| 犬白细胞介素2在毕赤酵母中的诱导表达及生物活性的测定 |
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| 引用本文： | 朱骞,张汇东,葛菲菲,缪勤,曹瑞兵,陈溥言,徐汉坤. 犬白细胞介素2在毕赤酵母中的诱导表达及生物活性的测定[J]. 农业生物技术学报, 2007, 15(4): 574-578 |
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| 作者姓名： | 朱骞 张汇东 葛菲菲 缪勤 曹瑞兵 陈溥言 徐汉坤 |
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| 作者单位： | 1. 公安部南京警犬研究所,南京,210012
2. 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京农业大学动物医学院,南京,210095 |
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| 摘 要： | 以ConA刺激的犬外周血淋巴细胞总RNA为模板，通过RT-PCR方法扩增出犬IL-2成熟蛋白基因，将目的片段连接到pMD18-T载体，测序结果显示，扩增片段与GenBank上发表的序列一致。然后将目的片段连接到酵母表达载体pPICZa-A上，得到重组酵母犬IL-2表达载体pPICZaA-CaIL-2，经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR方法筛选重组酵母菌，甲醇诱导表达，SDS-PAGE结果显示表达上清中有大小约20kDa的目的条带，比实际分子量略大，推测蛋白可能发生糖基化。MTT法测定生物学活性结果表明，重组犬IL-2能够极显著促进犬外周血淋巴细胞增殖。证明酵母表达的犬重组IL-2具有良好的生物学活性。
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| 关 键 词： | 犬 IL-2基因 毕赤酵母 诱导表达 生物学活性 |
| 文章编号： | 1006-1304（2007）04-0574-05 |
| 收稿时间： | 2006-11-28 |
| 修稿时间： | 2007-02-02 |
Expression of Recombinant Canine Interleukin-2 in Pichia pastoris and Identification of Its Bioactivity |
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| ZHU Qian,ZHANG Hui-dong,GE Fei-fei,MIAO Qin,CAO Rui-bing,CHEN Pu-yan,XU Han-kun. Expression of Recombinant Canine Interleukin-2 in Pichia pastoris and Identification of Its Bioactivity[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2007, 15(4): 574-578 |
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| Authors: | ZHU Qian ZHANG Hui-dong GE Fei-fei MIAO Qin CAO Rui-bing CHEN Pu-yan XU Han-kun |
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| Affiliation: | 1. Nanjing Policedog Institute, Ministry of Public Security, Nanjing 210012, China;2. Key Laboratory of Animal Diseases Diagnosis and Immunology ,Ministry of Agriculture, College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | dog interleukin-2 gene Pichia pastoris expression bioactivity |
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