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| 嵌合鞭毛蛋白fliC/esat佐剂效应的研究 | |
| 引用本文： | 张辉,文科,黄金林,胡茂志,申峻松,潘志明,焦新安. 嵌合鞭毛蛋白fliC/esat佐剂效应的研究[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2011, 27(4) |
| 作者姓名： | 张辉 文科 黄金林 胡茂志 申峻松 潘志明 焦新安 |
| 作者单位： | 1. 扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏,扬州,225009;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所,江苏南京210014 2. 扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏,扬州,225009 3. 扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏,扬州,225009;扬州大学,测试中心,江苏,扬州,225009 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(973)资助项目(2006CB504404); 国家科技重大专项(2008ZX10003-010); 国家自然科学基金资助项目(30871860); 江苏省科技攻关计划(BE2007340); 江苏省自然科学基金项目(BK2008011) |
| 摘 要： | 目的:研究嵌合形式表达的鞭毛蛋白对结核分枝杆菌(MTB)抗原ESAT-6的免疫佐剂效应。方法:用PCR方法扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因fliCi及MTB抗原ESAT-6编码序列,通过重叠PCR将ESAT-6编码序列插入fliCi的高变区域,构建嵌合鞭毛基因片段fliC/esa。t将fliC/esat片段分别插入原核表达载体pET,构建pET-fliC/esat质粒。将ESAT-6编码序列插入原核表达载体pBCX的多克隆位点,构建原核表达质粒pBCX-esat。以质粒pET-fliC/esat及pBCX-esat分别转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基1-1硫代-β呋喃半乳糖苷诱导融合的嵌合蛋白fliC/esat及ESAT-6蛋白的表达。以抗ESAT-6 mAb HYB 076-08为一抗,通过W estern b lot鉴定嵌合蛋白fliC/esat及ESAT-6蛋白。以两种蛋白分别在体外刺激骨髓树突状细胞(BMDCs),通过FACS分析共刺激分子CD40、CD80、CD86和CD54的表达,同时用ELISA检测前炎性因子IL-12p70表达的水平。此外,以两种蛋白分别免疫C57BL/6小鼠,运用ELIS... |
| 关 键 词： | ESAT-6 嵌合蛋白 鞭毛蛋白 佐剂 Th1型应答 |
The adjuvant effect of chimeric flagellin fliC/esat |
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| ZHANG Hui,WEN Ke,HUANG Jin-lin,HU Mao-zhi,SHEN Jun-song,PAN Zhi-ming,JIAO Xin-an. The adjuvant effect of chimeric flagellin fliC/esat[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2011, 27(4) | |
| Authors: | ZHANG Hui WEN Ke HUANG Jin-lin HU Mao-zhi SHEN Jun-song PAN Zhi-ming JIAO Xin-an |
| Affiliation: | ZHANG Hui1,3,WEN Ke1,HUANG Jin-lin1,HU Mao-zhi1,2,SHEN Jun-song1,PAN Zhi-ming1,JIAO Xin-an1 1Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis,2Testing Center of Yangzhou University,Yangzhou 225009,3Institute of Food Quality Safety and Detection,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences,Nanjing 210014,China |
| Abstract: | AIM:To determine the role of ESAT-6 chimeric flagellin in TB immunology.METHODS: The coding sequences of flagellin of Salmonella typhimurium and ESAT-6 of Mycobacterium tuberculosis were cloned by PCR and identified by sequencing,respectively.Chimeric flagellin gene fliC/esat was constructed by overlap PCR technique.The ESAT-6 coding fragment was inserted to the hypervariable region of Salmonella flagellin gene fliCi.And then prokaryotic exprssion plasmids of pET-fliC/esat,pET-fliC and pBCX-esat were constr... |
| Keywords: | ESAT-6 Chimeric protein flagellin adjuvant Th1 response |
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