E2F1对XRCC1启动子调节作用的研究

目的：探讨E2F1对XRCC1启动子的调节作用及其意义。方法：PCR扩增XRCC1启动子序列克隆至pGL3-Basic荧光报告载体上，与E2F1或突变的E2F1（132E）表达载体分别同时转染SaO2细胞；从基因Bank中调取XRCC1启动子序列和E2F结合位点序列分析其相关性；设计引物逐渐从5′端删除与E2F结合位点相关的序列，将PCR产物分别克隆至pGL3-Basic荧光报告载体上，转染至SaO2细胞。细胞裂解后与β-gal反应液一同保温，570nm处读取吸光度值。结果：XRCC1与E2F1共转染后，可以诱导XRCC1荧光强度的增加；XRCC1启动子序列5′端-819～-803与E2F结合住点相关，删除5′端序列使荧光强度减少。结论：E2F1作用于XRCC1启动子序列，上调XRCC1转录。