |
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作者姓名: | 陈娜娜 陈诗阳 王颖 杜翔宇 苗会 拱小棠 刘双军 李景良 |
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作者单位: | 1. 长春生物制品研究所有限责任公司疫苗三室;2. 长春理工大学生命科学技术学院 |
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摘 要: | 目的 建立原代地鼠肾(primary hamster kidney,PHK)细胞适应的森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)株(简称PHKT株)感染性滴度检测的蚀斑法,并对建立的方法进行验证。方法 将主代鼠脑适应株TBEV感染原代地鼠肾PHK细胞,连续传12代。分别采用蚀斑法(将不同代次PHKT以不同稀释倍数感染单层BHK-21细胞,中性红染色,计算蚀斑数)和小鼠脑内攻毒滴定法(将不同代次PHKT以不同稀倍数经脑腔攻击小鼠,0.03 mL/只,连续观察14 d,Reed-Muench方法计算半数致死量)检测PHKT滴度,并对两种方法检测结果的相关性进行分析。对建立的检测TBEV滴度的蚀斑法进行专属性、重复性和中间精密度验证。结果 PHKT病毒蚀斑滴度最高达8.9 lgPFU/mL;蚀斑法与小鼠脑内攻毒滴定法检测结果相关性较好(r=0.92);蚀斑法检测PHKT病毒感染性滴度专属性良好,重复性和中间精密度变异系数(CV)均<5%。结论 建立了检测PHKT感染性滴度的蚀斑法,可作为小鼠脑内攻毒滴定法的替代方法。
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关 键 词: | 森林脑炎病毒 蚀斑法 小鼠脑内攻毒滴定法 感染性滴度 森林脑炎灭活疫苗 |
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