β-1,4-半乳糖基转移酶-I在大鼠骨性关节炎模型中滑膜组织表达的意义

背景：观察β-1,4-半乳糖基转移酶-I（β-1,4-GalT-I）在手术诱导的大鼠骨性关节炎模型中的表达情况及细胞定位，并探讨其在OA病理过程中可能的生物学作用。方法：健康成年SD大鼠90只随机分为三组：OA模型组（40只）、假手术组（40只）和正常组（10只）。采取前交叉韧带切断加内侧半月板前1/3切除法破坏SD大鼠右膝关节稳定性以建立大鼠OA模型。于术后1、2、4、6、10周取实验动物右膝关节的滑膜与软骨组织，并分离获取成纤维样滑膜细胞进行培养，利用real-time PCR检测软骨、滑膜组织及TNF-α刺激成纤维样滑膜细胞后β-1,4-GalT-I在mRNA水平的表达变化；运用Western-blotting和免疫组化检测β-1,4-GalT-I在蛋白水平的表达情况；利用免疫荧光双标法检测β-1,4-GalT-I与巨嗜细胞样滑膜细胞、成纤维细胞样滑膜细胞、中性粒细胞及TNF-α的定位情况；运用ELISA检测成纤维样滑膜细胞在脂多糖及脂多糖联合β-1,4-GalT-I抗体等刺激下TNF-α的表达情况。结果：β-1,4-GalT-I mRNA在OA组大鼠的滑膜组织中表现出上调趋势，于术后2w、4w达到高峰；在蛋白水平，β-1,4-GalT-I在OA术后4w组的滑膜组织中达到高峰。但是，β-1,4-GalT-I在软骨组织中的表达未检测到明显差异。在OA滑膜炎症过程中，β-1,4-GalT-I主要表达于巨嗜细胞样滑膜细胞、成纤维细胞样滑膜细胞和中性粒细胞，并且β-1,4-GalT-I与TNF-α共定位。在体外细胞培养中，成纤维样滑膜细胞中β-1,4-GalT-I的表达与TNF-α刺激呈浓度和时间依赖性。此外，β-1,4-GalT-I抗体可减弱脂多糖刺激成纤维样滑膜细胞产生TNF-α的能力。结论：β-1,4-GalT-I可能参与了OA的滑膜炎症反应，并在这一过程中发挥重要作用。[关键词] β-1,4-半乳糖基转移酶-I；骨性关节炎；滑膜炎症；肿瘤坏死因子α；大鼠